阴离子交换色谱-荧光检测法测定人体血清中酪氨酸及其代谢产物

建立了阴离子交换色谱-荧光检测法(AEC-FLD)同时测定人体血清中的酪氨酸(Tyr)、对羟苯基乳酸(PHPLA)和对羟苯基丙酸(PHPA)的分析新方法。样品经乙腈处理沉淀蛋白,离心后取上清液直接进样检测。采用IonPac AG21保护柱(50×2mm)、IonPac AS21分析柱(250×2mm),流动相为4mmol/L NaOH溶液,流速为0.45mL/min,荧光检测器的激发波长和发射波长分别为277nm和340nm。优化条件下三种物质能得到良好的分离和检测。Tyr、PHPLA和PHPA的线性范围分别为0.30~25mg/L、0.025~2mg/L和0.025~2mg/L,相关系数在0.9998~0.9999之间,检出限(S/N=3)分别为0.024mg/L、0.020mg/L和0.019mg/L。三个水平的加标回收率在72.6%~99.1%之间,其相对标准偏差均小于6.62%。该方法简单、快速、准确,可用于实际样品的测定。