基因工程重组人乳头瘤病毒亚基因致癌的分子生物学及超微结构研究

我们用基因分子生物学结合超微结构的方法在318例人宫颈癌标本中证明人乳头瘤病毒16型(HPV-16)与中国妇女宫颈癌的发生关系密切。它的亚基因片段,E_6-E_7早期基因可能是HPV-16的致癌基因。本文采用近年来开始发展起来的基因工程方法,将HPV-16的全部早期区基因及E_6-E_7基因分别重组至逆转录病毒(小鼠白血病病毒)的基因组中,将比重组的逆转录病毒导入培养细胞,在细胞中大量牛成并释放病毒颗粒到培养液中(此细胞称为重组病毒生成细胞)。借助重组病毒感染方式介导基因转移进行体外转化研究。采用重组逆转录病毒感染方式研究属于DNA病毒的HPV-16的致癌潜能,国内外尚未见报道。我们证明它是目前体外研究转化功能效率最高,最稳定的方法。     

人宫颈及外阴湿疣的病理及人乳头瘤病毒的形态发生学

1)经临床及病理诊断的十六例人生殖道湿疣标本(14例取自宫颈,2例取自外阴)在电镜下显示当人乳头瘤病毒(HPV)感染的早期,鳞状上皮的基底及副基底层明显增生,核大而圆,常染质色丰富并出现多量的“染色质之间颗粒”“染色质周围颗粒”及“核体(nuclear bodies)”,分裂像很多。这是产生乳头状或扁平“疣”的病理基础,在以往文献中未引起足够重视。2)细胞被HPV感染的早、中期,胞质及核内逐渐出现由电子致密度高的均匀基质组成的团块,呈圆或椭圆形,边缘大部清晰。这种致密基质团盐随病变的发展逐渐增大互相融合,形成胞质内核周巨大的基质     

人宫颈癌与人乳头瘤病毒关系的超微结构与病毒基因分子检测的对比研究

1)经临床及病理诊断的136例官颈鳞癌;24例官颈炎;8例正常官颈鳞状上皮,取自三个不同地区——新疆,北京和湖北。从以上标本提取DNA供核酸杂交用。以32~P-dTTP进行标记的HPV-6B,11,16,18的质粒DNA作为探针,与上述宫颈癌,宫颈炎及正常宫颈上皮DNA进行斑点核酸杂交。部分进行Southern blot杂交和双向电泳。结果表明136例癌中76例的DNA中可检测到HPV-16 DNA的相关序列(56％),並有明显的地区差异——新疆的阳性率为82％(19/23),北京65.3％(32/49),湖北39％(25/64),八例正常宫颈均为阴性。Southern blot杂交及双向电泳表明病毒DNA整合入癌细胞基因之     

人宫颈癌与人乳头瘤病毒关系的基因

人宫颈癌与人乳头瘤病毒(HPV)的关系是当今国际重视的研究课题之一。在我国有关研究鲜有报道。本文在国内五个地区(新疆、北京、湖北、黑龙江,贵州)共获得经病理学确诊的人宫颈鳞状上皮癌318例,宫颈上皮内新生物(CIN)14例,宫颈及外阴湿疣48例,慢性宫颈类34例及正常宫颈上皮组织24例。将上述组织提取DNA后,以~(32)p标记的HPV-11,16,18三型病毒DNA为探针与上述组织进行核酸杂交,其中32例宫颈癌10例正常宫颈及27例宫颈及外阴湿疣还进行平行的电子显微镜对比研