骨骼肌收缩潜伏期内肌浆网结构的毫秒级变化研究

采用低温冷冻技术、计算机控制的毫秒级实时处理技术对潜伏期内骨骼肌结构变化时进行固定 ,以观察骨骼肌肌浆网、Ｔ 管在收缩潜伏期内超微结构的时相—形态变化。该项研究为最终解决骨骼肌兴奋收缩偶联发生时 ,其肌浆网内Ｃａ2 + 的释放机制问题 ,提供形态学上的证明。材料与方法从蟾蜍大腿部分离出长约 1 5ｃｍ ,宽约 2ｍｍ腓肠肌组织。将取下的肌组织放入任氏液中静息约10ｍｉｎ ,待其松弛 (静息时间不能超过 4 0ｍｉｎ ,否则收缩功能减弱 )。将银丝微电极仔细的插入静息后的骨骼肌两端 ,然后小心的将其放在经过我们改装后的Ｒｅｉｃｈｅ…     

生物细胞氧化应激模型探讨

缺血再灌注、药物代谢、金属中毒等使体内促氧化剂 :过氧化氢 ( H2 O2 )、超氧阴离子 ( O　·2 )、羟自由基 ( OH· )等自由基的大量形成 ,使机体氧化与抗氧化系统失去平衡 ,引生物细胞氧化应激 ,导致蛋白、脂质的过氧化 ,目前已知铁盐或 Fe2 + 可催化体内最强促氧化剂 OH· (羟自由基 )的大量形成 ,如 O　·2 + H2 O2 OH· + O2 ,H2 O2 + Fe2 + Fe3+ + OH- + OH· 。而且 H2 O2 易发生均裂形成 OH· 。促氧化剂 H2 O2 除自身具有氧化作用外其过量产生 ,可导致 OH· 的大量形成进而加剧蛋白质及脂质的氧化损伤。经多次实验结果…     

小鼠胚胎整合素β1受体表达的免疫电镜观察

生殖机理的研究是人类长期关注的重要课题，受精、胚胎着床、生长发育是多因数、多步骤的复杂过程，其分子机理尚不完全清楚。目前认为与激素、细胞免疫、细胞因子、整合素等综合因数有关。目前整合素在细胞黏附、受精、着床、发育生殖过程中的重要作用已经逐步得到人们的肯定。研究整合素表达与胚胎细胞表达的关系，对受孕机理的研究具有重要的临床意义。     

纳米金棒诱导A549细胞产生自噬的机制研究

纳米金棒(AuNRs)具有众多独特的属性,已广泛运用于生物医学领域,但其是否具有潜在的生物危害尚有争议.作者运用了激光扫描共聚焦显微镜技术、western blotting技术和其他分子生物学方法从细胞氧化应激的角度探讨了AuNRs诱导A549细胞产生自噬的分子机制.研究结果表明,4μg·mL-1的AuNRs处理6 h能够诱导A549细胞自噬标志蛋白LC3-Ⅱ表达增加,LC3蛋白从细胞核转移至细胞质并形成自噬小泡.进一步研究发现,AuNRs能够降低A549细胞线粒体膜电位、ATP含量、UCP2蛋白表达水平以及细胞抗氧化能力并导致活性氧蓄积,后者可能最终引起细胞产生自噬.而10 mmol·L-1抗氧化剂NAC能够逆转上述线粒体及细胞功能的改变,并抑制自噬的发生.这一研究为深入认识其生物危害及可能机制提供了有力的实验证据.     

计算机控制的电刺激-超低温快速冷冻固定同步的研究

本文报道了以红外线技术和计算机控制的电刺激 -超低温快速冷冻固定同步技术 ,研究骨骼肌组织被电刺激后 ,与骨骼肌组织的生理变化 (即兴奋 -收缩偶联发生的瞬间 )同步 ,在骨骼肌组织结构发生变化的同时 ,对其超低温快速冷冻固定 ,从毫秒级变化的水平获得骨骼肌组织在兴奋-收缩偶联发生时的细胞超微结构形态变化。材料与方法　双向红外探测器由两对透射型红外光电开关管及相应的信号处理及脉冲整形输出线路构成。透射型红外光电开关管的响应时间小于 1 0 μs,可满足毫秒级分析要求。脉冲整形输出线路将透射型红外光电开关管接收的信号转换成…     

Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响

目的:探讨Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响.方法:本实验以AAV-9为载体构建心肌特异性PS1-shRNA重组腺相关病毒,通过尾静脉注射PS1-shRNA重组腺相关病毒干扰大鼠心肌组织中Presenilin1基因的表达,并利用激光扫描共聚焦显微镜检测并记录心肌细胞肌浆网钙容量及舒张期自发钙释放事件的变化;同时,采用western blot技术分析各组大鼠心肌组织中雷诺丁受体及钙泵表达水平的改变.结果:与对照组相比,PS1-shRNA重组腺相关病毒干预组大鼠心肌细胞肌浆网钙容量显著降低,自发钙释放事件明显增加;雷诺丁受体表达水平略降低,钙泵表达水平无显著性变化.结论:Presenilin1基因表达水平降低会引起心肌细胞钙泄漏,从而造成心肌细胞肌浆网钙容量降低.     

