甜菊(Stevia rebaudiana)糖基转移酶基因的克隆及序列分析

利用与植物次生代谢产物糖基化相关的UDPG糖基转移酶的特征性保护区域，设计了同源简并引物，以甜菊基因组DNA为模板，PCR扩增获得甜菊糖基转移酶基因片段，根据获得的基因片段设计引物GSTr和GSTf，分别与cDNA文库的T3和T7通用引物扩增获得全长核苷酸序列的甜菊糖基转移酶基因，定名为sud pt-2，该基因全长1662bp，包括poly(A)和一个1362bp的开放阅读框，编码454个氨基酸。与常见的糖基转移酶基因的相似性达44％-77％，且具有UDPG糖基转移酶的特征性保守序列。分子发育进化分析表明，此基因为类黄酮糖基转移酶基因家族成员。     

小白菊内酯对Kaposi肉瘤相关疱疹病毒感染细胞的影响

目的为了探讨小白菊内酯(Parthnolide,PTL)对Kaposi肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’s Sarcoma associated Herpesvirus,KSHV)感染细胞islk.219、SK-RG、BCBL-1增殖的影响。方法测定小白菊内酯对不同的KSHV感染细胞的半数抑制浓度(IC50)。同时显微镜下观察不同浓度的小白菊内酯处理KSHV感染细胞24 h和48 h后细胞的形态变化。采用CCK-8、集落形成实验检测不同浓度的小白菊内酯处理KSHV感染细胞后的增殖能力。采用Western blot检测Bcl-2和Cyclin D1的蛋白表达情况。结果小白菊内酯处理islk.219、SK-RG、BCBL-1的IC50浓度分别为21. 08μmol/L、10. 75μmol/L、13. 65μmol/L,随着小白菊内酯浓度和处理时间的增加,islk.219、SK-RG、BCBL-1细胞增殖能力下降,克隆数明显减少(P0. 05),并使Bcl-2和Cyclin D1蛋白的表达水平降低。结论小白菊内酯能够抑制KSHV感染细胞系islk.219、SK-RG、BCBL-1细胞的增殖,可能作为治疗KSHV感染的候选药物。     

利用PCR-RFLP技术分析拟穴青蟹抗菌肽基因SCY2的SNP位点

本研究根据公布的锯缘青蟹SCY2基因序列设计引物SCY2-RFLPs和SCY2-RFLPa,利用PCR-RFLP技术分析了5个地理群体（宁德、汕头、万宁、东方、三亚）共计148个拟穴青蟹SCY2基因的多态性.结果表明,所扩增的SCY2基因片段含有2个StuⅠ内切酶识别位点,位于第一外显子的位点没有多态性,位于第一内含子的位点存在多态性.在148个个体中共检测到AA和AB两种基因型,等位基因B的出现频率非常低,只在三亚群体的1个个体中检测到,而在其他4个群体中均未检测到,其等位基因频率为0.003 4.序列分析结果表明,扩增片段长度为1 016 bp,包含部分5′非翻译区（282 bp）、第一外显子（131 bp）和部分第一内含子（603 bp）.AA基因型表现为3条带（从大到小依次为509,356,151 bp）,AB基因型表现为4条带（从大到小依次为660,509,356,151bp）.B等位基因是由于867 bp处发生了C→G的单碱基突变导致StuⅠ内切酶失去了1个识别位点而形成的.