小鼠非酒精性脂肪性肝炎中线粒体功能的障碍

[目的]研究非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)中线粒体功能的变化.[方法] C57BL/6小鼠采用胆碱蛋氨酸缺乏(methionine choline deficient, MCD)饮食诱导小鼠NASH模型,喂食胆碱蛋氨酸充足(methionine choline sufficient, MCS)组作为对照; 4周后,处死小鼠同时取血清和肝组织.生化指标检测血清丙氨酸氨基转酶(alanineaminotransferase, ALT)活性、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)活性、肝组织甘油三酯(triglyceride, TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)水平;观察肝组织病理学变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantificational real-time polymerase chainreaction, qRT-PCR)检测小鼠肝脏组织中mtDNA/nDNA和nDNA,以及由线粒体DNA编码的的基因、线粒体DNA复制相关的基因、与小鼠肝脏中能量代谢相关的基因的表达变化.[结果]与MCS模型组相比, MCD组ALT, AST, TG水平明显升高,但TC水平降低;肝组织变性严重,产生大量脂肪空泡,小叶结构破坏严重,炎细胞浸润明显; MCD模型组线粒体生成能力、能量代谢水平和DNA修复能力显著降低.[结论]小鼠非酒精性脂肪性肝炎中线粒体功能发生障碍.     

小鼠肝脏特络细胞的分离与鉴定

[目的]基于已有的特络细胞分离方法,构建一种更为稳定高效的肝脏特络细胞分离方法,为后续特络细胞对肝脏潜在调控作用的研究建立坚固的理论基础和实验支持.[方法]选取C57BL/6雄性野生小鼠;采用酶液多次短期消化及离心法分离肝脏特络细胞,并进行常规细胞培养;采用CD34+Vimentin免疫荧光染色鉴定所得细胞表型.[结果]成功分离了小鼠肝脏特络细胞;小鼠肝脏特络细胞在体外培养时呈CD34及Vimentin双阳性,肝星状细胞系呈CD34阴性及Vimentin阳性.[结论]本分离法可以获得优质的肝脏特络细胞,满足后续研究的需要.