超分子变构催化剂——新型化学传感器

美国西北大学的C．A．Mirkin及其研究小组试图构建可以模拟生物体系的超分子，为此对超分子络合化学的研究已经有10年之久。在此过程中，该小组开发了多种探测系统。他们的目标是构建类似于PCR（聚合酶链反应）或ELISA（免疫测定）的模拟生物体系，在探测某种试样时，通过触发催化过程，使信号放大到能够直接读出的程度。     

TaqMan-分子灯标：一种新型的荧光基因检测探针

在TaqMan及分子灯标的基础上开发了一类新型的均相荧光检测探针—— TaqMan-分子灯标(TaqMan-MB)，该探针集合了分子灯标的发夹结构及TaqMan探针降 解作用的工作原理，使检测效果更好．与实时PCR仪联用，可用于靶基因的定量检 测．     

一种αⅠ型干扰素基因新变种的发现和鉴定

本文从一名中国汉族正常人胎肝细胞染色体DNA中,应用PCR方法两次获得长为520 bp的人α型干扰素基因,核苷酸序列测定表明,两次扩增产物的DNA序列完全相同,与过去分离克隆的IFN-αI和IFN-αD基因相比较,其第410位和第541位核苷酸分别为C和G,由此推测它编码的IFN成熟肽第114位和第158位氨基酸应为Ala和Val,其余位点则与IFN-αD和IFN-αI完全相同.我们建议将IFN—αD,IFN—αI和我们分离的IFN-αI/158V基因分别命名为IFN-αIa,IFN-αIb和IFN-alc基因.     

A Flexible Approach to the γ－Amino－β－hydroxy Acid Moiety of Hapalosin

A flexible approach to ethyl (3R,4S)-N-Boc-4-amino-3-hydroxy-5-phenylpentanoate (N-Boc-AHPPA-OEt), the γ-amino-β-hydroxy acid moiety of hapalosin is described. The synthetic method features a ring-opening ethanolysis of an activated N-Boc-lactam, which is obtained via a diastereoselective reductive-alkylation of (R)-malimide derivative. The flexibility of the method resides in the introduction of the alkyl side chain by Grignard reagent addition.     

基序B参与调控模板依赖的聚合酶抑制作用

RNA依赖的RNA聚合酶是参与新冠病毒进行RNA复制与转录的主要分子机器. 之前的实验研究表明瑞德西韦在模板链上时存在两次抑制作用,即不仅可以抑制与之互补的尿嘧啶核苷三磷酸的加成,还可以抑制下一位核苷三磷酸的加成. 然而,第二次抑制作用的分子机制尚未阐明. 本文运用了分子动力学模拟,发现瑞德西韦在模板链上的第二次抑制不是直接作用于核苷酸在活性位点的加成,而是源于瑞德西韦从+1位点到-1位点的迁移过程受到阻碍,这将导致活性位点无法空出,核苷三磷酸无法进入活性位点从而产物链的延长被终止. 首先,发现了基序B中G683会和瑞德西韦的1''-氰基相互作用,导致移位后态的RNA双链配对稳定性低于移位前态,从而使得瑞德西韦的移位在热力学上不易发生. 其次,由于瑞德西韦的1''-氰基在迁移过程中会与基序B的S682产生位阻,进一步从动力学上阻碍了瑞德西韦动态移位的发生. 本研究不仅揭示了基序B上两个相邻且高度保守的氨基酸可以调控瑞德西韦沿模板链的移位过程,同时,本文的发现也进一步完善了对瑞德西韦抑制新冠病毒RNA复制和转录的分子机制的理解.     

