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从分泌抗人红细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞3F5中提取总RNA,逆转录成cDNA,用合成的寡核苷酸引物通过PCR扩增和克隆单抗的轻、重链可变区基因,用双脱氧核苷酸链终止法分析核苷酸序列,采用PCR拼接法构建单链抗体基因,并插入原核表达载体PEt-28a,转化大砀杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后表达,序 分析表明所克隆的VL、VH分别属于鼠IgKappa轻链IV亚组和Ig重链Ⅱ亚组,VH、VL基 相似文献
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