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bFGF真核表达载体构建及表达 总被引:3,自引:0,他引:3
旨在构建可在哺乳细胞中表达碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast Growth Factor,简称bFGF)的真核表达载体,以便用于研究bFGF基因治疗在骨组织工程中的应用,应用基因重组技术,将已经克隆的bFGF基因从PBR322-bFGF载体上亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1上,构建的重组质粒经脂质体介导转染3T3细胞,36h后观察瞬时表达情况,酶切,PCR和DNA测序结果均证实了插入片段的正确性,免疫组织化学检测bFGF的表达分泌情况,结果显示部分经转染的细胞呈阳性(棕色颗粒)。结果表明已成功构建了bFGF真核表达载体pcDNA3.1-bFGF,并且bFGF能够在3T3细胞表达。 相似文献
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克隆hCbfa1的cDNA基因,构建其重组腺病毒载体,以用于研究hCbfa1腺病毒载体在人造骨移植中的作用.将hCbfa1的cDNA目的片段插入腺病毒柯氏质粒PAxCAwt中,再将此质粒与腺病毒DNA末端蛋白复合物共转染293个细胞,通过同源重组构建hCbfa1重组腺病毒载体.重组得到的阳性克隆经酶切、测序鉴定正确,包装纯化后,检测得病毒滴度为2×109PFU/mL,从而成功地构建了hCbfa1重组腺病毒载体,为下一步应用到人造骨移植的转基因治疗打下了基础. 相似文献
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