不同方法提取鳗鲡病原茵DNA模板的差异分析

利用吸光值、琼脂糖电泳及PCR差异扩增等指标,对酚一氯仿法、水煮法、碱裂解法3种方法制备的鳗鲡病原菌DNA模板进行了差异分析．结果表明：1）不同方法提取的病原菌模板DNA的浓度、纯度及分子质量大小存在差异,但以这3种方法提取的病原菌DNA为模板,均能成功扩增到细菌16SrD．NA和外膜蛋白的保守序列．其中,酚一氯仿提取的模板DNA浓度较低、纯度较高;水煮法和碱裂解法提取的模板DNA浓度较高、纯度较低．2）电泳显示,3种方法获得的模板DNA扩增出的16SrDNA保守序列条带均一,没有显著差异,但在外膜蛋白保守序列的扩增中却因菌种和模板提取方法的不同而存在差异．     

循环水处理系统处理鳗鲡养殖污水的应用实验

设计了一套由氧化沟、生物膜池、上下行滤池、蓄水池、紫外消毒器五部分组成的水产养殖循环水处理系统,并直接应用于鳗鲡养殖生产.结果表明:该系统对氨氮、亚硝酸盐氮、总磷、浊度、化学耗氧量的平均去除率分别为25.2 %、52.2 %、46.1 %、77.4 %和52.6 %;处理后的出水,上述各指标的量依次为0.471 mg/L、0.039 mg/L、0.270 mg/L、3 6 NTU、6.25 mg/L;经紫外消毒后的出水,细菌总数从2.87×103 CFU/mL减少到5.63×102 CFU/mL,弧菌去除率达100 %.养殖实验期间鳗鲡生长良好,本水处理系统进一步改良完善后可应用于鳗鲡等水产动物的循环水养殖.     

10种单味中药对养殖鳗鲡主要致病菌的抑制作用

应用超微粉碎法将虎杖、石榴皮、马齿苋、苦楝皮、大黄、紫花地丁、黄芩、五倍子、金银花以及黄连10种中药进行加工处理至粒径为5~10μm后,作用于本实验室近年来从福建各地养殖场收集的患病鳗鲡中分离得到的18株常见致病菌,并利用琼脂稀释法测定其抑菌作用.结果表明:上述10种中药单用对除B12以外的17株养殖鳗鲡主要致病菌均有一定的抑制作用,其平均抑菌浓度(MIC)范围为0.165~128 mg/mL,平均杀菌浓度(MBC)范围为0.210~128 mg/mL.药效较好的5种中药对供试17株菌的MIC值均在2 mg/mL以内,MBC值均在3 mg/mL以内.     

鳗鲡养殖循环水处理系统细菌的组成及其数量

为研究鳗鲡养殖循环水处理系统中细菌的组成与数量,从循环水处理系统中的养殖池、沉淀池、生物膜池、滤池和紫外消毒池采集水样,并从生物膜池和滤池中采集附着生物样品,分别用平板菌落计数法和16S rRNA基因克隆文库分析法进行细菌计数和附着样品的细菌组成分析.结果表明:1)养殖水经过各处理环节后,水体中细菌数量逐渐减少,如由养殖池中的2.98×106CFU/L降低至牡蛎壳填料滤池中的9.30×105CFU/L,再经过紫外消毒池后,水体中细菌数量又减少了96%,再降低至3.53×104CFU/L.2)生物膜池的尼龙丝挂网载体和滤池中牡蛎壳填料上附着细菌数量较多,其数量分别高达1.39×108CFU/g和1.52×108CFU/g.牡蛎壳上的附着细菌主要分为3大类:分别属于变形菌门(包括α-、β-和γ-变形菌纲)、拟杆菌门和异常球菌-栖热菌门,其中以β-变形菌纲细菌为优势类群,大部分细菌对环境有机物具有良好的分解作用.     

