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把大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因克隆到带有GAL1启动子的酵母诱导表达质粒pYES2中,研究了酵母半乳糖诱导启动子GAL1控制下的基因表达特性.研究表明,β-半乳糖苷酶基因的表达明显地受培养基中碳源的调节,产生的β-半乳糖苷酶可达细胞总蛋白含量的10%左右,从而为利用可调控表达系统在酵母菌中实现外源基因较高水平表达打下了一定基础. 相似文献
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以酿酒酵母为材料,用穿梭质粒pYES2进行电击转化的条件实验.实验表明电击中电压大小、细胞的生长状态、处理条件和电击后细胞的培养时间以及质粒浓度等对电击转化率均有影响.取对数生长期酵母细胞,用二硫苏糖醇(DTT)处理以疏松细胞壁,加0.7μg/mL质粒DNA,5kV电压电击,转化后细胞在完全培养基中培养60min后,涂布选择培养基,转化率可达4.8×105个转化子/μg质粒DNA,细胞的存活率为39.2%,比完整细胞转化的效率高,存活率偏低 相似文献
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含α—乙酰乳酸脱羧酶基因重组酿酒酵母的啤酒发酵 总被引:7,自引:0,他引:7
利用E.coli和酿酒酵母的穿梭质粒pYES2为载体,将寻衣芽孢杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因导入酿酒醇母中,构建了重组质粒pYEA,实现了α-乙酰乳酸脱羧酶基因在酵母菌中的表达。 相似文献
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以酿酒酵母两种不同类型的嗜杀菌株SK4(K1型)和ERR1(K2型)为材料,分析了不同嗜杀酵母的嗜杀特性.证明两株菌产生的毒素蛋白的最适条件不同,最适pH和温度分别为4.8、16℃和4.2、22℃,但均对在对数生长期的敏感细胞作用最显著.SK4和ERR1的嗜杀质粒的比较表明:M1-dsRNA质粒和M2-dsRNA质粒分子量分别为1.7kb和1.5kb,两株菌的L-dsRNA质粒均为4.0kb.用高温和紫外线处理嗜杀酵母,嗜杀活性随之消失. 相似文献
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以酿酒酵母两种不同类型的嗜杀菌株SK4和ERR1为材料,分析了不同嗜杀酵母的嗜杀特性。 相似文献
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利用E .coli和酿酒酵母的穿梭质粒pYES2为载体 ,将地衣芽孢杆菌α 乙酰乳酸脱羧酶基因导入酿酒酵母中 ,构建了重组质粒pYEA ,实现了α 乙酰乳酸脱羧酶基因在酵母菌中的表达 .α 乙酰乳酸脱羧酶基因在酵母菌中的表达与菌体生长有关 .pYEA质粒在无选择压力的发酵条件下 ,仅能保持一定的稳定性 ,并具有降解α 乙酰乳酸的能力 ,但丢失率比较高 . 相似文献
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