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用一种基激复合物荧光探针系统来签别碱基错配的CYP2C9*3基因,该系统选择两个分开的与靶点碱基相对应的12碱基荧光标记的寡核苷酸作为探针,分别对24碱基、47碱基、质粒(3165bp)的靶点CYP2C9基因和CYP2C9*3基因进行杂交配对,结果该基激复合物荧光探针系统能有效签别各种长度的CYP2C9基因和CYP2C9*3基因,背景干扰很低,灵敏度高,可尝试用于其他基因型的遗传多态性的签别。 相似文献
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研究目的是拓展基激复合物荧光探针方法在检测指定序列DNA中的应用。实验选择细胞色素P450 CYP2C9基因中容易发生突变的包含24个碱基的基因片段作为靶点DNA,选择两个分开的与靶点碱基相对应的包含12碱基的寡核苷酸作为探针,将荧光集团连接到探针末端3′或5′磷酸基上形成荧光探针,两个荧光探针与靶点DNA杂交后自动装备基激复合物荧光系统,实验考察芘的新衍生物与不同荧光团配对、荧光团连接不同位置、不同激发波长对基激复合物形成及发射光谱的影响,芘的新衍生物探针形成的基激复合物在505 nm的特征发射光谱最强,伴随着单体荧光的猝灭和大约120~130 nm的Stokes位移,大大减少了DNA检测过程中的背景干扰,灵敏度高,而且这对荧光物质形成的基激复合物对所处的空间位置及微环境非常敏感,可尝试用于基因遗传多态性的识别。 相似文献
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甘草多糖超声提取工艺及数学模拟 总被引:6,自引:0,他引:6
甘草为豆科植物,甘草(Glycyrrhiza)的根及根状茎为常用中药[1],甘草多糖(g1ycyrrhiziapolysaccharide,GPS)是甘草重要的活性成分之一,具有明显的抗病毒和抗肿瘤作用[2~4]。自1964年Revers发表甘草提取物可医治胃溃疡以来,各国学者对甘草化学成分提取研究十分活跃,但多数只注重三萜类化合物和黄酮类化合物的提取[5~7],而提取GPS的研究较少[8,9]。超声技术用于植物有效成分的提取具有明显的优势,此技术可以大幅度地提高有效成分的提取率,提高工作效率,节省溶剂,简化提取操作,在天然药物有效成分提取中具有良好的应用前景[10]。本文以甘草为原料,采用超声法对甘草中GPS的提取方法进行了研究,获得了优化的超声提取条件,建立了甘草多糖的超声提取的数学模型,对进一步优化操作条件具有重要意义。仪器、试剂及原料:KQ250DB型超声波清洗仪(昆山市超声波仪器有限责任公司);UV4060紫外分光光度计(AmershamPharmaciaBiotech,瑞典);Virtissentry8SL型冷冻干燥机(TheVirtisCompanyGardiner,美国)。葡萄糖、浓硫酸均为分... 相似文献
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改变检测波长高效液相色谱法测定喜树碱和羟基喜树碱的含量 总被引:10,自引:0,他引:10
建立了改变检测波长测定喜树种子中喜树碱和 10 羟基喜树碱的高效液相色谱法。使用TechspheseODSC18(4.6mm× 2 5cm ,5 μm)色谱柱 ,以水∶乙腈 =3∶7(V/V)为流动相 ,流速为 1.0mL/min ,2 5℃下检测。检测波长 :0~ 8min时为 2 6 6nm ,8~ 2 0min时为 2 5 4nm。结果表明 :喜树碱的平均回收率为 10 0 .92 % ,RSD值 1.4 0 % ;羟基喜树碱的平均回收率为 10 0 .0 9% ,RSD值 1.34%。此方法简单、可靠。 相似文献
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