敏感及抗性棉铃虫不同龄期幼虫神经细胞Na+通道电生理特性的比较研究

用膜片钳技术分析了棉铃虫三氟氯氰菊酯抗性品系(R)及其同源对照品系(S)不同龄期幼虫神经细胞电压门控Na^ 通道的电生理特性．结果表明，S幼虫神经细胞Na^ 通道的激活电压介于-50～-30mV，约70％细胞的Na^ 通道在-40mV左右激活．Na^ 通道电流(1Na)的峰值电压介于-30～0mV，约72％细胞的1Na在-20mV左右达峰值．R幼虫Na^ 通道的激活电压介于-50～-20mV，约60％细胞的Na^ 通道在-40mV左右激活，约30％的在-30～-20mV激活．2龄幼虫(R2)约76％细胞的1Na在-20mV左右达峰值．R3和R4均有60％以上细胞的INa在-10～OmV达峰值，即R3和R4多数细胞1Na的峰值电压向正电位方向移动．上述结果表明R幼虫神经细胞Na^ 通道功能发生了变异，同时也提示R幼虫在不同发育阶段其Na^ 通道的表达不同．     

用膜片钳技术筛选光学活性杀虫剂

膜片钳技术是一种以记录通过离子通道的电流来反映细胞膜上离子通道分子活动的技术。离子通道存在于几平所有细胞的质膜里，是细胞膜上的特殊蛋白质大分子形成的对适当大小和带有适当电荷的离子具有高度选择性的孔道，是多种药物的作用靶标。药物作用于离子通道后，通道蛋白的构型或开与关的状态会发生变化，从而引起细胞乃至机体的一系列反应。     

弱激光诱导神经元兴奋性改变的实验研究

利用全细胞膜片钳技术研究弱激光诱导下大鼠海马CA3区锥体神经元兴奋性.实验结果显示：弱激光作用使神经元钠通道激活电位向超极化方向移动,钠电流幅度增大,且这种增大作用具有电压依赖性和可逆性.激光作用显著影响钠电流稳态激活与失活特性,对照组和照射组通道半数激活电压分别为(-4414±528)mV和(-5655±614)mV(n=8,P<001),半数失活电压分别为(-6902±1031)mV和(-5660±897)mV(n=8, P<0 关键词： 钠离子通道 膜片钳技术 弱激光 动作电位 神经元     

蟋蟀同工酶的比较研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析了蟋蟀科３属共计７种蟋蟀的酯酶（ＥＳＴ）同工酶,对其中两种的苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶进行了研究．结果表明,ＥＳＴ酶谱可分为迁移率快和慢的两个区．ＥＳＴ在属间具有明显差异,属内种间具有某些共性．形态近似种间的酶谱极为相似,表明其亲缘关系较近．在实验基础上讨论了用同工酶方法分析近缘种时,应调查大量个体以找出酶谱变化规律,同时还应结合形态学、生态学等资料,以使分析结果更趋于客观实际．     

三氟氯氰菊酯对棉铃虫中枢神经细胞高电压激活Ca~(2+)通道激活的影响

用全细胞膜片钳技术分析了棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)幼虫中枢神经细胞电压门控Ca~(2+)通道的电生理学特性,并检测了三氟氯氰菊酯(cyhalothrin,Cyh)对Ca~(2+)通道功能特性的影响.结果表明,Ca~(2+)通道电流(I_(Ca))激活阈值-40 mV,峰值电压介于-10 mV-10 mV.约82%细胞的I_(Ca)在-20 mV激活,93%细胞的I_(Ca)在0 mV左右达峰值.棉铃虫表达高电压激活、对Cd~(2+)敏感的Ca~(2+)通道和高电压激活、对Cd~(2+)不敏感的Ca~(2+)通道.Cyh作用后,I_(Ca)在幅值减小的同时,I-V曲线和激活曲线均向超极化方向移动10-20 mV,表明Cyh不仅对I_(Ca)有抑制作用,对Ca~(2+)通道的激活也有影响,棉铃虫幼虫腹神经索中枢神经细胞高电压门控Ca~(2+)通道也是Cyh的作用靶标之一.     

