SARS CoV内对照RNA病毒样颗粒的构建和表达

在SARS-CoV的核酸检测方法中,由于普遍缺乏安全、稳定、特异的内对照,而不能对样品处理、反转录、扩增以及定量检测实施全程监控。构建的病毒样核蛋白颗粒内对照,能够对SARS-CoV临床检测实施监控。本文通过克隆1.7Kb大肠杆菌噬菌体MS2的装配蛋白和壳蛋白基因以及SARS冠状病毒经过突变产生的270bp内对照片断,并将这些基因连接到载体pTrc99a上表达,进行纯化、定量分析、RT-PCR检测和稳定性试验。获得SARS内对照病毒样核蛋白颗粒,在人血清和SM缓冲液中37℃稳定性可达到30天,能抵抗核糖核酸酶降解。将内对照颗粒加入临床样本中一同检测,能够对检测的全过程(样品处理、反转录和PCR)有效进行监控,与SARS-CoV没有交叉反应。研究表明制备的该病毒样核蛋白颗粒稳定、安全、可靠,可作为SARS冠状病毒RT-PCR检测、定量分析的有效内对照参考品。     

五氯化磷辅助下氨基酸的自组装成肽反应研究

L-α-氨基酸和D-α-氨基酸可与五氯化磷直接发生磷酰化反应，随后自组装成多肽，但β-氨基酸不能成肽，DL-α-氨基酸成肽困难；在SOCl2存在下，α-氨基酸也不能成肽，用电喷雾质谱研究了氨基酸的自组装反应，反应过程中有五元环状的氨基酸五配位磷中间体生成，使用硅烷基保护的氨基酸，在^31PNMR中可观察到五配位磷中间体。     

水杨酸与二烷基亚磷酸酯反应历程31P NMR与电喷雾质谱跟踪研究

The reaction between salicylic acid and dialkyl phosphite was traced by electrospray ionization mass spectrometry and ^31P NMR. All reactants, unstable intermediates and products were detected. The mechanism was proposed based on ESI-MS results and ^31P NMR profiles.     

鲁米诺-H2O2-CuSO4体系中针剂维生素C的抗自由基活性

采用鲁米诺 H2 O2 CuSO4化学发光体系 ,测定了 2种不同厂家生产的维生素C的抗自由基活性 ,比较了 2种维生素C针剂的自由基清除率 .结果表明 ,该体系可以用于抗自由基活性检测 ,方法简单快速     

近红外光谱法分析格列齐特片

应用化学计量法处理光谱数据,用偏最小二乘法建立格列齐特片的近红外分析模型。通过光谱预处理和模型的逐步优化最终确定定量分析模型的相关系数为0.991,交叉验证均方差(RMSECV)为0.641,预测均方根误差(RMSEP)为0.980,主因子数为4。选取15个验证样品对模型进行检验,检测结果相对误差在-2.04%～3.52%之间。     

红外、近红外光谱-簇类的独立软模式方法识别植物调和油脂

用IR,NIR光谱法结合簇类的独立软模式(SIMCA)识别方法对植物油脂进行分类识别,建立了识别二元、三元植物调和油脂的测定方法。应用NIRCal5.2软件的SIMCA技术,分别为所制备的植物调和油脂建立了IR和NIR识别模型,并讨论了光谱处理和数据处理方法来提高模型的分类识别效果。分别以各种植物调和油脂的IR和NIR光谱为变量,随机抽取2/3的样本作训练集,建立了各个调和油的主成分分析(Princi-pal component analysis,PCA)模型;1/3作验证集,对所建模型进行验证识别。用聚类分析-主成分分析(CLU-PCA)方法考察调和油的IR,NIR光谱信息与其纯油的主成分分布。结果显示,在4000～10000cm-1光谱范围内,SIMCA可以对15种二元调和油和2种三元调和油的NIR光谱分别聚类并识别;并对10种二元调和油和2种三元调和油的IR光谱分别聚类并识别。IR以4个波数1099,1119,1746与2855cm-1的吸收值作为分析基础,选择不同的主成分数及数据预处理方法。各种油脂的SIMCA分析的分类精度均为100%,调和油的验证识别准确率100%,最低识别比例为1%,且IR识别灵敏度高于NIR。     

