液相色谱-串联质谱检测贝类组织中5种脂溶性贝毒素

建立了液相色谱-串联质谱分析贝类组织中米氏裸甲藻(GYM)贝毒素、螺环内酯毒素(SPX1)、大田软骨酸(OA)贝毒素、蛤毒素(PTX2)、原多甲藻酸(AZA1)贝毒素的方法.用甲醇-水(4: 1, V/V)溶液对贝类组织中GYM, SPX1, OA, PTX2和AZA1进行提取,MAX阴离子交换柱净化后,采用液相色谱分离,除OA以负离子选择反应监测外,GYM, SPX1, PTX2和AZA1以电喷雾离子源正离子选择反应监测模式进行质谱分析.5种脂溶性贝毒素GYM, SPX1, OA, PTX2和AZA1在各自相应浓度范围内线性良好,相关系数＞0.99.扇贝闭壳肌空白样品添加5种贝毒素的提取率均为78.6%～94.4%(n=6); 精密度(RSD)为6.8%～14.9%.贝类组织中5种贝毒素GYM, SPX1, OA, PTX2和AZA1的检出限分别为0.10, 0.21, 2.00, 0.32和0.04 μg/kg.     

新生大鼠海马神经元体外分散培养技术研究

在实验室建立了分散的新生大鼠海马神经细胞体外培养模型。该模型属原代培养。在体外能直接观察神经元的生长发育。研究表明：该模型稳定性好,差异性小：培养神经细胞可存活１个月以上,１４ｄ左右细胞生长最为丰满,且四周晕光明显,神经突起多而粗大,分枝互成网络;１４ｄ以后生长减缓。由于在此模型培养的条件下,即不存在血脑屏障问题,又容易控制条件,便于在细胞和分子水平上深入研究神经细胞的形态学,生理学,生化代谢及药     

对“改进的Blenden氏细菌鞭毛染色法”的再改进

本文通过实验对“改进的Blenden氏细菌鞭毛染色法”作了再改进。再改进后的方法不仅具有染色液配制简便、有效期长、所用药品定量化等优点,而且可获得更佳染色效果。文中还就载片的清洗,在固体斜面上的取茵部位提出了合理意见。并对染色过程中加热予否同染色效果的关系进行了讨论。     

两歧双歧杆菌固态培养的研究

两歧双歧杆菌 (Bifidobacteriumbifidum )ATCC2 95 2 1在含质量分数为 2 0 %惰性固态物质 (纤维素 )的MRS固态培养基中 ,若营养物的质量分数比液体培养基中营养物的质量分数提高 1倍 ,则菌体生长量也相应提高 1倍 (达 1 9× 10 8cfu/ g) .经过 3种固态基质作比较后 ,发现大豆渣和麦麸为佳 ,前者的含菌量最高达 5 4×10 8cfu/ g ,后者含菌量最高可达 2 3× 10 8cfu/ g .通过加入可中和所产酸量的CaCO3 ,并用缓冲液代替水配制培养基 ,结果发现用pH6 8的缓冲液配制培养基 ,培养后含菌量可达 16× 10 8cfu/g ,比对照的液体培养提高了11 4倍 .通过“液 固先后培养”并测定其中活菌数的变化 ,进一步证明了固态培养的优越性 .     

核苷酸的薄层层析分离及其定量测定

薄层层析是一项重要的分离分析技术。自从Randrath应用ECTEOLA纤维素薄层分离AMP、ADP和AFP等化合物以来,这一技术已广泛应用于核酸类化合物的分离。Josefsson利用荧光物质提高灵敏度的方法对碱基和单核苷酸进行了微量的半定量测定。我们采用DEAE纤维素薄层,以稀HCl为层层剂,较满意地分离了AMP、GMP、CMP和UMP四种核糖单核苷酸,并得到较好的定量回收率。     

液相色谱-串联质谱法检测贝类产品中的原多甲藻酸贝类毒素

建立了一种贝类组织中原多甲藻酸(azaspiracid, AZA)贝类毒素主要成分AZA1的高效液相色谱-串联质谱检测方法。本方法采用甲醇-水(80:20, v/v)溶液对贝类组织中AZA1进行提取,并用MAX阴离子交换固相萃取(SPE)柱富集净化,使用Atlantis dC18(150 mm×4.6 mm, 5.0 μm)色谱柱分离,以含有50 mmol/L甲酸和2 mmol/L甲酸铵的乙腈-水溶液(80:20, v/v)为流动相进行等度洗脱,质谱采用选择反应监测(SRM)模式。AZA1在5 min内获得完全分离,且在48.85～2 442 ng/L范围内线性良好,相关系数为0.998 1。该方法检出限(S/N=3)为11.00 pg/g,添加水平为36.64、73.27、146.54 pg/g时的平均回收率为75.8%～82.5%(n=6),相对标准偏差小于10%。利用该方法对采自大连、青岛、广州水产品市场上的112个贝类样品进行了分析,发现采自大连和广州的部分贝类样品中含有AZA1。结果表明,该方法具有简单、快速、灵敏度高等特点,能充分满足贝类中AZA1检测的要求。     

泛酸、烟碱酸和腺嘌呤对紫外线照射后大肠杆菌(Escherichia coli B)恢复作用的初步研究

我们知道,紫外线具有强烈的杀菌作用.自从Kelner(1949)发现了可见光能促使紫外线损伤后的灰色链霉菌(Streptomyces griseus)的分生孢子恢复——光复活作用以来,学者们对射线损伤后微生物的恢复现象引起普遍的重视.此后,不同学者相继地发现了各种类型的复活作用,其中有一类被称为代谢性复活作用.