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蛋白质的还原-烷基化是蛋白质酶切中的重要步骤,常用的烷基化试剂是碘乙酰胺(IAA),但是IAA除了和半胱氨酸发生反应,也可能和其他多种氨基酸发生副反应。我们模拟常规的酶切条件,系统地研究了蛋白质真实酶切时所有酶切肽段发生烷基化的情况。结果表明,多种氨基酸可以发生烷基化,其趋势为:半胱氨酸>肽段N端氨基酸>天冬氨酸>谷氨酸>组氨酸>天冬酰胺>赖氨酸>酪氨酸,同时也发现同一肽段上的氨基酸烷基化具有排他性和聚集性。根据定性结果,采用质谱多反应监测(MRM)技术对多个肽段进行了定量分析,评估了过烷基化对蛋白质定量分析的影响。该研究结果表明,过量的烷基化修饰对蛋白质的定性与定量分析都可能产生较大影响。在蛋白质组学研究的样本处理流程中,应避免样本的过烷基化。 相似文献
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为提高连续语音识别中的音素识别率,提出一种基于改进并行回火训练的受限波尔兹曼机的音素识别算法。首先,利用经过等能量划分后的改进并行回火算法来训练受限玻尔兹曼机,接着将受限玻尔兹曼机堆叠组成一个深信度网络,从而作为深度神经网络预训练的基础模型,然后通过softmax层输出,得到用于音素状态后验概率检测的深度神经网络。接着,利用少量的标签数据,根据反向传播算法对网络权重进行微调。最后,将所得后验概率作为隐马尔科夫的发射概率,然后利用Viterbi解码器实现音素识别。在TIMIT语料库上的实验表明,识别率相比于传统的对比散度类算法提高了约4.5%,在不增加计算量的情况下比原始并行回火算法提高约1%。 相似文献
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用光谱滴定技术分别测定了β-环糊精(1)、单-[6-(1-萘酰氨基)-乙基氨基-6-脱氧]-β-环糊精(2)、单-[6-(1-萘酰氨基)-二乙基二氨基-6-脱氧]-β-环糊精(3)在25℃时,pH为7.2、2.0和10.1的缓冲溶液中与几种染料分子形成超分子配合物的稳定常数Ks,并考察了pH=7.2时识别过程的热力学参数ΔH0和TΔS0。结果表明,pH为2.0和10.1时,静电、疏水和氢键作用协同贡献于超分子配合物的形成,如主体2与AR在pH=10.1时形成的Ks=7085;而pH=2.0时的Ks=1034。当pH=7.2时主-客体的尺寸/形状匹配、疏水作用和范德华力决定配合物的稳定性。主体2、3对AR、TNS和ANS的包结配位是放热过程,并给出较大的焓变(-ΔH0),对RhB主要表现为熵驱动过程。 相似文献
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为研究环糊精形成超分子配合物的性能 ,合成了环己胺修饰 β-环糊精与嗪的固态超分子配合物 ,并进行了元素分析、红外光谱、核磁共振、热分析等结构参数的表征 .采用荧光光谱研究了该固态超分子配合物的发光性质 ,并与嗪进行了比较 ,发现超分子配合物较嗪荧光最大发射波长蓝移了 1 5 5 nm,荧光发射强度增强了 4.9倍 ,半峰宽变窄了 5 1 nm 相似文献
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1,9-双(1′-苯基-3′-甲基-5′-氧代吡唑-4′-基)-壬二酮-[1,9]与含氮中性配体对镨(Ⅲ)的协同萃取 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了 1,9 双 (1′ 苯基 3′ 甲基 5′ 氧代吡唑 4′ 基 )壬二酮 [1,9](H2 A)与含氮中性萃取剂 (B) ,如1,10 菲啉、2 ,9 二甲基 4 ,7 二苯基 1,10 菲啉、5 硝基 1,10 菲啉、2 ,2′ 联吡啶和 4 ,4′ 联吡啶 ,对镨 (Ⅲ )的协同萃取行为 ,确定了协萃配合物组成为PrA·HA·B ,求出了协同萃取平衡常数 ,制得了固态协萃络合物 ,并用元素分析、IR、UV、TG DTA对其组成和性质进行了表征。 相似文献
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改进的~(18)O同位素标记法标记蛋白质多肽 总被引:1,自引:1,他引:0
针对18O同位素标记反应两个重要影响因素——肽段分散度和胰酶灭活方法,进行了标记条件的改进和灭活方法的优化。在H218O中加入RapigestTM SF助溶剂并微波辅助加热,使α-酪蛋白胰酶酶切肽段的标记效率得到明显改进(18O/16O峰面积比值>99%)。标记后,对胰酶进行还原烷基化化学修饰彻底灭活,使标记后的肽段稳定性显著提高,放置6d不发生回交反应。对标准蛋白质甲状腺球蛋白酶切肽段混合物标记后的质谱实验结果表明:优化的标记方法能快速稳定地标记蛋白质酶切多肽。 相似文献
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本文研究了β-环糊精(1)、单-[6-乙二胺-6-脱氧]-β-环糊精(2)、单-[6-二乙烯三胺-6-脱氧]-β-环糊精(3)和单-[6-(三乙烯四胺)-6-脱氧]-β-环糊精(4)对Al(Ⅲ)-H2QS荧光体系和Zn(Ⅱ)-Morin荧光体系的增敏作用。实验结果表明:主体环糊精及其衍生物对At(Ⅲ)-H2QS荧光体系增敏率为4〉3〉2〉1,对Zn(Ⅱ)-Morin体系为3〉4〉2〉1,并且所有的主体环糊精对前一体系的增敏作用都强于后者。研究了酸度对环糊精的增敏能力的影响,发现在两个体系中,体系的pH值对β-环糊精的增敏率影响较小,而对多胺修饰环糊精的影响较大。从修饰环糊精的边臂长度、主-客体的尺寸匹配、静电相互作用、疏水作用等方面探讨了多胺修饰环糊精对两种荧光体系增敏作用的贡献。 相似文献
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建立了无损伤性31P NMR研究细胞内物质的实验方法, 并对人宫颈癌细胞(Hela)的31P NMR谱中含磷小分子代谢物的谱峰进行了分析; 细胞内无机磷(Pi)的化学位移对pH非常敏感, 通过测定其化学位移可间接确定细胞内的pH, Hela细胞内Pi峰的化学位移为5.88±0.01 (n=3), 计算得到细胞内 pH值为7.05±0.01; 通过测量Hela细胞的31P NMR谱中ATP的α磷和β磷及γ磷的化学位移差值, 得出Hela细胞内Mg2+与ATP结合的复合物MgATP和整个ATP量的比值, 计算得到Hela细胞内游离Mg2+浓度为(253.3±0.13) mmol/L (n=3), 与其它分析方法相比, 31P NMR测定细胞内游离Mg2+浓度具有对细胞样品无损伤的优点. 相似文献
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为研究环糊精形成超分子配合物的性能,合成了环己胺修饰β-环糊精与嗪的固态超分子配合物,并进行了元素分析、红外光谱、核磁共振、热分析等结构参数的表征.采用荧光光谱研究了该固态超分子配合物的发光性质,并与嗪进行了比较,发现超分子配合物较嗪荧光最大发射波长蓝移了155 nm,荧光发射强度增强了4.9倍,半峰宽变窄了51 nm. 相似文献