鸣禽间脑听觉卵圆核壳区脑啡肽的免疫组织化学？…

应用尼氏染色及脑啡肽免疫组织化学方法研究了鸣禽白腰文鸟（Ｌｏｎｃｈｕｒａ ｓｔｒｉａｔａ）间脑听觉中－卵圆核（ｎ．Ｏｖｏｉｄａｌｉｓ Ｏｖ）中心核及其壳区（ｓｈｅｌｌ）的形态学特征,再应用神经示踪剂ＢＤＡ（ｂｉｏｔｉｏｎｙｌａｔｅｄ ｄｅｘｔｒａｎ ａｍｉｎｅ）对壳区的神经投射了研究,结果发现（１）脑啡肽免疫组织方法尼氏染色更能区分中心核及壳区,仅Ｏｖ壳区存在脑啡肽纤维或细胞,而忠订户站不存在;     

一种牛精子膜蛋白的纯化及在生殖中的作用

牛精子经ψ=0.5%的NP-40洗脱后,先经伴刀豆凝集素Con A(Concanavalin A)亲和层析分离,经SDS-PAGE电泳,得到相对分子质量Mr分别为32×103,26×103,20×103的3种与Con A结合的糖蛋白CBG(Con A binding glycoprotein).再将亲和层析分离所得蛋白成分经葡聚糖凝胶(Sephadex G-100)层析柱进一步纯化,得到Mr为26×103的单一成分.将26×103 CBG免疫兔后制得抗血清,经PAP免疫组织化学染色发现:26×103的CBG抗原主要分布于牛精子的顶体区,同时鼠精子表面也有同样分布,说明26×103的CBG抗原具有种同保守性.后将26×102的CBG免疫雌鼠,发现其产仔率由对照组的(8.5士2.6)只(n=12)减少到(4.3士1. 8)只(n=24),经t检验(不配对,单尾),二者间差异极显著(p＜0.001).本实验结果表明:26×103的CBG在精卵结合中可能发挥重要作用,并有可能开发为人工避孕疫苗.     

鸣禽间脑听觉卵圆核壳区脑啡肽的免疫组织化学及神经联系

应用尼氏染色及脑啡肽免疫组织化学方法研究了鸣禽白腰文鸟(Lonchura striata)间脑听觉中继核--卵圆核(n. Ovoidalis Ov)中心核及其壳区(shell)的形态学特征,再应用神经示踪剂BDA (biotionylated dextran amine)对壳区的神经投射进行了研究.结果发现: (1) 脑啡肽免疫组织化学方法较尼氏染色更能区分中心核及壳区,仅Ov壳区存在脑啡肽纤维或细胞,而中心核几乎不存在;(2) Ov 壳发出纤维投向端脑听区L2b, L1 ,L3,下丘脑腹内侧核(ventromedial nucleus VMN)和下丘脑前内侧核(n. anterior medialis hypothalami AM); (3) Ov壳接受端脑古纹状体粗核(robust archistriatum RA)壳区、中脑背内侧核(mesencephalicus lateralis pars dorsalis MLd)与丘间核(n. intercollicularis ICo)界面区的投射.首次发现鸣禽卵圆核壳区同非鸣禽相似,也与下丘脑有神经投射联系,它为听觉发声引起内分泌活动及有关行为的改变提供了神经结构基础.     

