具有甲状腺素脱碘酶活性的抗体酶的化学修饰

甲状腺素脱碘酶是一种膜硒蛋白[1], 它能够将甲状腺素降解为不同产物, 并对甲状腺素的生理功能起调控作用. 但是, 甲状腺素脱碘酶极易变性失活, 到目前为止仍未得到纯酶[2]. 近来, 此酶的人工模拟工作逐渐成为热点. 我们小组[3]首次以3,5,3′,5′-四碘甲状腺原氨酸五水钠盐(T4)为半抗原, 采用单克隆抗体技术和苯甲基磺酰氟及硒氢化钠修饰的方法, 成功地制备了具有甲状腺素脱碘酶活性的抗体酶.     

Cs0.05FA0.79MA0.16PbI2.52Br0.48钙钛矿薄膜的变温光致发光特性

报道了Cs0.05 FA0.79 MA0.16 PbI2.52 Br0.48钙钛矿薄膜的变温光致发光特性.采用一步旋涂法,用氯苯作反溶剂制备了Cs0.05 FA0.79 MA0.16 PbI2.52 Br0.48钙钛矿薄膜,并对其表面形貌和结晶质量进行了表征.X射线衍射(XRD)分析结果表明其为四方钙钛矿结构.钙钛矿薄...     

光电子和计算机辅助的二维云纹干涉法及其对牛骨弹性常数的测定

改进了光了和计算机技术辅助的二维云纹干涉法及相应设置,并应用于牛骨骨干受中心压缩时沿径向和轴向弹性模量及泊松比的全场分布规律的研究;研究表明上述全场测试和计算机处理技术的优越性及其应用于骨力学研究的可行性,得出牛骨骨干径向外侧弹性模量大于径向内侧,但并非完全呈线性分布,沿轴向则基本不变的结论;其结果对指导临床医疗和仿生骨研制都有一定参考价值。     

具有甲状腺素脱碘酶活性的抗体酶的制备及性质研究

首次以具有适当疏水性的甲状腺素衍生物O-methyl-T4为半抗原,用杂交瘤技术得到相应的抗体(6E8),又经过苯甲基磺酰氟和NaHSe的化学修饰引入了催化基团硒代半胱氨酸,制备出具有较高甲状腺素脱碘酶活力的抗体酶(Se-6E8).用SDS-PAGE电泳对Se-6E8的纯度进行了鉴定,同时研究了其解离常数、温度及pH等酶学性质.结果表明,Se-6E8活力为2010U/μmolprotein,纯度达到电泳纯,催化反应的最适温度为57℃,最适pH为82.     

生物医用材料表面光引发活性接枝聚合研究新进展

表面接枝聚合改性已经成为提升生物医用材料性能的最重要方法之一.参比其他活性接枝聚合方法,光引发活性接枝聚合因其独特的优势已被越来越广泛地应用于生物医用材料表面改性.根据光引发剂的类型,目前应用最多的光引发活性接枝聚合的引发体系主要有3种:光引发-转移-终止剂介导的聚合引发体系、二苯甲酮及其衍生物引发体系、硫杂蒽酮类引发体系.本文首先简要介绍了上述3种光引发活性接枝聚合体系的发展历程、接枝机理以及特点.同时结合本课题组相关研究工作,重点论述了光引发接枝聚合技术在3个不同生物医用领域的主要应用:(1)抗菌表面,利用光活性接枝的特点构建层状功能高分子刷,实现表面抗菌功能的阶段性需求.(2)免疫检测表面,使用光活性接枝方法构建层状功能高分子刷,解决检测灵敏度低以及蛋白干扰问题.(3)生物活性分子表面固定,利用可见光活性接枝聚合体系,实现酶在表面的固定化使用以及细胞表面修饰以提高细胞稳定性.最后展望了生物医用材料表面光引发活性接枝聚合研究的发展趋势.     

高氧空位尖晶石型锰基催化剂用于低温NH3-SCR反应

制备了LiMn₂O₄、ZnMn₂O₄和CrMn₂O₄尖晶石型复合氧化物,测试了它们在50～450℃的氨择性催化还原(NH₃-SCR)氮氧化合物的活性,并考察了结构、不同金属元素和价态对NH₃-SCR活性的影响。使用物理吸附仪(BET)、X射线衍射仪(XRD)、透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)、X射线光电子能谱分析仪(XPS)、NH₃程序升温脱附(NH₃-TPD)和H₂程序升温还原(H₂-TPR)等对催化剂进行了表征,并对尖晶石催化剂的构效关系进行了研究。结果表明,活性最佳的LiMn₂O₄尖晶石催化剂在空速为6×10⁴mL/(g·h),反应温度为150℃时有90%以上的NO转化率,且在100～400℃的温度范围内显示出80%以上的NO转化率,低温...     