心力衰竭时大鼠心肌细胞肌浆网钙回摄的变化

目的：探讨心力衰竭时心肌细胞肌浆网钙回摄异常的机制。方法：结扎大鼠冠状动脉左前降支制备慢性心衰模型。4周后采用酶解法分离假手术组和心衰组大鼠心室肌细胞,利用激光扫描共聚焦显微镜检测心肌细胞肌浆网钙含量。采用western?blot技术检测心肌细胞肌浆网钙调蛋白SERCA2a、PLN、PP1的表达水平。结果：心衰组的大鼠心肌细胞荧光强度小于假手术组,并且心衰组大鼠心肌细胞咖啡因诱导的钙瞬变也低于假手术组;心衰组大鼠心SERCA2a表达水平降低,PP1的水平升高,PLN总体水平不变,但磷酸化的PLN水平降低。结论：钙泵表达量下降和钙泵活性降低是心力衰竭时心肌细胞肌浆网钙回摄减少的主要原因。     

骨骼肌兴奋收缩偶联时钙诱导钙释放机理的研究

近年来 ,国外学者由生理学实验发现 ,在骨骼肌兴奋 -收缩偶联过程中 ,不仅存在 DCT假说 ,还存在钙诱导钙释放 ( Calcium Induced Calcium Release,简称 CICR)假说 (该假说一般用于解释心肌兴奋 -收缩偶联时 ,肌浆网内的 Ca2 + 释放机理 )。但因肌组织 (包括骨骼肌与心肌 )兴奋 -收缩偶联发生时的变化时间极快 ,达到毫秒级水平 ,因此目前常规化学固定 (固定时间以分钟计 )制样法无法保留肌组织兴奋 -收缩偶联发生瞬间时的超微结构形态及离子 (包括 Ca2 + ,Na+ ,K+ 等 )浓度的变化。我们采用双向红外线探测器 -计算机控制的电刺激与超低…     

CGP37157对静息期心肌细胞钙循环的影响

目的：研究离子通道阻断剂CGP37157对成年大鼠静息期心肌细胞钙循环的影响。方法：（1）32只雄性SD大鼠随机等分为4组,用于测定心肌组织中cAMP的含量。对照组不灌流CGP37157,实验组分3个时间梯度：用10μmol/L CGP37157灌流心脏15 min、30 min和60 min;（2）20只雄性SD大鼠随机均分为两组,对照组和实验组（细胞池中加入10μmol/L CGP37157）采用常规酶解法分离心肌细胞,激光扫描共聚焦显微镜记录钙瞬变;利用SPSS11.5统计软件进行数据处理,所有数据以均数±标准差（x珋±SD）表示,两组间均数的比较采用t检验。P〈0.05为差异有统计学意义。结果：（1）心肌组织中cAMP含量的比较：CGP37157引起心肌组织cAMP的含量显著增加（n=8,P〈0.05）,对照组、15 min、30 min和60 min各组测得的cAMP的含量分别为（791±35）pmol/g、（1 101±55）pmol/g、（1 525±40）pmol/g、（2 017±60）pmol/g;60 min组较30 min组cAMP含量显著增加（n=8,P〈0.05）;（2）对静息期肌浆网钙循环的影响：实验组钙存储改变量（20.2±0.8）显著高于对照组（0.3±0.3;n=10,P〈0.01）;实验组钙释放速率变化（5.02±0.015）比对照组显著增大（1.01±0.006;n=10,P〈0.01）;实验组钙回摄速率变化（1.08±0.15）与对照组没有差异（0.99±0.09;n=10,P〉0.05）。结论：CGP37157导致静息期心肌细胞钙循环的异常,原因可能为其导致PKA通路异常。     

手持式气象传感器现场测量仪的开发

目前,我国主流自动气象站主要有CAWS600系列、ZQZ-F、DZZ2、Milos500、DYYZ等。野外现场对传感器工作状态的快速判断直接影响气象站的维护效率。气象传感器输出的电信号类型多,包括电压、电流、格雷码、脉冲、电阻等。针对目前气象传感器测量仪器的不足,提出一种手持式气象传感器测量仪,采用便携式结构,锂电池供电,低功耗处理器作为主控,结合CPLD和信号调理电路,能同时实现温度、湿度、风速、风向、雨量、辐射、蒸发、气压等气象传感器的输出测量。根据现场气象条件和测量结果,完成对传感器工作状态的判断。为气象装备保障人员赴野外现场维护和检修提供一种仪器手段。