基因工程重组人乳头瘤病毒亚基因致癌的分子生物学及超微结构研究

我们用基因分子生物学结合超微结构的方法在318例人宫颈癌标本中证明人乳头瘤病毒16型(HPV-16)与中国妇女宫颈癌的发生关系密切。它的亚基因片段,E_6-E_7早期基因可能是HPV-16的致癌基因。本文采用近年来开始发展起来的基因工程方法,将HPV-16的全部早期区基因及E_6-E_7基因分别重组至逆转录病毒(小鼠白血病病毒)的基因组中,将比重组的逆转录病毒导入培养细胞,在细胞中大量牛成并释放病毒颗粒到培养液中(此细胞称为重组病毒生成细胞)。借助重组病毒感染方式介导基因转移进行体外转化研究。采用重组逆转录病毒感染方式研究属于DNA病毒的HPV-16的致癌潜能,国内外尚未见报道。我们证明它是目前体外研究转化功能效率最高,最稳定的方法。     

人宫颈及外阴湿疣的病理及人乳头瘤病毒的形态发生学

1)经临床及病理诊断的十六例人生殖道湿疣标本(14例取自宫颈,2例取自外阴)在电镜下显示当人乳头瘤病毒(HPV)感染的早期,鳞状上皮的基底及副基底层明显增生,核大而圆,常染质色丰富并出现多量的“染色质之间颗粒”“染色质周围颗粒”及“核体(nuclear bodies)”,分裂像很多。这是产生乳头状或扁平“疣”的病理基础,在以往文献中未引起足够重视。2)细胞被HPV感染的早、中期,胞质及核内逐渐出现由电子致密度高的均匀基质组成的团块,呈圆或椭圆形,边缘大部清晰。这种致密基质团盐随病变的发展逐渐增大互相融合,形成胞质内核周巨大的基质     

人宫颈癌与人乳头瘤病毒关系的超微结构与病毒基因分子检测的对比研究

1)经临床及病理诊断的136例官颈鳞癌;24例官颈炎;8例正常官颈鳞状上皮,取自三个不同地区——新疆,北京和湖北。从以上标本提取DNA供核酸杂交用。以32~P-dTTP进行标记的HPV-6B,11,16,18的质粒DNA作为探针,与上述宫颈癌,宫颈炎及正常宫颈上皮DNA进行斑点核酸杂交。部分进行Southern blot杂交和双向电泳。结果表明136例癌中76例的DNA中可检测到HPV-16 DNA的相关序列(56％),並有明显的地区差异——新疆的阳性率为82％(19/23),北京65.3％(32/49),湖北39％(25/64),八例正常宫颈均为阴性。Southern blot杂交及双向电泳表明病毒DNA整合入癌细胞基因之     

质粒PSM703的电子显微镜研究

质粒PSM703是腺病毒相关病毒Adeno-associated Virus(AAV)DNA与质粒PBR322Pst_1切点重组产生的一种新质粒。Kozot,F.J.曾报告过在AAV DNA中含有一个反向的末端重复顺序,至于重组质粒PSM 703是否含有AAV的整个基因组尚不十分清楚,有待本研究予以证实。将带有质粒PSM 703的大肠杆菌E.Coli HB101在含有0.2％葡萄糖和25mg/L四环素的LB培养基中培养。收集大肠杆菌,用1.7％溶菌酶和0.1％Triton-X-100裂介,低速离心,取上清经氯化铯梯度离心,收集PSM703区带,用异戊醇提取三次,去除溴乙啶,乙醇沉淀,沉淀物再经过饱和酚、氯仿和异戊醇提取,乙醇沉     

压气机插板式进气畸变实验研究

进气畸变同压气机之间的相互作用机制一直是进气道/发动机一体化设计的重点。本文在一台低速轴流压气机上进行了插板畸变实验,研究了插板畸变对压气机性能和稳定性的影响。实验发现:轴向速度畸变和周向速度畸变是影响压气机性能的主要因素;当转子叶片离开畸变区时,其载荷最大,易产生较大的流动分离,当转子叶片刚进入畸变区时,其后的静子叶片叶根易出现流动分离。同时发现插板进气畸变条件下的压气机失速机理与均匀进气条件下压气机失速机理差别很大,并提出一个压气机失速模型去描述插板畸变条件下压气机失速的三个阶段。