调控尖晶石Co~(3+)和Ni~(3+)表面密度来提高催化甲烷氧化活性（英文）

天然气资源丰富、价格低廉,因而被广泛用作燃料.天然气的主要成分是甲烷,未燃烧完的甲烷所产生的温室效应是二氧化碳的21倍,所带来的环境问题引起越来越多的研究者关注.但甲烷是最稳定的非极性有机小分子,C–H键能高达434 k J/mol,大多数催化剂很难将其在很低的温度在完全转化.C?H键的活化解离是催化甲烷燃烧最关键的一步,而活化C–H键方式主要有两大类:(1)均裂活化机制,一般用在贵金属催化剂上;(2)异裂活化机制,往往发生在过渡金属氧化物上.比较而言,贵金属催化剂,尤其是Pd,往往具有更优异的低温催化活性,但价格昂贵,从而限制了其广泛使用.因此,开发更加高效的非贵金属催化剂用于废气中未转化的甲烷完全氧化是亟待解决的问题.含有Co和Ni的尖晶石氧化物具有良好的催化甲烷燃烧活性,有望代替贵金属催化剂,但要求在低于400°C完全转化,仍具有一定挑战.另一方面,Ni~(3+)和Co~(3+)哪个是活性中心,还具有一定争议.因此,我们通过水热法和共沉淀法合成一系列表面暴露不同数目的Ni~(3+)和Co~(3+)来探究表面高氧化态Co和Ni跟活性之间的关系.XRD和TEM结果表明,相比于水热法合成的水热法合成的发生明显的晶格收缩现象,这是由于在尖晶石体相中大量小半径Ni~(3+)(0.053 nm)取代了大半径Co~(3+)(0.055 nm)所致.同时还发现,水热合成的尖晶石具有多孔纳米片层结构,相比于共沉淀法合成的尖晶石具有更大的比表面积,催化活性也更高.XPS分析发现,催化甲烷燃烧的活性随着表面含量增加而提高.结合文献分析和本文的实验结果推测,表面的Ni~(3+)和Co~(3+)都可作为解离C?H键的活性中心.水热60小时合成的纳米片表面的数量最多,所以具有最优异的催化性能,大约在280°C甲烷转化50%.当加入10%(体积比)的水,在高空速工况下对催化活性影响不大,主要是因为长时间水热合成的尖晶石表面缺陷少,对水的吸附弱,这可通过O 1s图谱得到印证.总之,这些研究结果能够给甲烷活化和开发更加高效和低成本催化剂一些启示.     

具有生物活性的人带3蛋白胞质片段融合蛋白的克隆、表达与纯化

用PCR法从质粒pHB3中扩增了人红细胞带3蛋白胞质片段(CDB3)基因.PCR产物经限制性内切酶切割后与多克隆位点处带有编码6个组氨酸序列的高效表达载体pET28b连接,构建为重组子pCDBHistag.重组子经酶切及序列测定后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,可溶性目的蛋白占菌体总蛋白的40%左右.C端带有6个连续组氨酸的带3蛋白胞质片段作为融合蛋白不仅可以降低宿主菌蛋白酶对其水解程度,而且简化了目的蛋白的纯化过程.经一步螯合Ni²⁺的亲和层析获得了电泳纯的带3蛋白胞质片段融合蛋白.活性测定结果表明,带3蛋白胞质片段融合蛋白能够抑制醛缩酶(Aldolase)活性的70%,与文献报道的人红细胞内带3蛋白胞质片段具有相同的功能.     

梯度胶对人参蛋白双向电泳分离效果的影响

为了建立高质量、高分辨率人参蛋白双向电泳图谱来对人参蛋白进行功能分析与研究,提出一种利用双向梯度胶电泳技术.第一向等电聚焦电泳分离后,第二向分别采用12.5%浓度的均一胶和10%～12.5%、12.5%～15%、10%～15%三种不同浓度的SDS-PAGE梯度胶来获取人参蛋白双向电泳图谱,并利用Image Scanner和Image Master 2D Platinum version6.0对图像进行扫描及比较分析.结果表明,采用10%～15%浓度梯度胶获得双向电泳图谱中蛋白点圆滑、形状规则,分离效果好;有效地减少了人参中高丰度蛋白对中低丰度蛋白的掩盖,Mw75 kDa的可检测到的低丰度和大分子量蛋白点数明显增加.研究结果为高质量人参蛋白表达图谱的建立奠定了良好的实验基础,同时也为其它五加科植物蛋白质组学研究工作的开展提供了方法学上的指导.     

梯度胶对人参蛋白双向电泳分离效果的影响

为了建立高质量、高分辨率人参蛋白双向电泳图谱来对人参蛋白进行功能分析与研究,提出一种利用双向梯度胶电泳技术.第一向等电聚焦电泳分离后,第二向分别采用12.5%浓度的均一胶和10%~12.5%、12.5%~15%、10%~15%三种不同浓度的SDS-PAGE梯度胶来获取人参蛋白双向电泳图谱,并利用Image Scanner和Image Master 2D Platinum version6.0对图像进行扫描及比较分析.结果表明,采用10%~15%浓度梯度胶获得双向电泳图谱中蛋白点圆滑、形状规则,分离效果好|有效地减少了人参中高丰度蛋白对中低丰度蛋白的掩盖,Mw>75 kDa的可检测到的低丰度和大分子量蛋白点数明显增加.研究结果为高质量人参蛋白表达图谱的建立奠定了良好的实验基础,同时也为其它五加科植物蛋白质组学研究工作的开展提供了方法学上的指导.