不同产地牡丹皮中丹皮酚和芍药甙含量的HPLC法测定

采用RP-HPLC方法建立了测定牡丹皮中丹皮酚和芍药甙含量的方法.色谱条件:C18色谱柱;丹皮酚测定所用流动相为甲醇—水(50∶50)为流动相,检测波长为274 nm,;芍药甙测定所用流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(18∶82)为流动相,检测波长为230 nm.结果:丹皮酚和芍药甙的线性范围分别为0.36-2.2μg/L和0.042-1.060μg/L,平均回收率分别为96.30%和98.21%,RSD分别为0.97%和0.64%.本方法简便、快捷、重现性好.用本方法对不同产地的牡丹皮中丹皮酚和芍药甙进行了测定,结果表明,牡丹皮中两种成分明显正相关,其中四川牡丹皮中两种成分含量最高.     

Ce(Ⅳ)-Ru(bpy)_3~(2+)化学发光体系测定利塞膦酸钠

在酸性介质中,利塞膦酸钠对Ce(Ⅳ)-Ru(bpy)32+化学发光体系有显著的增强作用,据此建立了静态注射化学发光法测定利塞膦酸钠的新方法。在优化的实验条件下,其测定范围在1.0～20.0 mg/L,检出限为0.6 mg/L,对10.0 mg/L样品进行11次平行测定,RSD为2.2%。     

悬浮液进样-原子吸收法测定中药材中铜、锌、铁

本文提出了一种悬浮液进样－火焰原子吸收法测定中药材－－怀药（怀山药、怀牛膝、怀菊花）的新方法。并成功地进行了Cu,Zn,Fe的测定。将粉碎后的怀药悬浮于琼脂胶体中制成悬浮液，对悬浮剂的选择及化不干扰的消除进行了考察。将试液喷入空气－乙炔火焰中，用标准加入法测定，结果与HNO3＋H2SO4＋HClO4处理法一致。t检验结果表明：两种样品处理方法之间无显著性差异，可以采用悬浮液进样法取代HNO3＋H2SO4＋HClO4处理法，该方法快速简便、安全，有效，结果令人满意。     

磷酸苯基二乙基酯的合成及波谱检测

作为有机磷小分子化合物 ,磷酰胺及其酯类衍生物大多具有广泛的生物活性。磷作为生命的重要元素 ,在生命体系中处于一种重要的地位 ,研究磷参与的生命过程的化学本质 ,对于更好地认识生命体及人类自身都具有重要意义。从化学意义上讲 ,磷参与的绝大部分生命过程 ,其化学本质都是磷酰基转移反应 ,对于这样一类生物体普遍存在的磷酰基转移反应 ,亦可应用到医药和农药上 ,对一些官能团进行结构改造 ,以改变其活性及仿生作用。Atherton Todd反应是合成此类物质极有价值的方法。为了进一步改善和提高水杨酸类药物的仿生作用 ,作者曾采用Atherton Todd反应合成了水杨酸羟基磷酸酯 ,但产率偏低。因此怀疑是水杨酸中羧基和羟基与磷酰化试剂发生竞争反应时羧基更具反应活性 ,为进一步探讨原因 ,文章选择了不含羧基的酯化过的水杨酸乙酯作为磷酰化反应的对象。结果首次采用改造后的Atherton Todd反应成功地制备出o [邻乙氧甲酰 (基 )苯基 ]磷酸二乙酯 ,并具较高产率。文章进一步详细给出了o [邻乙氧甲酰 (基 )苯基 ]磷酸二乙酯NMR谱数据 ,首次探讨了其ESI MS质谱裂解规律 ,对进一步合成更广泛的具有生物活性的酚类磷酸酯化合物将起到重要参考作用