玉米核基因的图位克隆方法

玉米是主要的粮食和饲料作物,经济地位十分重要,玉米杂种优势的利用是农作物杂种优势利用最成功的例证之一.图位克隆是鉴定突变体突变基因的重要方法之一.随着不同植物基因组数据的释放和新的技术出现,图位克隆将得到更为广泛的应用.本文概述了图位克隆的基本原理及其在玉米基因克隆中的常用操作方法,包括遗传特征的分析、作图群体的构建、多态性分子标记的筛选、目的基因的粗定位和精细定位、候选基因的评估和验证等,最后讨论图位克隆在玉米核基因克隆的应用中可能出现的问题和解决措施.本文所描述的应用于玉米突变体的图位克隆的常规策略在植物里是相通的,也适用于其他植物.     

紫外分光光度技术测定植物细胞中H2O2的含量

利用H2O2在24Onm处有吸收光谱的特性，建立了快速测定植物活细胞产生H2O2的方法．同时利用该技术进一步定量检测了ABA诱导蚕豆气孔保卫细胞H2O2的产生．     

西瓜枯萎病抗性的细胞学研究

作者针对枯萎病菌对西瓜幼根的侵染过程进行研究，对西瓜感病、抗病品种受感染后细胞学特征变化进行了观察．实验结果表明：枯萎病菌多从根部受损部位侵入，穿过薄壁组织后进入维管组织，在菌丝体生长处，薄壁组织多坏死，木质部导管中相继出现侵填体及-些灰褐色物质，并发生管壁加厚现象，在筛管中筛板加厚形成胼胝体这种现象在感病品种与抗性品种中都能见到，但在抗性品种中发生更早、频率更高．     

ABA对拟南芥los5-1突变体及其野生型保卫细胞质膜内向K~+通道的调节

以拟南芥(Arabidopsis thaliana)ABA缺失突变体los5-1及其相应野生型为材料,用细胞质膜钙离子通道的抑制剂LaCl3和细胞内钙离子的螯合剂EGTA处理,运用膜片钳技术探讨在ABA调节突变体和相应野生型保卫细胞质膜内向K+电流过程中Ca2+的作用.实验结果表明ABA均可以明显抑制拟南芥C24野生型及其突变体los5-1保卫细胞原生质体的内向K+电流,而且ABA对los5-1突变体及其相应野生型保卫细胞质膜内向K+通道的调节具有不同的Ca2+依赖性,说明ABA对突变体和野生型的K+通道     

外源ABA对拟南芥花粉生长的影响

以拟南芥(生态型Col-0)的花粉为材料,主要研究外源ABA对花粉萌发和花粉顶端生长的作用.通过ABA浓度梯度(0,10,50,100μmol/L)处理,结果表明,ABA显著抑制了拟南芥花粉的萌发和花粉管的生长.利用激光共聚焦技术研究的结果表明,ABA通过改变活性氧的极性定位模式影响花粉的生长.     

人类继续生存的机会--兼谈经济社会中人与动物的关系

从古代经典自然生态学、当代生态学和经济学的观点出发,讨论在现代社会面临诸多生态巨变的情况下的人与动物的关系,并提出经济社会中人类继续生存的机会要靠人类改变自身生活方式.     

拟南芥NOA1蛋白的原核表达和分析

通过构建AtNOA1的GST融合表达载体,在E.coli中表达AtNOA1蛋白,并分析不同诱导条件对AtNOA1蛋白表达的影响.结果表明,22℃是AtNOA1表达的最适诱导温度,而IPTG浓度在一定条件下变化对AtNOA1表达量无明显影响.     

地高辛标记cDNA探针检测植物谷胱甘肽过氧化物酶基因表达及方法研究

本文利用RT-PCR和PCR技术制备地高辛标记的谷胱甘肽过氧化物酶(ATGPX3)cDNA探针,分别进行DNA和RNA斑点和印迹杂交分析.通过调整杂交液组分的浓度和增加10%硫酸葡聚糖的方法,改进杂交反应.实验结果表明,改良的方法不仅提高了杂交效率,而且明显检测到RNA杂交印迹反应.另外,利用地高辛标记cDNA探针技术也检测到了植物激素ABA诱导的ATGPX3基因的表达,同时证明了该方法可以用来检测植物基因的表达.     

衰老叶片叶绿素荧光动力学变化及6-BA延缓衰老的机理研究

观测了离体小麦叶片衰老进程中685nm光诱导荧光动力学的变化,发现曲线的第二峰首先消失,F_v(F_p-F_t)、F_p-F_t和F_v/F_o比值迅速下降,达最大荧光P点的时间缩短。推测衰老叶片中PQ分子数目的减少是光合能力丧失的主要原因。用6-BA处理叶片,阻止了F_v和F_v/F_o比值的下降,与对照相比,衰老第三天仍保持第二峰;此外,核黄素使第二峰消失,而核黄素+BA与BA效果相似;同时叶片衰老时SOD活性的下降和膜脂过氧化作用均被延缓,据此探讨了BA作为自由基清除剂延缓叶片衰老的可能机理。     

ABA和H2 O2在NaCl诱导的气孔关闭中的作用

以拟南芥野生型（wt）和ABA合成缺失突变体（aba3）为材料，采用表皮生物分析法研究了NaCl胁迫条件下，ABA和H2O2在气孔关闭中的作用。结果表明：100mmol/L的NaCl可有效诱导wt气孔关闭，而对aba3的气孔运动无明显影响；10^-2mmol/L的H2O2处理或100mmol/L的NaCl与10^-2mmol/L ABA共处理可有效诱导wt与aba3的气孔关闭，且幅度类似；H2O2的性清除剂CAT可部分逆转NaCl处理及NaCl与ABA共处理引起的气孔关闭，因此推测，NaCl胁迫条件下，植物保卫细胞内ABA浓度升高，诱导H2O2的产生，进而诱导了气孔关闭。