CW2M3分泌新型淀粉酶的最适条件及酶的应用条件

从原筛选的产酶菌株CW₂出发， 经多次紫外诱变、 初筛和复筛后， 获得了变异菌株CW₂M₃， 其产酶水平为原菌株的332.7％， 且具有良好的遗传稳定性. 薄层层析证明，CW₂M₃分泌的新型淀粉酶能有效地催化淀粉降解产生异麦芽低聚糖， 产物主要包括异麦芽糖、 潘糖、 异麦芽三糖等. 用正交法结合薄层层析法确定了各因素对CW₂M₃产酶水平的影响， 结果表明， 培养温度是显著因素，CW₂M₃的最适产酶条件为： 用牛肉膏培养基（牛肉膏0.7%、 蛋白胨0.7%、 NaCl 0.5%、 pH 7.0）培养， 温度40 ℃， 时间12　h. 用该酶催化淀粉转化为异麦芽低聚糖时， 酶促反应时间和温度均是显著影响因素， 酶催化淀粉降解的最适条件为: 温度65 ℃， 酶促反应1.0　h， 体系pH为7.0.     

数字阵列收发组件FPGA远程配置的探索及实现

随着数字时代在不断的更新,数字阵列雷达已经成为相控阵雷达的重要发展方向。因此,在数字阵列中数字收发组件式数字阵列雷达最重要的核心。在数字阵列中,由于雷达DAM模块的数量比较多。因此,数字阵列通常与阵列天线集成了安装在舱外导致调试困难的实际情况,在这种数字列阵中主要是利用Flash存储配置数据、CPLD产生配置时序和通信接口、复用系统通信光纤,来收发组件现场可编程门阵列远程配置的设计方法。将数字阵列收发组件FPGA远程配置来解决DAM模块远程调试的难题,在技术的应用中极大的提高了系统的试验效率。并且通过数字雷达阵列来进行具体的验证,从中得到良好的效果。     

脱辅基神经红蛋白热稳定性的光谱法研究

采用酸丙酮法制备了脱辅基神经红蛋白(apo-Ngb)。利用紫外-可见吸收光谱和圆二色光谱(CD)对apo-Ngb的热稳定性进行了研究。结果表明,在高温下apo-Ngb发生了变性,其二级结构遭到破坏,α-螺旋的含量减少。计算得到了apo-Ngb热变性的中点温度(61.8℃)和热力学参数(ΔH=93.1 kJ·mol-1,ΔS=277.8J·mol-1·K-1)。与Ngb相比,由于血红素辅基的去除,apo-Ngb蛋白肽链结构变得疏松无序,从而使apo-Ngb的热稳定性有所降低。     

来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因的合成与融合表达

将来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因用大肠杆菌中的丰沛密码子替换, 利用化学和基于聚合酶链反应(PCR)技术的酶促方法进行基因全合成, 利用pET-32a构建重组表达载体pET-dan, 转化进E.coil BL21(DE3)中进行融合表达. 经SDS-PAGE电泳、 Western-blot检测和活性测定发现, D-ANase可在大肠杆菌中高效表达, 目的蛋白可达到菌体总蛋白的69.2%, 密码子优化后基因构建的工程菌发酵活性为96 U/mL, 重组蛋白经超声细胞破碎及Ni²⁺柱亲和层析纯化, 比活可达1692.3 U/mg, 纯度可达95%以上.     

一株高温菌所产酶的功能分析与菌株分类鉴定

从长白山温泉中分离出一株可产生淀粉降解酶的高温菌(CW₂), 用薄层层析法分析鉴定酶促淀粉降解的产物, 发现CW₂所产生的淀粉降解酶系胞外酶, 可催化淀粉降解产生异麦芽低聚糖(主要包括异麦芽糖、 异麦芽三糖和潘糖). 用PCR法扩增其16S rDNA, 测定其序列（873 bp）, 与GeneBank中已知菌的16S rDNA序列对 比, 该菌株与模式菌株Bacillus licheniformis ATCC 14580,Bacillus licheniformis  DSM 13,Bacillus subtilis strain JM4的16S rDNA序列同源性最高, 只分别相差9,9,13个碱基, 序列相似性分别为98.97％,98.97％,98.51％. 用Neighbor joining方法构建CW₂进化树, 并用Bootstraping法对其评估, 结果表明, CW₂与Bacillus licheniformis, Bacillus sonorensiss形成Bacillus属中的亲缘关系最近的一个进化种群.     

