AFFINITY LABELLING OF E.coil LEUCYL-tRNA SYNTHETASE WITH 3''''-OXIDIZED tRNA~(Leu)

The E.coli leucyl-tRNA synthetase (E. C. 6. 1. 1. 4) was specifically labelled with 3'-oxidized tRNA~(Leu) (tRNA_(ox)~(Leu)).The procedure involves a Schiff's base formation and its subsequent reduction by sodium cyanoborohydride. Stoichiometric inactivation of aminoacylation was achieved with the incorporation of 1 mol of tRNA_(ox)~_(Leu) per mol LeuRS.On the other hand, the amino acid activation activity of LeuRS-tRNA_(ox) complex was partially inhibited. After extensive digestion of the complex by pancreatic ribonuclease, the amino acid activation activity was fully recovered, while the aminoacylation activity was not restored at all.The results suggest that the active sites responsible for the activities of LeuRS correlate with each other as well as differ from each other.     

硫脲掺杂金刚石的高温高压合成及FT-IR光谱研究

利用温度梯度法,在6.5 GPa、1 300～1 350℃的高温高压极端物理条件下,通过在FeNiCo-C合成体系中添加硫脲(CH4N2S)成功合成了金刚石,所合成的晶体呈现出黄色且具有六-八面体形貌.利用扫描电镜(SEM)对所合成金刚石的表面形貌进行了表征,测试结果表明,随着合成体系中CH4N2S添加量的逐渐增加,所合成金刚石的表面变得逐渐粗糙.借助傅里叶红外(FT-IR)光谱对金刚石样品内部的氮、氢缺陷以及化学键结构进行了测试分析,结果表明,金刚石中的氢元素以-CH3,-CH2-,C-H形式存在,而其内部的氮杂质以C心、A心形式存在.此外,在3 300～3 600 cm-1观察到NH的吸收带.     

SQUID在高校图书馆中的应用研究

随着数字资源的快速发展,努力提高数字资源的使用效率,让高校师生方便合法地使用高校图书馆数字资源,是图书馆不可推卸的责任和义务。介绍了数字资源远程访问的重要性,阐述了数字资源远程访问技术,提出了通过SQUID远程访问图书馆数字资源的措施。     

触媒组分对高温高压金刚石大单晶生长及裂纹缺陷的影响

本文利用六面顶压机,在5.6 GPa, 1250—1450℃的高压高温条件下,分别选用FeNiCo和NiMnCo触媒合金开展了金刚石大单晶的生长实验,系统地考察了触媒组分对金刚石单晶裂纹缺陷的影响.首先,通过对两种组分触媒晶体生长实验对比发现,金刚石大单晶裂纹缺陷出现的概率与触媒组分相关联.同NiMnCo触媒相比, FeNiCo触媒生长的金刚石单晶更容易出现生长裂纹.我们认为,这与FeNiCo触媒黏度高、流动性差、碳素输运能力差、生长中晶体比表面积大,进而导致其对生长条件稳定性的要求较高有关.其次,两种触媒极限增重速度和生长时间的关系曲线表明,相同生长时间条件下, NiMnCo触媒生长金刚石单晶的极限增重速度相对较大.再次,扫描电子显微镜测试结果表明,裂纹缺陷的出现与否同晶体表面平整度的高低无必然联系,表面平整度高的金刚石单晶内部也可能存在裂纹缺陷.最后,经对金刚石单晶傅里叶微区红外测试结果进行分析,得出了氮杂质含量的高低与金刚石单晶裂纹缺陷的出现与否无内在关联性的研究结论.     

美术教育创新的思考与探索

现代教育的发展,使传统教育观念也发生了根本的变化,但传统教育的弊端还在不同程度地影响着下一代人的健康成才。因此,创新是当今美术教育研究的主题。本文简要阐述了美术教育创新。     

功率分流式行星传动运动学和静力学矩阵分析方法研究

为了快速地进行功率分流式行星传动的运动学和静力分析,文章从行星传动的基本运动学公式出发,提出了一种基于功能单元分解法计算功率分流式传动系统运动学和静力学参数的方法;推导了考虑效率前后的系统的角速度方程和转矩方程,运用该方法可以同时计算出系统中各运动构件的角速度、传递扭矩、齿轮切向啮合力和行星架上承受的行星轮轴承反力及系...     

3′-末端氧化的tRNA~(Leu)对大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶的亲和标记

本文用3′-末端氧化的tRNA~(Leu)(tRNA_(ox)~(Leu))专一地标记了大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)。合成酶标记上等摩尔tRNA_(ox)~(Leu)后,氨酰化活力完全丧失,同时氨基酸活化活力也失去80％。这样失活反应是通过tRNA_(ox)~(Leu)的3′-末端羰基与亮氨酰-tRNA合成酶活性中心或其附近的赖氨酸残基的ε-氨基形成Schiff碱实现的。Schiff碱经硼氢氰化钠还原后稳定。酶与tRNA_(ox)~(Leu)的共价复合物经牛胰核糖核酸酶充分水解后,其活化氨基酸的活力及动力学常数基本恢复到原来水平,而氨基酰化活力未恢复。表明了该合成酶的两种活性中心相互关联又有区别。     

大肠杆菌亮氨酰tRNA合成酶巯基的修饰及标记肽的顺序测定

E. coli LeuRS分别被DTNB,NEM,IAA修饰后,丧失氨基酸活化和氨酰化活性,这两种活性基本上平行地下降,DTNB,NEM和IAA的二级反应常数分别为1700,150和0.46mol/L~(-1)min~(-1),化学计量显示LeuRS的一个巯基是活性必需的,底物Leu和Leu-AMP对该巯基的修饰有明显的保护作用,表明这一活性巯基处于LeuRS的氨基酸活化区域,经过[~(14)C]NEM标记LeuRS巯基,胰蛋白酶完全酶解,HPLC分离标记肽段及顺序测定,表明[~(14)C]NEM主要的标记位点是~(179)Cys~*-Asp-Thr-Lys~(182),这一结果提供了氮基酸活化区域位于LeuRS N瑞区的证据。     

关于高校图书馆资源共享的研究

资源共享是图书馆的必然发展趋势。介绍了目前高校图书馆资源共享的几种模式,分析了高校图书馆资源共享存在的问题,提出了今后高校图书馆资源共享的发展建议。     

ARGINYL-tRNA SYNTHETASE FROM Escherichia coli AFFINITY LABELING WITH 3''''-OXIDIZED tRNA~(Arg)

The covalent modification of E. coli arginyl-tRNA synthetase by the 2',3'-dialdehydederivative of tRNA~(Arg) (tRNA_(ox)~(Arg)) resulted in the complete inactivation of the ATP-PPi ex-change and aminoacylation activities of the enzyme. Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gelelectrophoresis of the ArgRS-tRNA_(ox)~(Arg) covalent complexes indicated that two bands simulta-neously appeared on the gel parallel with inactivation corresponding to different higher mo-lecular weights. This result was different from that of the other aminoacyl-tRNA synthetaselabeling systems as previously reported. Upon the ribonuclease treatment of the modifiedArgRS, less than 15% of both the initial ATP-PPi exchange and aminocylation activities wererecovered. During the whole process of labeling and RNase treatment, the two activities ofthe enzyme were closely associated.