绿色荧光蛋白为传能对的供体光漂白法测定FRET效率的探讨

探讨以两种新荧光蛋白MiCy,mKo为传能对并应用供体光漂白法测量荧光共振能量转移(FRET)效率.首先通过基因工程方法表达纯化了这两种蛋白,并测量了荧光光谱及光漂白性质,表明MiCy极易光漂白而mKo抗光漂白.进一步以Ni-NTA-agarose为FRET模型,在Confocal上对MiCy进行光漂白时间常数的测量,并计算了FRET效率.结果表明MiCy-mKo传能对适合用供体光漂白法测量FRET效率,此传能对将在蛋白质相互作用研究中有广泛应用.     

荧光蛋白MiCy、Citrine作为FRET传能对的研究

探索了2种新型荧光蛋白MiCy、Citrine作为荧光共振能量转移技术(FRET)传能对的可能性.首先通过基因工程方法表达纯化了这2种蛋白,并对其进行了光谱学研究,由于MiCy具有高的量子产率,且MiCy与Citrine的光谱重叠积分J较大,计算表明MiCy与Citrine的Forster距离为R0=5.81 nm,比CFP-YFP的大(R0=5 nm).进一步以Ni2+-NTA-agarose为FRET模型,结果表明:无论在荧光分光光度计还是在激光共聚焦显微镜上,都可以明显地检测到MiCy与Citrine的能量转移.由于二者较文献报道的其它FRET对具有更大的Forster距离,而且更适合以激光作为激发光进行测量,因此该FRET对应有更加广泛的应用前景.     

51KD精子膜抗原在精子的表达

本文应用免疫金标记法,对抗５１ＫＤ 精子膜抗原的抗精子抗体在精子的定位进行了超微结构观察。结果显示５１ＫＤ精子抗原定位于精子顶体后区,提示此抗体可能与不育有较密度的关系。５１ＫＤ抗原是否为一种新的与不育相关的精子抗原,有待进一步研究证实。     

毛细胞白血病的电镜诊断

本文报道了７例毛细胞白血病瘤细胞的超微结构，并与慢性淋巴细胞白血病（４例）做了比较。结果表明，毛细胞白血病依其淋巴细胞表面突起的不同，分二型，微绒毛型，突起直径０．１μｍ长约０．７μｍ，毛发分枝型，突起长达１．５～３μｍ，且有分枝，讨论了电镜在毛细胞白血病鉴别诊断中的作用。     

钙调素与重金属Pb2+结合反应的方波极谱与循环伏安法研究

采用方波极谱法研究了重金属Pb2+与钙调素(CaM)的结合反应, 直接检测到Pb2+-CaM配合物的存在, 并进一步利用循环伏安法研究了Pb2+-CaM的电极反应. 在pH=6.5时, 用方波极谱法在Pb2+-CaM体系中检测出2个还原峰, 峰电位分别为-0.44~-0.47 V和-0.73~-0.77 V, 说明在Pb2+-CaM体系中铅有2种存在形式, -0.44~-0.47 V的还原峰对应于游离态Pb2+, 电位更负的还原峰对应于配合物[Pb2+-CaM]. 2个还原峰的峰电流均随着cPb2+/cCaM比值增大而增大; 至cPb2+/cCaM≥10后, 配合物[Pb2+-CaM]的峰电流基本不再变化, 而游离态Pb2+的峰电流则继续增大. 利用极谱滴定曲线的拐点可判断出Pb2+在CaM中有10个结合位点. 进一步的测量结果表明, 循环伏安曲线出现游离态Pb2+的氧化峰和还原峰, 而络合态的[Pb2+-CaM]只有其还原峰, 反向电压扫描时不出现阳极波, 即没有相对应的氧化峰出现.     

用SKILL语言实现PCB的原理图还原

目前市场上的EDA工具均只支持由原理图到网表的正向设计。介绍了自行开发的一种原理图还原系统，作用是根据原理图的网表，自动还原出PCB的原理图。具体是通过SKILL语言在EDA工具Coneept HDL平台上二次开发实现的。     

高效液相色谱法测定椰油醇酰胺类表面活性剂中 N-亚硝基二乙醇胺的含量

采用高效液相色谱-紫外检测器测定椰油酸单乙醇酰胺和椰油酸二乙醇酰胺中的N-亚硝基二乙醇胺的含量。称取样品0.100 0g,用甲醇(8+2)溶液溶解并定容至10.0 mL,超声10min,经0.45μm微孔滤膜过滤后,滤液供高效液相色谱分析。以Diamonsil C_(18)硅胶键合相色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)为固定相,以不同比例的甲醇-水体系为流动相进行梯度洗脱,采用紫外检测器在波长233nm处进行测定。N-亚硝基二乙醇胺的质量浓度在0.05～25.00mg·L~(-1)内与其峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)和测定下限(10S/N)分别为15,48μg·L~(-1)。加标回收率在94.5%～98.5%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)在3.8%～5.9%之间。