天花粉蛋白化学 Ⅳ.天花粉蛋白的基本一级结构

前文报道从我国民间用于引产的中草药天花粉中提取到活性组分结晶天花粉蛋白和它的物理化学性质,N-端氨基酸顺序的测定及其溴化氰降解碎片CBa的顺序分析. 天花粉蛋白是一个由224个氨基酸残基组成的单一肽链的简单蛋白质,其N-末端残基为Asp,C-端顺序经羧肽酶A测定,并结合其水解动力学的计算机拟合为     

栝楼蛋白 2: 栝楼蛋白部分化学结构的初步测定

栝楼蛋白(Trichobitacin)是从栝楼(Trichosanthes kirilowiiMaxim, Cucurbitaceae)中新发现的核糖体失活蛋白, 分子量为27,228; pI为9.6。应用基质辅助的激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和快原子轰击质谱法(FAB-MS)分别测定胰蛋白酶酶解栝楼蛋白和天花粉蛋白(Trichosanthin)的混合肽质谱, 通过比较发现了一些分子量相同的肽。由于这两种蛋白质都来源于栝楼块根, 同源性比较强, 所以这些肽序列在两种蛋白质中基本一样; 再结合蛋白N-端自动顺序仪测定栝楼蛋白N-端的结果, 确定了栝楼蛋白N-端38个氨基酸的顺序, 栝楼蛋白经胰蛋白酶酶解后所得肽段用HPLC分离纯化, 再用蛋白质自动顺序仪, DABITC/PITC双偶合手工法和质谱法共确定了栝楼蛋白N-端, C-端等100多个氨基酸残基的序列。     

Primary structure of p-momorcharin, a ribosome-inactivating protein from the seeds of Momordica Charantia Linn (Cucurbitaceae)

The complete amino acid sequence of β-momorcharin, a ribosome-inactivating protein from the seeds of Momordica charantia Linn (Cucurbitaceae) has been determined. This has been done by the sequence analysis of peptides obtained by enzymatic digestion with trypsin, chymotrypsin and S. aureus V8 protease, as well as by chemical cleavage with BNPS-skatole. The protein consists of 249 amino acid residues containing one asparagine - linked sugar group attached to the site of Asn 5 1 and has a calculated relative molecular mass of 28,452 Da without addition of the carbohydrate. Comparison of this sequence with those of trichosanthin and other ribosome-inactivating proteins from different species of plants shows a significant homology with each other. Regarding the similarity of their biological properties, an active domain of these proteins has been predicted here.     

蛋白质顺序测定技术(三)

三、蛋白质的化学降解~([1,2,3,4]) 在蛋白质一级结构的测定中,化学降解也是一个很重要的手段。一般化学降解的肽段都比较大,适合于在自动液相顺序仪中测定顺序,同时也有利于肽段次序的排列,但因肽段较大,分离困难,往往碰到不溶解和集聚等问题,产率也比较低。蛋白质化学降解常用的方法有。1.用溴化氰`~([5])(CNBr)降解蛋白质中的甲硫氨酸;2.用二甲基亚砜(DMSO)~([6])和卤氢酸等降解蛋白质中的色氨酸;3.用羟氨降解蛋白质中-Asn-Gly-结构;4.用稀酸~([?])部份降解蛋白质中Asp等。现在分述如下: (一)溴化氰降解用溴化氰降解蛋白质中的甲硫氨酸是化学降解中最常用的方法,特别是反应专一,产率比较高。又由于蛋白质中甲硫氨酸数目较少,因此降解后肽段数目也比较少,有利于肽段次序的排列。其反应机理如下:     

新法引进16α-甲基合成副肾皮激素化合物

疗效最强的副肾皮激素化合物Dexamethason(Ⅰ)的若干合成法中似以用甾体皂素(Ⅱ)作原料的方法为最简便,但其缺点是,须将以后能转入A环的5,6双键除去,以致最后应在A环上加入双键时发生困难. 我们的方法是一直保留5,6双键使其转入A环,并在局部氢化时发现能造成16α-甲基的新法,此后经过(Ⅸ)再脱氢可得已知其能合成Dexamethason(Ⅰ)的中间体(Ⅹ),此物根据分析数据和紫外线及红外线光谱推定其结构为(Ⅹ).     

副肾皮酮乙酸酯的合成

用薯蓣配基(diosgenin)为原料七步合成副肾皮酮乙酸酯,总得率约在8%以上。文中并讨论了若干关于这化合物的已知的工业合成方法。     

质谱技术在蛋白质、多肽化学中的应用

文中介绍了几种新的质谱技术: 快原子轰击质谱(fast atom bombardment-MS, 简称FAB-MS)、串联质谱(tandem mass spectrometry, 简称MS/MS)、电喷雾电离质谱(electrospray ionization-MS, 简称ESI-MS)和基质辅助的激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time offlight MS, 简称MALDI-TOF-MS), 这几种技术的相互补充使得质谱比较有效地用于蛋白质结构测定。文中例举了几个实例说明了它们在蛋白质的分子量测定,蛋白质和多肽的纯度鉴定, 糖肽的结构测定及特殊的N-端封闭的或一般的蛋白质和多肽的顺序测定中的应用。     

纪念汪猷先生百年诞辰

<正>汪猷,字君谋(1910-1997),浙江杭州人.生物有机化学家.1955年当选为中国科学院学部委员(院士);1984年当选为法兰西科学院外籍院士;1988年当选为德国巴伐利亚科学院通讯院士.汪猷在六十多年的科研生涯中,建树颇丰,他在甾体化学、抗生素化学、糖类、多肽、蛋白质、核酸化学和生     

Structure determination of glycopeptide of β-momorcharin

The structure of the N-linked oligosaccharide chain of β-momorcharin, a ribosome-inactivating protein from the seeds of Momordica charantia Linn (Cucurbitaceae), was determined. A glycopeptide liberated by pronase digestion of the glycoprotein was subjected to amino acid and neutral carbohydrate analysis to establish the composition of amino acid and sugar residues. The sequences and glycosylation hnkages of the sugar and amino acid residues in the glycopeptide were determined as Manαl-6(XyIβ1-2)-Manβ1-4GlcNAcβ1-4(Fucαl-3)-GlcNAc-Asn-Leu by 2D-NMR spectroscopy and FAB-MS data.     

甾体化合物 ⅩLⅣ.甾体C6-溴化物构型的变化

在试行从Ⅰ经Ⅲ做成Ⅳ时,找出Ⅲ易起消除反应生成Ⅴ和Ⅵ.又找出Ⅴ和Ⅵ及Ⅷ和Ⅸ的C₆-溴原子构型在酸性溶液中能相互变化,所得C₆-α-溴和C₆-β-溴之量几相等,不似C₆氯化物的两立体异构体Ⅹ及Ⅺ符合通常横键较稳定的规则.Ⅹ用酸处理能得产率较佳的Ⅺ,而Ⅺ经同样处理,则其构型几乎不变.