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发现18种氨基酸特别是色氨酸.在ToyopearlHW-40S树脂所填色谱柱上表现出非理想排阻行为的基础上,以色氨酸在该柱上的保留时间为指标,探讨不同流动相改良剂对该凝胶与色氨酸之间的相互作用,阐明这种反常行为是疏水作用,离子交换以及氢键三者综合作用的结果,而疏水作用是最主要的影响因素.实验结果表明,流动相组成对该凝胶色谱行为具有明显的影响,从而有助于确立该凝胶理想的排阻色谱条件,为利用该凝胶所具有的吸附性能分离分析肽类和氨基酸等小分子物质奠定了基础 相似文献
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采用RT-PCR方法从大黄鱼脑垂体总RNA中克隆编码生长激素基因序列,并与数据库中鱼类生长激素基因进行比较.扩增获得的生长激素基因定向克隆到表达质粒pET-22b(+),并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达.表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占细胞总蛋白的5%. 相似文献
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为了进一步探讨非还原端饱和结构的肝素寡糖在UV 232 nm的吸收情况, 制备了4种饱和结构的肝素二糖, 并用离子对反相液相色谱/离子阱飞行时间质谱(RPIP-LC/MS-IT-TOF)光电二极管阵列检测器分析了它们在UV 232 nm的吸收情况. 分析结果表明, 饱和结构的肝素二糖在UV 232 nm的检出限为9 μg(S/N=10), UV 232 nm/UV 206 nm约为不饱和结构肝素二糖UV 232 nm的7%~40%. 结果还表明, 肝素二糖UV 232 nm的吸收强度受亚硫酸基团(SO32?)影响较大. 另外, 通过比较不饱和结构的肝素/硫酸类肝素(Hep/HS)标样二糖发现, 含N-未取代葡萄糖胺(GlcNH3+)基团的二糖在UV 232 nm的吸收值较低. 最后, 通过简单的UV检测方法, 结合 HNO2(pH=4.0)裂解法和RPIP-LC/MS-IT-TOF分析, 简化了含GlcNH3+肝素六糖的测序方法. 本研究为以后用 HNO2(pH=1.5)裂解法对混合组分N-硫酸化的肝素寡糖结构序列分析提供了可能. 相似文献
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可跨膜融合蛋白PTD-SOD与肝癌细胞和正常肝细胞共培养,使细胞内SOD活力分别增加了52%和23%,提高胞内总抗氧化能力(T-AOC)水平达100%,同时降低ROS水平.实验结果显示,肝癌细胞增殖受到显著抑制,最高抑制率达91.91%,对正常肝细胞抑制率较小,为45.50%. 相似文献
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采用高效液相色谱分别考察了肠道菌群模式菌株及各单菌的色谱行为,成功建立了HPLC分离分析肠道菌群模式菌株的最佳洗脱方法,即阶梯式梯度洗脱.结果显示,肠道模式混合菌株经过高效液相色谱分离得到5个明显的洗脱组分,分别为0.10 mol·L~(-1)(脆弱拟杆菌和金黄色葡萄球菌)、0.20 mol·L~(-1)(青春双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌)、0.25 mol·L~(-1)(粪肠球菌)、0.30 mol.L~(-1)(奇异变形杆菌、克雷伯肺炎杆菌和产气荚膜梭菌)和0.50 mol·L~(-1)(大肠杆菌和产气荚膜梭菌)洗脱峰.色谱柱的上样浓度为培养菌液(OD600=0.576)的5倍时,其最大上样量为500μL,且方法分辨率高、重现性好、结果稳定. 相似文献
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离子交换色谱法分离青枯菌及其色谱峰的鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
采用离子交换色谱法对世界上分布最广、危害最重且最难防治的植物致病菌青枯菌进行了色谱表征。在以0.02 mol/L哌嗪-盐酸缓冲液(pH 8.0)为流动相、梯度洗脱条件下,青枯菌在SuperQ-650 C色谱柱(200 mm×4.6 mm i.d.)上被分离为3个不同的色谱峰。根据这3个组分的形态和生理生化性质,确定青枯菌原液和分离得到的3个组分都属于青枯菌的生化型Ⅲ型。通过2,3,4-三苯基氯化四氮唑(TTC)平板鉴定两个洗脱峰菌体的致病性及电镜观察二者的运动性,发现第一洗脱峰菌体的致病性弱于第二洗脱峰菌体而运动性强于后者。实验表明,通过离子交换色谱可以把常规微生物方法无法分离的青枯菌的不同状态区分出来。分离结果将为阐明青枯菌的多态性及传代培养过程中致病性逐渐减弱的内在机理,最终研制出特效的青枯菌抗菌剂具有重要意义。 相似文献
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对第一向为载体两性电解质pH梯度等电聚焦双向电泳(ISO-DALT)中若干影响分离效果的实验条件进行了研究.结果发现,琼脂糖和尿素的纯度明显影响分离效果;加丙烯酰胺或碘乙酰胺保护经二硫苏糖醇还原的样品中的巯基,可以显著减少假斑点;厚度较薄的分离胶的分离效果较好;以琼脂糖为两性电解质载体代替聚丙烯酰胺的第一向等电聚焦电泳使分子量105Da以上蛋白质得以分离. 相似文献
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将尖吻蝮蛇类凝血酶基因克隆到载体pET32a(+)上,在大肠杆菌Rosetta2(DE3)中表达N端融合了硫氧还原蛋白的类凝血酶.通过SDS-PAGE检测融合蛋白条带,纤维蛋白原凝结实验检测酶学活性.确定表达菌株后,对其诱导条件进行优化,在30℃诱导3 h,诱导剂IPTG浓度为0.5 mmol·L-1条件下类凝血酶表达水平最高. 相似文献
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为了探讨模式美拉德反应产物对面包制作工艺及品质的影响,本文将该模式美拉德反应产物添加至面团中,并采用二次发酵法来制作面包,研究了不同比例的模式美拉德反应产物对面包醒发时间、比容、质构及水分迁移的影响,并从感官上对面包的品质进行了评价.实验结果表明,模式美拉德反应产物的添加量对面包制作工艺和品质有不同程度的影响,当添加量超过0.20%时,面包的基础发酵时间持续下降,比容不断上升;但添加量超过0.60%时,基础发酵时间趋于稳定,比容不再增加,此时添加或不添加模式美拉德反应产物,面包的二次发酵时间都基本不变.这说明适量添加美拉德反应产物能够增加面团的体积和面团含气量,或者能提高酵母的产气能力,使得面包的体积变大.当添加量为0.40%时,面包的感官评价最高,此时面包的硬度降低且弹性和回复性较好;与空白组相比,模式美拉德反应产物的添加比例为0.40%时,面包在储藏过程中始终具有较高的结合水和半结合水含量,其持水性最好.这些结果可从水分迁移的角度解释美拉德反应产物对面包制作工艺和品质的影响,可为模式美拉德反应产物在面包中的添加提供基础的依据. 相似文献