化学与酶促相结合合成人生长激素基因

根据人生长激素(hGH)的氨基酸序列和大肠杆菌密码子的偏好性, 全面优化hGH的密码子, 添加表达调控元件后合成序列的全长为1040 bp, 采用化学方法拆分成30条单链寡核苷酸. 采用改进的两步法拼接成全基因, 得到2个全序列正确的基因. DA-PCR和OE-PCR拼接产物经T7核酸内切酶Ⅰ处理, 合成基因中的碱基错误率降低了93.93％.     

神经红蛋白突变体H64V与叠氮离子的作用

将64位组氨酸(His64)突变为缬氨酸(Val),构建了神经红蛋白(Ngb)突变体H64V基因并进行了蛋白的表达纯化,突变使Ngb的血红素Fe由六配位结构变成五配位结构.利用光谱法研究了突变体H64V与叠氮离子(N_3~-)的相互作用.紫外-可见吸收光谱表明,H64V与N_3~-键合后其Soret带吸收峰由406 nm红移至418 nm;荧光光谱表明N_3~-可使H64V的荧光发生静态猝灭.计算得到了H64V与N_3~-键合的平衡解离常数和热力学参数.另外,还研究了不同阴离子对H64V与N_3~-结合的影响,发现阴离子的存在减弱了N_3~-与H64V之间的结合力.     

近红外光谱-偏最小二乘法测定三元混合物中甲醇和乙醇的含量

应用偏最小二乘法建立了甲醇、 乙醇和水三元混合体系近红外光谱的校正模 型, 采用交互验证方式对模型精度进行检验. 通过选取波长, 使所建模型中甲醇测定相关 系数r达到0.999　91, 交互验证均方根误差(RMSECV)为0.431, 乙醇的r 达到0.999 98, RMSECV为0.193.　用所建模型测定样品, 与气相色谱法 分析结果相近, 相对误差小于3.505％.     

SO2-4,HCO-3和Cl-对UV/TiO2降解矿井水中CODCr的影响

探讨SO^2-₄,HCO^-₃和Cl^{-对TiO₂光催化降解矿井水的化学耗氧量(用Cr法测)(COD_Cr)性能的影响. 用阴离子树脂充分过滤掉矿井水中阴离子, 将Na₂SO₄,NaHCO₃和NaCl分别配成在矿井水中单一存在的溶液和复合存在的溶液, 使用自制的TiO₂在紫外灯照射下光催化降解矿井水中COD_Cr. 当3种离子单独存在时, 它们均使光催化COD_Cr的降解率下降, 影响大小依次是HCO-₃>SO2-₄>Cl-; 当3种离子两两复合时, 在HCO-₃分别与SO2-₄和Cl-的复合实验中, 当HCO-₃浓度较低时, HCO-₃和SO2-₄,或Cl- 共同影响使COD_Cr降解率下降, HCO-₃起主要作用; 当HCO-₃浓度较高时,HCO-₃起主要作用. 在SO2-₄,和Cl- 的复合实验中, Cl-浓度为4.45 mmol/L, 可轻微促进COD_Cr降解率的提高, 当Cl-浓度高于此浓度时, Cl-和SO2-₄有协同作用并使COD_Cr降解率下降, 且降解率均低于Cl-和SO2-₄ ,单独存在时的降解率.}     

CW2M3分泌新型淀粉酶的最适条件及酶的应用条件

从原筛选的产酶菌株CW2出发,经多次紫外诱变、初筛和复筛后,获得了变异菌株CW2M3,其产酶水平为原菌株的332.7%,且具有良好的遗传稳定性.薄层层析证明,CW2M3分泌的新型淀粉酶能有效地催化淀粉降解产生异麦芽低聚糖,产物主要包括异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖等.用正交法结合薄层层析法确定了各因素对CW2M3产酶水平的影响,结果表明,培养温度是显著因素,CW2M3的最适产酶条件为:用牛肉膏培养基(牛肉膏0.7%、蛋白胨0.7%、 NaCl 0.5%、Ph 7.0)培养,温度40 ℃,时间12 h.用该酶催化淀粉转化为异麦芽低聚糖时,酶促反应时间和温度均是显著影响因素,酶催化淀粉降解的最适条件为:温度65 ℃,酶促反应1.0 h,体系Ph为7.0.