画眉和白腰文鸟端脑新生神经细胞的起源和分布

用5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记DNA,ABC免疫细胞化学的方法,观察成年画眉(Garrulax canorus)和白腰文鸟(Lonchura striata)端脑神经前体细胞的产生和分布特点.结果如下:1)胸肌注射BrdU短时程组(存活1~5 d),在端脑室带区外侧壁(LVZ)有大量的新生标记细胞,并在纹状体腹侧的室带区(VZ)形成标记细胞增殖热点;2)注射BrdU长时程组(存活15~30 d),在画眉高级发声中枢(HVc)、HVc壳、高位发声运动中枢———古纹状体栎核(RA)内有一些新生标记细胞,在端脑靠近LVZ的区域有较多的标记细胞,但在白腰文鸟的HVc、HVc壳、RA内未见到标记细胞.结果表明:1)新生神经细胞起源于端脑VZ;2)画眉每天都有一些新生神经前体细胞迁移到HVc和RA内,而白腰文鸟成年后HVc和RA很少有新生神经细胞代替旧的神经元,这与白腰文鸟成年后不需要学习新语句的行为是一致的.推测在画眉HVc和RA内能不断地产生新生标记细胞,这可能与它们需要不断学习新的鸣啭语句有关,而且这些新生的细胞在雄、雌画眉中可能具有同样的功能.     

Notch和Wnt信号通路联合对雏鸡听觉毛细胞再生的影响

哺乳类听觉毛细胞(hair cell,HC)损伤后无法再生,鸟类听觉毛细胞损伤后可以再生,研究鸟类毛细胞再生机制将会为研究哺乳动物毛细胞再生提供理论依据.本文选取出生后7d的小鸡作为动物模型,对小鸡基底乳突(basilar papilla,BP)进行体外培养,研究鸟类基底乳突毛细胞再生过程中Notch和Wnt信号通路的作用.研究结果表明:Wnt(Wnt/β-catenin)信号通路与Notch信号通路都对毛细胞的再生作用显著,新生的毛细胞主要来源于支持细胞(supporting cell,SC);抑制Notch信号通路会促进支持细胞转分化变成毛细胞,这个过程会消耗大量的支持细胞,毛细胞的正常功能离不开支持细胞的营养和支撑,支持细胞的过度消耗对长远再生是不可取的;Wnt通路的激动可以促进支持细胞的增殖.本文联合2种信号通路,同时抑制Notch信号通路、激动Wnt信号通路,使大量支持细胞转分化形成毛细胞并不断促进支持细胞的增殖,使毛细胞的再生效果达到最佳状态.     

损毁成年白腰文鸟前脑界面核对鸣曲复杂性的影响?

双侧电损毁成年雄性白腰文鸟(Lonchura striata)界面核NIf(nucleus interfacialis nidopallii),比较损毁前后鸣曲声谱的结构变化以及对声谱参数进行分析,以了解NIf损毁后对鸣唱行为的影响.结果显示:1)短语层面(phraselevel)上发生了长期的简化,音节出现变形并且趋向于同一种音节,音节有严重缺失;2)损毁30d后非典型鸣曲出现大量缺失或缩短,其中部分非典型鸣曲的时长变短并且音节也出现变形;3)损毁后鸣曲音节噪音化,参数中平均频率升高,熵值降低.以上结果表明,损毁NIf显著降低了白腰文鸟鸣曲的复杂性,提示NIf在复杂鸣曲的维持中有重要的生理功能.     

鸣禽白腰文鸟高级发声中枢细胞 起源点及其性双态性增殖

为了更有针对性地研究鸣禽高级发声中枢（ＨＶＣ）性双态性的形成过程,本文以白腰文鸟（Ｌｏｎｃｈｕｒａｓｔｒｉａｔａ） 为实验对象,首先通过ｖｉｍｅｎｔｉｎ免疫组织化学分析端脑 ＨＶＣ 区域放射胶质细胞纤维的起源与走向,推断出幼鸟孵化后 的 ＨＶＣ 正背侧 ＶＺ区为 ＨＶＣ 细胞的主要发源位点;在此基础上,对１５ｄ幼鸟经由胸大肌注射３Ｈ－胸腺嘧啶以标记端脑 新生细胞,通过３Ｈ放射性自显影技术比较雌、雄 ＨＶＣ 干 细 胞 的 增 殖 能 力,充分证明了 ＨＶＣ 细 胞 发 源 点 的 神 经 干 细 胞 细胞增殖能力具有显著的性别差异．