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从91例骨髓增殖性肿瘤(MPNs)患者及1 028例健康志愿者(均为中国人)外周血中提取基因组DNA,应用等位基因特异性PCR(ASP)技术,检测作为蛋白质酪氨酸激酶JAK2单倍型46/1标签的rs12343867和rs10974944位点的基因型,并结合临床资料,应用SNPstats软件进行统计学分析.实验结果表明:MPNs患者JAK2单倍型46/1出现的几率明显高于健康志愿者(P0.000 1);MPNs患者的JAK2单倍型46/1更易在JAK2V617F突变阳性MPNs患者(n=70)中出现(P0.000 1);具有JAK2单倍型46/1的中国人群患MPNs的风险增加显著,该结果与测试欧美人群的结果一致. 相似文献
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以大肠杆菌为宿主, 将含有蛋白质酪氨酸磷酸酶YopH催化结构域(ΔYopH)的质粒转入其中, 高效表达了ΔYopH. 分离纯化后, 以ΔYopH为靶标, 应用体外酶促反应动力学实验, 研究111种中药水提液的抑制效果, 筛选出对ΔYopH有明显抑制作用的五倍子、 石榴皮和地榆, 并进一步研究其半数抑制浓度(IC50值)及抑制类型. 相似文献
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介孔材料的修饰及固定青霉素酰化酶的稳定性研究 总被引:4,自引:0,他引:4
利用扩孔剂的作用合成出较大孔径(12 nm)的介孔材料SBA-15, 并进行表面氨基修饰, 以此为载体, 以戊二醛为交联剂, 对青霉素酰化酶进行组装固定, 并对固定化青霉素酰化酶(PGA)的稳定性进行了深入的研究. 实验结果表明, PGA与载体交联后仍保持活性. 热稳定性研究结果表明, 制备的固定化青霉素酰化酶在低于60 ℃时保持稳定; pH在6~11范围内保持稳定; 固定化酶重复使用10次之后, 仍具有高达90%的残留活力. 相似文献
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以秀丽线虫为模型,研究药食同源植物薄荷提取物对其应激抵抗能力的影响,并以紫外辐射为应激条件,进一步研究薄荷提取物抵抗紫外辐射的作用机制.结果表明:薄荷提取物可明显提高线虫抵抗紫外辐射、绿脓杆菌感染、35℃热应激和胡桃醌氧化的应激能力;薄荷提取物可明显降低紫外辐射后线虫体内活性氧(ROS)水平、提高超氧化物歧化酶(SOD... 相似文献
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本文构建的表达载体pGex-2T-SPAP2CT在大肠杆菌中表达出可融性蛋白, 其分子量为46 000, 经纯化后得到产率为10%、 纯度大于90%的GST-SPAP2CT蛋白. 相似文献
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通过双相酸水解法优化山奈酚提取条件,结合高效液相色谱(HPLC)法,通过单因素实验考察酸浓度、提取时间和固液比对山奈酚提取率的影响,并利用响应面Box-Behnken实验优化提取山奈酚的最佳工艺. 实验结果表明:最佳提取条件的盐酸浓度为6.1×10-2 mmol/L,提取时间为12.87 min, 固液比为1∶137.46, 提取率达1.11%; 山奈酚具有一定的抗氧化作用, 对超氧自由基(·O2-) 和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼( DPPH·)均有一定的清除能力, 尤其对DPPH·的清除能力更强, 且清除能力随浓度的升高而提高. 相似文献
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以秀丽隐杆线虫作模式生物, 研究水溶性人参皂苷成分对线虫的寿命、 产卵和运动等生命活动的影响. 结果表明: 质量浓度为200 μg/mL的人参皂苷可使线虫寿命延长, 减缓衰老; 质量浓度为500 μg/mL的人参皂苷则对线虫具有一定的毒性作用. 相似文献
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将构建成功的丝瓜ACC合成酶cDNA的重组质粒, 转化为大肠杆菌BL21(DE3), 经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后得到特异性高效表达, 表达蛋白以包涵体形式存在. 包涵体经洗涤和Zn2+螯合柱层析, 得到纯化蛋白. SDS-PAGE显示纯化蛋白分子量为55 000的单一蛋白带. 经活性分析, 该酶最适pH值为8.5, 米氏常数(Km)为44.2 μmol/L. 相似文献
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建立了超高效液相色谱串联质谱仪(UPLC-MS/MS)检测酶促反应体系中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)浓度变化,快速筛选3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)抑制剂的方法。优化了HMGCR酶促反应体系和检测NADPH的色谱-质谱条件,探讨了NADPH的离子化试剂的作用和质谱碎裂机理。采用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以三乙胺/六氟异丙醇缓冲液(pH=8.0)为流动相,流速0.3 mL/min,柱温30℃,电喷雾离子源-多反应监测模式,对酶促反应体系中的NADPH进行分析。NADPH的峰面积与其浓度在0.05~50μmol/L范围内呈良好的线性关系(r>0.9996),定量限(S/N=10)为0.05μmol/L。 相似文献