鼠源VCAM-1真核表达载体构建及在同源细胞中过表达研究

构建鼠源VCAM-1基因的真核表达载体,并使其在C2C12细胞中过表达,为相关病毒受体研究奠定基础.采用RT-PCR方法扩增鼠源VCAM-1基因,构建重组载体pcDNA3.1-VCAM-1.通过脂质体法转染至C2C12细胞内;采用实时荧光定量PCR和Western-blot分别检测目的基因和蛋白的过表达情况.应用间接免疫荧光实验分析VCAM-1在细胞中的定位.构建的重组质粒pcDNA3.1-VCAM-1转染C2C12细胞后,实验组VCAM-1基因和蛋白表达均显著高于对照组细胞(P0.01),且主要表达定位于胞浆中.结果表明,实验成功地构建了鼠源VCAM-1真核表达载体,并在同源细胞中实现过表达.     

风味蛋白酶水解牦牛血液蛋白工艺优化研究

通过风味蛋白酶水解牦牛血液蛋白,以蛋白水解率为指标,采用单因素实验探究水解pH、水解温度、料液比、酶浓度、水解时间五个因素对牦牛血液蛋白水解效果的影响.在此基础上以五因素三水平正交试验(L18 (37))优化水解工艺,发现较佳水解工艺参数为A1B2C3D3E3,即最适pH为6.0、最适温度为50℃、料液比为1∶9.0g...     

禽流感病毒(AIV)的特征与防治

禽流感是A型流感病毒所引起的禽类的一种流行性感冒 .鸡、火鸡、鸭和鹌鹑等家禽及野鸟、水禽、海鸟等均可感染 ,发病情况轻重不一 ,从急性败血性死亡到无症状带毒等极其多样 ,主要取决于宿主和病毒两方面的情况而定 .最早于 1878年发生在意大利 随后 ,在欧洲、南美及东南亚国家 ,美国和苏联也有局部发生 ,现在几乎已蔓延世界各地 ,而且致病性越来越强 ,对世界养禽业构成了严重的威胁 ,造成了巨大的经济损失 ,并且高度致死性禽流感H5N1传染到人并引起人的死亡 .所以 ,应该引起有关部门的高度重视 ,严防本病的扩散和蔓延     

我国动物血清规模化生产的现状和质量控制

通过阐述我国动物血清规模化生产的现状,对其分类、应用和国内外的质量控制标准作了简要的介绍.     

细胞用胰蛋白酶制备的新工艺研究

用新鲜牛胰脏,采用盐析、层析、超滤方法对胰蛋白酶的提取和纯化工艺进行优化,探索一套胰蛋白酶制备的新工艺.结果表明:此工艺比传统工艺的操作相对简单,周期短,只需一星期;酶比活和收率比传统工艺高,酶比活可达2 368.5 BAEE/mg,收率为0.48%.可为细胞用胰蛋白酶的产业化生产提供一定的理论和实验依据.     

枸杞总黄酮提取工艺优化及不同年份枸杞总黄酮含量测定

为探究枸杞贮藏过程中总黄酮含量变化规律,以枸杞总黄酮提取率为指标,采用单因素实验研究浸提温度、乙醇体积分数、料液比和提取时间4因素对枸杞总黄酮提取率的影响,设计正交试验优化提取工艺,并在优化条件下研究不同年份枸杞总黄酮含量及理化指标间的差异.结果发现,最佳提取工艺参数即浸提温度70℃、乙醇体积分数80%、料液比1∶15 g/mL、提取时间2.5 h、提取次数为2次.在此条件下,发现枸杞总黄酮含量随贮藏时间延长而呈现下降的变化趋势,这为枸杞总黄酮的开发利用和快速鉴别枸杞新陈提供理论依据.     

牦牛转铁蛋白抗菌与抗肿瘤作用的实验研究

用细胞株体外培养技术和抑菌试验 ,研究牦牛血清转铁蛋白对HeLa细胞株生长的影响和对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌作用 .结果 :①一定浓度牦牛血清转铁蛋白对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌具有较强的抑菌作用 ,抑菌圈直径达 2 .0cm以上 ;②牦牛血清转铁蛋白在 10 μg/mL时 ,对HeLa细胞株生长和集落形成均无明显的抑制作用 ,但当牦牛血清转铁蛋白在 2 5 μg/mL时 ,对HeLa细胞株生长和集落形成均有明显的抑制作用 ,并且随着作用时间的延长和浓度的增加 ,其抑制作用明显增强 .这表明 ,牦牛血清转铁蛋白具有一定的抗菌和抗肿瘤作用     

饮料中内毒素含量测定及对其生产过程卫生质量控制的探讨

采用鲎试验法(limulustest,LT)对市售的几种饮料和自来水进行了细菌内毒素的测定,结果显示两种饮料内毒素含量在750～1000EU/ml之间;另两种饮料的内毒素含量在50～100EU/ml;矿泉水的内毒素含量低于2.5EU/ml;而自来水的内毒素含量则在200～250EU/ml之间 上述结果提示:各种饮料和水之间的内毒素含量存在很大差异性 这在一定程度上表明了部分饮料的原料及其生产过程受到了细菌的污染 用此方法检测饮料或生产用水中细菌内毒素的含量,可以了解饮料和水在其生产过程中,受细菌污染的程度以及生产中的卫生质量状况 用此方法检测时间短、结果可靠     

高效液相色谱法测定氨基酸的研究进展

氨基酸是构成生物体的基础物质,氨基酸分析是生命科学研究中最重要的领域之一。高效液相色谱法因分析速度快、操作简便、检测灵敏、适用范围广等优点而广泛应用于食品工业、制药工业、生命科学研究等领域。该文综述了高效液相色谱分析氨基酸的方法,包括柱后衍生法、柱前衍生法、高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法和高效液相色谱-蒸发光散射检测法。并对上述方法进行了比较,为日常的氨基酸分析提供了参考。     

不同批次新生牛血清对CHO细胞培养效果的研究

为建立静置及微载体悬浮培养中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)的最适血清的快速筛选方法,在含10％不同批次国产新生牛血清的F12培养液中培养CHO细胞,分别用传代稳定性观察、克隆形成率、绘制微载体培养生长曲线及生长动力学分析的方法,评价不同批次国产新生牛血清对CHO细胞促生长...