毛细管电泳技术快速检测牙周病原菌

建立了毛细管电泳快速检测牙龈卟啉单胞菌(P.g)、齿垢密螺旋体(T.d)、福赛斯坦纳菌(T.f)3种牙周病病原菌种的方法。紫外分光光度法表明,采用无菌吸潮纸尖及PBS缓冲液可以实现牙周病原菌的快速有效提取。对提取的牙周病病原菌种做多聚酶链式反应(PCR)与多重PCR反应,最后以20 cm长,75μm内径的石英毛细管作为分离通道,分离电压4000 V,1.2%羟乙基纤维素(HEC,250 K)为筛分介质,牙周病病原菌菌种P.g,T.d,T.f PCR及多重PCR产物12 min内得到较好分离。结果表明,毛细管电泳与PCR技术相结合,可以实现牙周病原菌种快速鉴定,且检测限低至4.80×10-11ng/μL。方法已用于牙周病原菌菌种的快速检测。     

2-芳基-3-羰基喹诺酮:新型HCV NS5B多聚酶抑制剂的设计、合成和活性评估

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,简称HCV)编码的多聚酶NS5B是丙肝病毒RNA复制的必需酶,已成为抗丙肝药物设计的有效靶标.基于HCV NS5B多聚酶的活性位点需要结合二价金属离子作为催化辅因子的机理,含有金属螯合模段的喹诺酮酸骨架被合理用来发现新结构的非核苷HCV抑制剂.根据喹诺酮酸抑制剂与NS5B多聚酶的结合模式,我们第一次设计在喹诺酮酸的2-位引入疏水基团,同时调节N-1,C-3和C-7位的取代基结构,运用我们发展的一锅煮新方法合成了结构多样的喹诺酮酸衍生物,并运用HCV体外感染实验系统进行抗病毒活性的评估,我们开展了系统的构效关系研究,发现了新结构类型的非核苷HCV抑制剂.这些2-芳基-1-环丙基/烯丙基喹诺酮酸衍生物在低浓度(μmol?L-1)下能有效抑制HCV病毒在宿主细胞Huh7.5.1的复制,并具有2~6倍的安全窗口,有进一步优化成抗HCV候选药物的潜力.     

聚合酶链式反应技术应用

聚合酶链式反应技术应用郭春沅，计新（吉林延边特产研究所延吉１３３００１）（吉林省延边师专物理系延吉１３３０００）聚合酶链式反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎＲｅａ－ｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）是一种特异性ＤＮＡ体外扩增技术，现已成为基础分子生物学研究、基因...     

A NEW KIND OF FIBER-SPUN FROM POLYSULFONAMIDE/ZINC SOLUTION

In this paper, we succeed in fabricating high-temperature fiber of polysulfonamide/ZnO. Polysulfonamide/ZnO nanocomposite was prepared by in-situ polymerization. Some studies and characterization of Polysulfonamide/ Zinc oxide nanocomposite with ZnO 0.5% have been done. It includes ηr,, Crystal degree and thermal property. Experiment＇s results showed that, ZnO as filler can improve crystal degree of polysulfonamide fiber. The crystal degree has been bnproved, from lower than 20% up to 27%. ηr of polysulfonamide/ Zinc oxide nanocomposite solution with ZnO 0.5% is 2.03. The maxinum weight loss of the nanocomposite occurred at 453.5 ℃.     

激光诱导荧光毛细管电泳法优化随机寡核苷酸文库聚合酶链反应扩增的条件

寡核苷酸文库的聚合酶链反应(PCR)扩增是指数富集系统配基进化技术(SELEX)筛选适配子技术中的重要步骤.本研究采用毛细管电泳技术结合激光诱导荧光检测器(CE-LIF),通过对双链产物、PCR副产物以及剩余引物的考察,研究了寡核苷酸文库PCR扩增时的影响因素,并对其进行优化.结果表明,随机寡核苷酸文库的扩增与传统均一模板的扩增显著不同,其在扩增十几个循环时产物就达到最大值;此外,初始模板数、退火温度、DNA聚合酶浓度等条件也有所不同.因此, 在进行SELEX筛选之前必须对文库PCR条件进行详细优化.本研究中N39文库优化后的PCR扩增条件为:初始模板的量为105个分子,DNA聚合酶浓度0.05 U/μL,退火温度70 ℃,18个循环.本研究为利用SELEX技术有效筛选适配子,降低筛选的假阳性及提高特异性提供了参考依据.