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1.
用 R T P C R技术从 C S F V H C L V 株 F482 代感染兔脾的细胞总 R N A 中分段扩增出了 C S F V E2 基因特异的3 个部分重叠的 D N A 片段(大小分别为 499 bp、572 bp 和 245 bp),并将之分别克隆到p G E M T 载体上 经核苷酸序列测定和片段重叠完成了包含 E2 全长基因的 1 144 bp 序列的测定,其 G C含量为49.0% :核苷酸序列与国外报道的各株病毒的 E2 基因同源性分别为83.5% ~97.5% ;其推导的氨基酸序列的同源性也分别为89.3%~96.2% ,变异主要分布在 E2 蛋白的 N 半部分 相似文献
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正链RNA病毒基因组感染性克隆研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
综合叙述了构建正链RNA病毒基因组全长感染性cDNA克隆的基本思路和关键技术,并总结了影响基因且全长克隆感染性的因素,还简要介绍了利用正链RNA病毒基因组感染性克隆所得的一些研究进展,概括了目前内在该方面的研究现状。 相似文献
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通过序列比对发现猪瘟病毒的强毒株和疫苗株在毒力基因Erns中存在两个差异氨基酸,据此在猪瘟病毒标准强毒sh im en株全长感染性cDNA克隆的基础上,(1)将疫苗株的Erns基因置换sh im en株的相应片段,构建嵌合型全长cDNA克隆;(2)对Erns基因进行定点突变,使293位和311位的丝氨酸和酪 相似文献
5.
对伪狂犬病毒湖北地方株(PRV HB株)糖蛋白H基因片段进行了扩增、克隆、序列测定和分析,比较了该序列与PRV Ka株及NIA-3株三之间的同源性。结果显示,克隆片段长1396bp,G+C含量75.6%包括糖蛋白H(gH)N端283个氨基酸编码区及上游调控序列和胸苷激酶端13 相似文献
6.
用PCR的方法,扩增了伪狂犬病病毒(PRV)gp50基因的一段较为保守区(216bp).检测了不同PRV毒株感染的BHK细胞以及接种的家兔,并对PCR检测的灵敏性作了初步研究,结果表明,PCR法扩增gp50基因具有较高特异性和灵敏性,是检测PRV的有效方法 相似文献
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新城疫病毒HB 92株M基因的克隆和序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
采用RT-PCR方法扩增了新城疫病毒(NDV)无毒耐热株(HB92株)M基因,将其克隆于pGEM-T载体,并进行了序列测定和分析.结果显示,测定的M基因长1223个核苷酸。包含一个1095个核苷酸的开放阅读框(ORF),编码364个氨基酸.与已报道的10株NDVM基因比较,核苷酸同源性为88.4%~95.8%,氨基酸同源性为89.8%~95.3%。HB92株与V4株M基因核苷酸的同源性最高(达95.8%).NDVM蛋白分子中有9对碱性氨基酸。在多肽的第117~120位有一个含4个氨基酸CKKS的特征性结构.这些结果为揭示NDV HB92株的分子生物学背景,了解NDV的分子进化和遗传变异机理,进而开发利用HB92株奠定了基础,也为将NDV另列为副粘病毒亚科的一个新属提供了理论支持. 相似文献
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生物信息学Blocks和Motifs方法在病毒研究中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
评述了生物信息学分析方法及几种主要分析软件的基本原理;提出了蛋白质、核酸序列分析、搜索Blocks和Motifs的基本方法,并提出把病毒信息学作为入门推动整个生物信息学发展的观点. 相似文献
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利用伪狂犬病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)湖北地方株胸腺核苷激酶(TK)基因和gG糖蛋白基因启动子(PgG),构建了PRV基因转移载体.通过β-半乳糖苷酶基因确定PgG控制下外源基因的表达并筛选出表达β-半乳糖苷酶的PRV重组病毒.采用PCR对重组病毒进行了初步鉴定,证实外源基因可由构建的转移载体导入病毒tk基因中,重组的PRV湖北地方株可用于表达外源基因. 相似文献
10.
对NDV HB92株NP基因进行了序列测定和分析.结果显示,NDV HB92株NP基因全长1744个核苷酸,开放阅读框共1470个核苷酸,编码489个氨基酸;与其他10株NDV NP基因核苷酸同源性为88.3%~99.1%,氨基酸同源性为91.0%~98.9%;但HB92株与其亲本株QV4的核苷酸和氨基酸同源性只有90.3%和95.0%,不如与弱毒和中毒株的高;系统进化分析表明,HB92株与弱毒和中毒株的进化关系更近.以上结果表明,HB92株NP基因在序列上已远离无毒株而趋于向弱毒和中毒株进化. 相似文献