基于电化学发光和阻抗技术研究DNA单碱基错配

单碱基错配的识别和稳定性差异在核酸多态性研究中至关重要。在同一电化学传感器平台上,采用电化学发光（ECL）和电化学阻抗（EIS）2种技术,协同研究DNA链中不同类型和不同位点的单碱基错配识别和稳定性差异。电极表面具有茎环构象的探针DNA与完全互补DNA、不同类型或不同位点单碱基错配DNA杂交前后的ECL和EIS信号强度变化有显著差异。信号强度变化可揭示单碱基错配识别的稳定性。结果表明,DNA链中心位点的C-A单碱基错配稳定性低于链两端的,靠近键合电极表面双链链端的C-A单碱基错配稳定性低于非键合电极表面双链链端的,同一中心位点C-X碱基对的稳定性顺序为C-G?C-T>C-A≥C-C。研究结果可为核酸多态性研究提供参考。     

基于信号增强的电化学发光适配体传感器检测三磷酸腺苷

基于三磷酸腺苷(ATP)适配体与ATP分子作用后可以显著增强电化学发光信号的性能,研究了一种用于ATP含量检测的电化学发光适配体(ECL-aptamer)传感器。通过电沉积方法获得纳米金电极。3′端标记联吡啶钌发光分子的探针DNA通过5′端修饰的巯基自组装到纳米金电极表面,然后与5′端标记二茂铁分子的ATP核酸适配体互补杂交,形成刚性线形的双链DNA,由此构建的传感器产生较弱的电化学发光(ECL)信号。该传感器在ATP溶液中孵化后,由于ATP分子与ATP适配体强的特异性结合,使得适配体分子与探针DNA分子解离,从电极表面脱落进入溶液,此时电极表面的探针DNA在强电解质溶液中可以形成发卡型的茎环结构,产生显著增强的ECL信号。ECL信号强度与ATP浓度的对数值呈线性关系,线性范围为10.0～1.0×10⁵ pmol/L,相关系数r=0.995 9,检测限为5.0 pmol/L。该传感器的灵敏度与检测范围高于目前已报道的结果,显示出了ATP检测的应用潜力。     

超高效聚合物色谱法测定酚化解聚木质素的相对分子质量

超高效聚合物色谱法(APC)是一种新开发的高分辨聚合物表征技术,能在10 min内完成聚合物的高效分辨分离,同时获得聚合物的平均相对分子质量及其分布参数。实验以水溶性热酚化解聚木质素为研究对象,探索了APC测试水性体系高分子相对分子质量及其分布参数的条件。在以弱碱性磷酸盐缓冲液为流动相,采用Waters水溶性ACQUITY APC AQ 450 Å、200 Å、45 Å 3根色谱柱串联,进样量为10 μL,流速为0.5 mL/min的条件下,获得了复杂水相体系木质素磺酸盐解聚产物的平均相对分子质量及其分布参数,且相对标准偏差(RSD)低于1%。结果表明,与传统的凝胶渗透色谱相比,APC方法具有分辨率高、重现性强的优点。本实验为高性能天然高分子的高效分离、结构分析提供了新的方法和途径,同时为木质素的解聚和液化产物调控机理的研究提供了可行的方法。     

超高效聚合物凝胶色谱法快速研究酸催化木质素解聚产物

该文以温和酸催化条件下的木质素磺酸盐解聚产物为研究对象，建立系统分离和分析测试木质素磺酸盐解聚后获得的低分子酚类产物的方法。选用4根油溶性的ACQUITY APC XT小孔径刚性填料色谱柱串联，在高分辨紫外检测器条件下，采用超高效凝胶渗透色谱（APC）对解聚产物实现了高效分离，获得了高灵敏度的木质素基酚类产物的相对分子质量及其分布色谱信息。探讨了反应温度、时间和催化剂浓度等对酸催化木质素磺酸盐解聚行为的影响，结果表明，对于木酚比（木质素：苯酚）为25%（质量分数）的木质素磺酸盐解聚体系，在催化剂和木质素物质的量比为2.334、130℃酸催化反应60 min时，获得了解聚效率高达80%以上的木质素基酚类产物，解聚获得的产物相对峰高分子质量（M_p）组成均分布在720、490和260 Da 3个低聚物区间，均具有很窄的分子质量分布指数（接近1）。由此可以初步推断，木质素磺酸盐在该研究采用的温和酸催化条件下，催化反应机理不受反应时间、温度以及催化剂浓度的影响，具有特定的解聚途径。