四川地区宫颈癌组织HPV18和HPV45 E6基因突变分析

采用聚合酶链反应技术对四川地区2003~2004年收集的60例宫颈癌患者的癌组织DNA进行人乳头瘤病毒(HPV) E6基因扩增, 获得HPV18和45型E6基因. 序列分析发现, 18型三例E6基因有同样的两处同义突变; 45型两例E6基因发生突变, 一例有两处碱基突变, 另一例发生六处碱基突变, 其中两处涉及氨基酸变化, 均位于E6抗原决定簇区. HPV45型E6基因中134位c→t, 157位c→t, 259位g→t和341位t→c的碱基点突变未见报道. 另外， 该地区HPV18和45型突变株之间存在碱基互变,  它们之间的最小差异比野生型HPV18和HPV45之间的差异小4.05%, 该数值比在非洲发现的突变株的要小很多, 该结果支持HPV18和HPV45可能起源于非洲的观点.     

迂回风道对安全门地铁环控能耗的影响

为了研究迂回风道对安全门地铁环控能耗的影响,首先建立了地铁车站三维模型,并采用示踪气体的方法,结合计算流体动力学(CFD)技术对迂回风道开启或关闭情况下的气流组织进行模拟,得出开启和关闭迂回风道的掺混系数值分别为19.79%和39.10%,表明开启迂回风道能有效降低站台活塞风的进入;然后根据地铁线路系统特性,建立了通风空调网络模型,运用地铁热湿负荷分析模拟软件(STESS)进行能耗模拟分析,重点探讨了不同季节迂回风道的启闭对地铁环控能耗的影响。结果表明,在采用夏季开启,过渡季、冬季关迂回风道的运营模式后,初期每年节省电量1 284 800kW·h,近期每年节省电量2 106 300kW·h,远期每年节省电量711 400kW·h,该措施对安全门地铁环控能耗的降低作用十分明显。     

鼠白细胞介素15真核表达质粒的构建及活性鉴定

从经PMA刺激的小鼠脾细胞中提取总RNA, 采用RT-PCR技术获得鼠白细胞介素15(mIL-15)基因, 将其克隆至真核表达质粒VR1012中, 转染COS-7细胞, 将转染细胞裂解, Western blot检测. 表明获得了mIL-15真核表达载体, 其具有完整的带有信号肽的mIL-15序列, 重组结果正确, Western blot检测阳性. 并获得有生物活性的mIL-15蛋白.     

建筑防水工程应注意的质量控制和处理措施要点剖析

建筑防水工程是建筑产品的主要组成部分，是建筑产品应具备的基本功能之一。首先阐述了建筑防水工程质量控制研究的目的和意义，通过调查研究对我国建筑防水工程的状况及发展进行了分析，明确了目前防水材料质量与种类、防水设计因素、防水施工操作因素、成品保护因素等方面对防水工程质量的影响程度。阐述了进行全面质量管理的工作方法和工作程序。进而结合工程施工现场对建筑防水工程的设计、材料和施工管理等各方面的质量控制和处理措施进行了分析和探讨，提出了建筑防水工程质量控制的具体措施及要点。经过分析验证了全面质量控制对建筑防水工程质量控制的可行性与合理性。     

细胞周期蛋白质依赖性激酶CDK2多克隆抗体的制备和鉴定

我们采用PCR技术合成编码CDK2肽段的基因,将其置于谷胱甘肽转移酶（GST）编码基因的下游,在IPTG诱导下,于E．coli中诱导表达了GST-CDK2肽融合蛋白质,以此融合蛋白质作为免疫原免疫家兔制备抗CDK2的多克隆抗体,经Western Blot检测证明：该抗体能够特异地识别CDK2蛋白质,可作为CDK2的特异性检测抗体,用于研究细胞周期和细胞凋亡进程中CDK2的作用．     

HIV-1嵌合抗原的纯化及免疫原性分析

为获得高效的HIV诊断试剂,选定HIV-1的外膜蛋白env中469-511aa,538-674aa和700-734aa3处包含较多抗原位点的区域作为免疫抗原,用PCR的方法从HIV-1全基因扩增编码这3处片段的基因序列,将它们克隆到原核表达载体中,利用大肠杆菌表达系统表达嵌合蛋白.结果发现,3段嵌合基因能在大肠杆菌BL21(Star)中表达,通过Ni-sepharose4B金属Ni螯合层析柱分离纯化目的产物,酶联免疫检测结果表明,纯化抗原有较强的抗原特异性.     

中国内蒙古通辽地区和吉林长春地区宫颈癌中HPV16型E6基因变异分析

为了解我国内蒙古通辽和吉林长春地区宫颈癌中HPV16亚型的分布情况,对通辽和长春的30例HPV16阳性宫颈癌样品中的HPV16 E6基因进行序列分析.结果在30例宫颈癌样品中的E6全长基因内发现11处位点突变,形成了14种突变体,其中突变T459G是本试验第一次发现的突变.经系统进化分析发现,所有突变体均属欧洲原型突变群.结合之前我国HPV16亚型分布调查结果表明,欧洲型和东亚型HPV16在我国不同地区,分布不均一,主要以欧洲原型突变群为主.     

重氮法固定化糖化酶活力和稳定性

本文以苯氨基磺酸型多孔聚苯乙烯为载体，重氮化活化其苯氨基与糖化酶上的氨基反应。在固定化酶过程中，随反应时间的延长，不但固定化酶总活力增加，而且其比活和热稳定性也随之升高，最终可得活力为２００００Ｕ／ｇ干胶，比活为５００的高活力固定化酶，该固定化酶在ｐＨ４．５，６０℃无底物下保温，其半寿期是天然酶的５倍。以麦芽糖，糊精（分子量为１５００）和可溶性淀粉为底物测定该固定化酶活力表明：对某种孔度一定的载体     

hKv4.3基因5＇非翻译区序列S160功能分析

hKv4.3基因是形成瞬时外向钾电流Ito的主要分子基础,它在心脏和神经细胞中大量表达,但在其它组织中则未见大量表达。为了研究hKv4.3表达在基因水平的调节,将hKv4.3基因的5＇非翻译区的一段序列（＋2～＋160,称之为S160）克隆到报告质粒中,进行瞬时表达。发现S160对hKv4.3基因的启动子和SV40的启动子都有强烈的抑制作用,没有方向特异性,但却有位置特异性。经删除突变分析,在S160片段中发现了一个抑制元件S（GAGGGGTTAA）,它位于hKv4.3基因中转录起始位点下游20～30 bp处。在此基础上,用RT-PCR方法对mRNA进行定量分析,初步确认这个抑制元件对蛋白表达的抑制过程是在翻译水平上。     

hKv4.3最小功能启动子区与上游抑制元件分析

通过克隆hKv4.3的启动子区和相关的上游调控元件,对hKv4.3基因在转录水平的调控进行了分析.对启动子区5'端一系列的删除突变分析证明,hKv4.3基因的最小功能启动子区是位于转录起始位点附近的-156～+2bp序列.经序列分析发现,这个启动子缺乏典型的TATA-box,却存在另外3个元件,即E-box(CANNTG),CArG-box[CC(A/T)₆GG]和CACC-box(GGTGC),其中CArG-box对该启动子活性起关键作用.同时在启动子区找到一个未见报道的大小为10bp的抑制子T,删除抑制子T,则启动子活性增加1倍以上.