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利用Tet-On 3G系统构建了含人IFITM3基因的真核表达质粒pTRE3G-IFITM3,并将其与调控质粒pLVX-Tet3G共转染犬肾细胞(MDCK),转染后48 h用G418和嘌呤霉素进行筛选,用多西环素(Dox)对获得的细胞系进行诱导表达鉴定,并进行Dox敏感性分析、IFITM3~+细胞百分数及定位分析.用含萤光素酶(Luciferase)报告基因的禽流感病毒H5/H7蛋白或VSV G蛋白包裹的假型慢病毒颗粒进行感染实验,检测萤光素酶活性.结果表明,筛选获得了携带人IFITM3的MDCK诱导表达细胞系,且IFITM3表达量与Dox剂量和诱导时间相关;确定Dox工作浓度为2.5μg/mL,诱导12 h时IFITM3~+细胞数达75%以上,且IFITM3在晚期内体/溶酶体存在分布;假型病毒感染及萤光素酶活性分析表明,IFITM3可显著抑制禽流感病毒H5,H7和VSV G蛋白介导的病毒进入,为深入探究其具体的抑制机制奠定了基础. 相似文献
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盐胁迫短芒大麦甜菜碱醛脱氢酶基因片段的克隆与序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
以2%NaCl诱导3-6天的短芒大麦叶片为材料,用TRIzol试剂提取总RNA后,反转录合成cDNA,用PCR扩增得到的600bp片段,将所得序列与GenBank上已登录的序列进行同源性比较,发现它与大麦等作物的BADH基因同源性很高,并存在醛脱氢酶的保守十肽区,从而证明短芒大麦的耐盐性与小分子渗透物质的积累有关。 相似文献
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番茄组织培养体系的建立及其影响因素的研究 总被引:16,自引:0,他引:16
以11种番茄(lylopersicon esculentum Mill)栽培品种为实验材料,以10-12天为无菌苗的子叶、下胚轴段、叶片、茎段为外植体,通过对供体基因型、激素浓度及培养条件的研究,建立了一套优化的适于番茄遗传转化的组织培养与再生体系。 相似文献
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真菌免疫调节蛋白(FIP)结构与功能研究 总被引:6,自引:0,他引:6
高等真菌作为免疫调节药物在中医中的应用已有2000年之久,对其药学功能的研究也一直为学者们所关注.真菌免疫调节蛋白(FIP)是20世纪90年代从灵芝中发现的一类蛋白质。其不仅具有与免疫球蛋白重链可变区相似的结构,而且具有抑制过敏反应、促进核酸和蛋白质合成、加速代谢的功能,能够增强机体的免疫力.就FIP家族蛋白质的发现、结构与功能方面的研究加以论述. 相似文献
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