鱼类Cathelicidin抗菌肽的研究进展

抗菌肽作为非特异性免疫因子,在机体抵抗病原感染中发挥重要的作用.Cathelicidin是目前发现的一个最大抗菌肽家族,具有多重生物学功能.鱼类Cathelicidin的研究虽比较滞后,但国内外学者已取得了一些研究成果.综述了前人鱼类Cathelicidin的研究成果,如基因结构、蛋白酶酶切作用、体内表达状况和生物学活性,以期为后续研究提供一定的研究基础和研究思路     

微孔曝气增氧技术在鳗鲡养殖中的应用

比较研究了鳗鱼养殖中应用微孔曝气增氧与水车式增氧机增氧两种方式的增氧效果.结果表明：在未载鱼情况下,两种增氧方式的增氧能力具有极显著性差异（P〈0.01）,微孔曝气增氧方式比水车式增氧机增氧方式的单位水体增氧能力提高了15.85%,增氧动力效率是水车式增氧机增氧的2.36倍.在载鱼养殖情况下,使用微孔曝气增氧的试验池表...     

硫酸软骨素测定方法的研究进展

硫酸软骨素的测定方法按其测定指标主要分为软骨素二糖、氨基己糖、葡萄糖醛酸、硫酸基和阴性基团5类.比较这5种指标认为:软骨素二糖是硫酸软骨素的组成单位,与硫酸软骨素含量的相关性最高;氨基己糖和葡萄糖醛酸是组成软骨素二糖的单糖,与硫酸软骨素含量的相关性较高;硫酸基受软骨素二糖硫酸化程度影响大,与硫酸软骨素含量相关性低;阳离子染料对硫酸软骨素分子上阴性基团的选择专一性不强,阴性基团与硫酸软骨素含量的相关性很低.从准确度看,以软骨素二糖为测定指标的高效液相色谱法准确度最高,适于质量控制和微量分析;分别以氨基己糖和葡萄糖醛酸为测定基础的Elson-Morgan法和咔唑法准确度相对较高,适于一般分析;而以硫酸基和阴性基团为基础的方法准确度相对偏低.     

氟苯尼考与4种中药联用对鳗鲡致病菌的抑制作用

在鳗鲡体外采用琼脂培养法测定了氟苯尼考、大黄、黄连、黄芩、黄柏5种药物单用与联用对24株致病菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度,结果表明:单用时,24株致病菌对氟苯尼考敏感(MIC≤8 μg/mL)的有16株;对大黄、黄连、黄芩和黄柏敏感(MIC≤50 mg/mL)的分别有18株、21株、20株和2株.氟苯尼考分别与大黄、黄连、黄芩、黄柏联用时,共筛选出34种联用复方对15株致病菌有协同和相加作用.     

高速逆流色谱法分离制备中药诃子中的没食子酸

利用高速逆流色谱法从100 mg诃子醇提物中一次性分离制备得到8.6 mg没食子酸。通过分析型高速逆流色谱对5种溶剂系统进行筛选,确定以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(体积比为1:5:1:5)为两相溶剂体系并放大到制备型上,以上相为固定相,下相为流动相,在主机转速850 r/min、流动相流速2 mL/min、检测波长254 nm的条件下进行分离制备,获得4个分离峰(组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)。经高效液相色谱检测,按照面积归一法计算,其中组分Ⅲ的纯度达96.40%。经电喷雾电离质谱分析,并结合与没食子酸标准品的高效液相色谱测定结果的对比,确定组分Ⅲ为没食子酸。该方法简便、快速、重复性好,适合于诃子中没食子酸的分离制备。     

嗜水气单胞菌感染对美洲鳗鲡血液和生化指标的影响

为研究自发病美洲鳗鲡分离的嗜水气单胞菌对该鱼的致病性,试验将60尾美洲鳗鲡平均分为对照组、浸泡组和注射组3组,3组鳗鲡分别注射PBS、以1.0×107cfu/mL的嗜水气单胞菌浸泡和1.0×108cfu/mL嗜水气单胞菌注射感染.各组鳗鲡分别于处理后6 h和30 h断尾采血并分离抗凝血和血清,抗凝血由血常规检测分析仪检测7项血液指标,血清由全自动生化分析仪检测13项与免疫相关的生化指标,数据用SAS软件进行统计学分析.结果表明,鳗鲡注射感染后6 h,与浸泡组相比,血清谷草转氨酶(AST)与谷丙转氨酶(ALT)的比值显著(P0.05)升高,其他指标在三组间均无显著(P0.05)差异.鳗鲡注射感染后30 h,同对照组和浸泡组相比,血清总蛋白和血糖极显著(P0.01)下降,Na+和Cl-浓度显著(P0.05)下降,而AST和ALT则均极显著(P0.01)上升.