七氟菊酯和溴氰菊酯对棉铃虫神经细胞大电导钙激活钾通道电流的影响

旨在明确棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)神经细胞上是否存在大电导钙激活钾通道(Largeconductance calcium-activated potassium channels,BKCa),进而探究BKCa通道是否为七氟菊酯(I型)和溴氰菊酯(II型)的作用靶标.应用全细胞膜片钳技术首次记录了棉铃虫中枢神经细胞BKCa通道电流并分析了七氟菊酯和溴氰菊酯对BKCa通道的影响.结果显示,棉铃虫神经细胞膜上表达BKCa通道,其电流为一串快速激活、有快失活成分的电流,在-40 m V左右激活,电流幅值随刺激电位的增加而增强.七氟菊酯和溴氰菊酯均能显著抑制BKCa通道的峰值电流,使BKCa通道激活的电压依赖性发生改变,使激活曲线向去极化方向移动,其中七氟菊酯使半数激活电压(V1/2)向去极化方向移动约8 m V,溴氰菊酯使V1/2向去极化方向移动约16 m V.七氟菊酯和溴氰菊酯均能显著缩短BKCa通道快失活时间常数.上述结果表明BKCa通道是七氟菊酯和溴氰菊酯的作用靶标.     

抗性棉铃虫神经细胞的离体培养和超微结构分析

对棉铃虫幼虫神经细胞进行了离体培养,并建立了其体外培养的实用方法。神经细胞在增补棉铃虫幼虫血淋巴的TC-100培养基中可贴壁生长,存活5-7d,培养基中不加血淋巴,而增补谷氨酰胺时,细胞也可贴壁生长,但接种24h后出现老化现象,增补适量葡萄糖,细胞可存活22-28d。细胞存活的最适pH值为6。4.90%的细胞具多条突起,与在体内生长有明显区别。棉铃虫抗性种群、对照种群、同种群不同龄期幼虫以及同一个体胸、腹神经节的神经细胞体外培养时形态无明显差异,但抗生品系幼虫运动神经元内线粒体明显增多,且神经围鞘与神经世膜厚度之比明显增加。     

弱激光对神经元钾离子通道特性影响的实验研究

利用波长为670 nm、功率为5 mW的半导体激光器照射急性分离的大鼠海马CA3区锥体神经元，应用全细胞膜片钳技术研究其瞬时外向钾离子通道特性.实验发现：弱激光对瞬时外向钾电流具有抑制作用,并且该抑制作用呈现电压依赖性和可逆性.激光作用可显著影响通道稳态激活和失活过程，激光照射组和对照组比较，电流稳态激活曲线向去极化方向移动，半数激活电压升高，曲线斜率因子改变；而失活曲线向超极化方向移动，半数失活电压降低，曲线斜率因子不变.结果表明，弱激光作用海马神经细胞可以改变其瞬时外向钾离子通道特性，从而影响动作电位的形成和发放，调节神经元生理功能,有利于受损神经元的恢复和再生. 关键词： 瞬时外向钾离子电流 膜片钳技术 弱激光照射 神经元     

弱激光诱导神经元兴奋性改变的实验研究

利用全细胞膜片钳技术研究弱激光诱导下大鼠海马CA3区锥体神经元兴奋性.实验结果显示：弱激光作用使神经元钠通道激活电位向超极化方向移动,钠电流幅度增大,且这种增大作用具有电压依赖性和可逆性.激光作用显著影响钠电流稳态激活与失活特性，对照组和照射组通道半数激活电压分别为(-4414±528)mV和(-5655±614)mV(n=8,P<001)，半数失活电压分别为(-6902±1031)mV和(-5660±897)mV(n=8, P<0     

两种蟋蟀同工酶的比较研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析石首棺头蟋（Ｌｏｘｏｂｌｅｍｍｕｓｅｑｕｅｓｔｒｉｓ）与泰康棺头蟋（Ｌ．ｔａｉｃｏｕｎ）的酯酶（ＥＳＴ）和苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）同工酶．两种蟋蟀的ＥＳＴ和ＭＤＨ同工酶酶谱极为相似．其中ＥＳＴ酶谱可分为４个区带组,推测受４个位点控制．因这两种蟋蟀的形态特征极为相似,两种同工酶酶谱也比较相似,而且控制ＥＳＴ的位点数相同,因此推测两者的亲缘关系比较接近,极有可能为近缘种