双液相反应体系中脂肪酶催化拆分缩水甘油酯

利用脂肪酶作为催化剂在双液相反应体系中对外消旋缩水甘油酯进行立体选择性的酯水解反应. 考察了影响该拆分反应的因素， 确定了最适酶源为猪胰脂肪酶； 最适底物为缩水甘油丁酯； 其它最适反应条件： pH为7.6； 温度为27 ℃； 反应时间为4 h. 在最适 条件下， 当酶促拆分反应的转化率为60.6%时， 缩水甘油丁酯的光学纯度可以达到93.3%以 上.     

有机相中脂肪酶催化糖酯合成的研究

研究了有机相中脂肪酶催化以单糖和乙酸乙烯酯或乙酸酐为底物的糖脂合成反应。建立了定性、定量检测糖酯的方法，考察了７种脂肪酶催化糖酯合成的活力，发现来自假单孢菌属的ＰＳＬ１的活力最高。研究了ＰＳＬ１对不同单糖底物的选择性，发现对甘露醇的选择性最好，转化率可达９５％。研究了反应体系中的含水量对糖酯合成的影响，探讨了酶浓度和温度对反应的影响。     

N-(2-甲基-6-乙基苯基)丙氨酸对映体的毛细管电泳分离

采用高效毛细管区带电泳法,以β-环糊精及其衍生物作为手性选择剂,对外消旋N-(2-甲基-6-乙基苯基)丙氨酸(EMPA)的两个对映体进行了手性分离,比较了环糊精种类、环糊精浓度、电解质溶液pH值、温度和电场强度对分离的影响.实验结果表明,采用2,6-O-二甲基-β-环糊精为手性选择试剂,环糊精浓度为40mmol/L、电解质溶液pH=5.5及温度为20℃时分离效果最佳,对映体基本达基线分离,线性范围为20～200mg/L,最低检测限为10mg/L.     

高碘酸活化肝素修饰~(125)Ⅰ-尿激酶在小白鼠体内的分布与代谢

本文用~(125)Ⅰ示踪法对此研究了高碘酸活化肝素修饰尿激酶和天然尿激酶在小白鼠体内的分布与代谢。结果表明,与天然酶相比,修饰酶在其主要排泄器官(肾脏)中分布较低,在肝脏则相反。修饰酶不仅完全保留了天然酶的活性,而且明显地延长了在血液中的滞留时间。     

利用酸值监测脂肪酶催化豆油水解反应的进程

采用解脂假丝酵母脂肪酶对豆油的水解进行研究, 通过高效液相色谱对水解产物成分进行了分析鉴定, 得出豆油水解产物成分的相对含量, 并根据其酸值的大小与水解产物中各成分相对含量的对应关系, 初步建立了监测脂肪酶催化水解豆油反应进程的方法.     

乙酰肉碱的化学合成与酶法拆分

采用化学方法以肉碱为底物, 合成了外消旋乙酰肉碱, 精制后可获得纯度99%以上的乙酰肉碱, 收率为96%. 利用蜗牛酶（Snail Enzyme）对其进行不对称酯水解反应, 发现蜗牛酶对乙酰肉碱具有高度立体选择性, 并且可得到光学纯度为98%的乙酰-L- 肉碱.     

定向进化提高枯草芽孢杆菌脂肪酶的活力

通过定向进化的方法, 提高了一个新的源于枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis) 的脂肪酶 (BSL2) 的活力. 经过两轮易错 PCR 以及高通量筛选, 最终获得了比活力为野生出发酶 4.5 倍的突变体 3-1B2. 基因比对结果表明, 共有两个氨基酸发生了突变. 突变酶的酶学性质研究发现, 与野生酶相比, 它的热稳定性及 pH 稳定性略有增加, 最适温度和最适 pH 值则无太大的变化. 同源模建了 BSL2 与 3-1B2 的结构, 并与底物进行了分子对接. 结果表明, 突变体 3-1B2 的结合能比野生型 BSL2 低 1.29 kcal/mol, 活性中心 Ser77 残基与底物羰基的距离也由 0.319 nm 减小为 0.278 nm, 因而加快了酶反应速度, 提高了酶活力.     

用微机作修饰尿激酶在小鼠体内分布代谢的统计

药物研究经常要作药代动力学实验,实验所得的大量数据需进行统计学处理,这是一件繁重的工作。本文以高碘酸活化肝素修饰的尿激酶和天然尿激酶在小鼠血液、肝、肾中的分布代谢为例,设计了计算机程序,用IBM—PC微机对实验数据作统计处理,不仅提高了工作效率、节省了时间,而且保证了准确性。     

内切葡聚糖酶的纯化及其基本性质

纤维素酶是自然界碳素循环中的一种关键酶,它可以将纤维素性材料,转化为可直接利用的葡萄糖,并可通过其它酶和酶系统的作用转化为乙醇及蛋白质。纤维素酶是多酶体系,包含外切葡聚糖酶、内切葡聚糖酶(Cx)及β-葡萄糖苷酶。其中内切葡聚糖酶含有若干种同工酶,能将可溶性纤维素转化为还原寡糖,是纤维素酶系中的重要组分,为了深入研究Cx酶的性质,本文对其中一种Cx酶进行了分离纯化,并对其基本性质进行了研究。 1实验部分