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1.
利用改造后的腺病毒表达载体pDC312-cmv,构建含有8个miR-122表达框的重组腺病毒载体p-8miR-122,通过RT-PCR、ELISA、Sourthern blot验证重组载体高表达miR-122水平及抗乙肝病毒活性的能力.结果表明:重组腺病毒载体p-8miR-122构建成功且可高表达miR-122.并且,为鉴定重组腺病毒高表达miR-122水平及抗乙肝病毒活性的能力,本文还分别对空载体pDC312-cmv和重组腺病毒载体p-8miR-122进行腺病毒包装、扩增、纯化和TCID50滴度检测,其结果表明:纯化后的对照腺病毒和重组腺病毒滴度分别高达3×1010IU/mL和1×1011IU/mL,重组腺病毒与对照病毒相比具有miR-122高表达和抗乙肝病毒活性的能力.  相似文献   
2.
为探讨雅安藏茶水提物调控PPARα水平及降脂的分子机制,构建pET32a-PTD-PPARα原核重组载体,表达具有进入细胞能力的PTD-PPARα融合蛋白,利用肝细胞L02构建高脂细胞模型. SDS-PAGE和Western blotting结果显示PTD-PPARα融合蛋白纯度及特异性较高,能自由进入L02细胞并降低L02高脂细胞中脂类沉积.L02高脂细胞模型经藏茶水提物处理24 h,油红O染色表明细胞脂类沉积显著降低,Western blotting表明PPARα蛋白水平显著增加,并具有浓度梯度依赖性.结果表明:藏茶水提物可能通过促进PPARα蛋白水平抑制脂类在细胞中沉积,调控脂类代谢.  相似文献   
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