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异硫氰酸荧光素标记抗体的固体基质室温磷光性质研究 总被引:5,自引:0,他引:5
研究了异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人抗体(GAHAb-FITC)和兔抗羊抗体9RAGAb-FITC),及其以三种免疫方式与人免疫球蛋白(IgG)反应所得免疫复合物在多种固体薄膜基质上发射室温磷光(RTP)的适宜条件及其光谱,强度和寿命等性质。研究发现,标记抗体及其免疫复合物保留了FITC优良的固体基质室温磷光性质,λ m0643em^(max)=525/650nm,其RTP强度与其浓度线性相关,并有很高的灵敏度,更为重要的是,免疫反应及其RTP检测能结合于同一基质,方便地相继完成,在聚酰胺膜(PM)上,以Pb(Ac)2为重原子微扰剂,稀释比为1:10(ψ)的GAHAb-FITC,RAGAb-FITC及其与人IgG形成的免疫复合物均能发射较强制 RTP信号并有较长的RTP寿命,本结果为建立相应的固体基质室温磷光免疫分析(SS-RTP-IA)新方法奠定了相应的实验基础。 相似文献
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在聚酰胺膜(PM)等固体基质上,人免疫球蛋白(IgG)能与异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人抗体(GAHAb^*)发生定量的特异性免疫反应,并保持了FITC优良的室温磷光特性,据此建立了固体基质室温磷光免疫分析(SS-RTP-IA)测定人血清中人IgG的新方法。在0.4μL(取样浓度为1.56-50ng/mL)点样体积内,人IgG的含量在0.624-20pg范围内,与室温磷光强度呈良好的线性关系。工作曲线的回归方程△Ip=31.4 46.2lg[c(Ag)/pg],n=6。相关系数r=0.999,检出限0.32pg。用于正常人血清中人IgG含量的测定,加标回收率为96%-104%,结果满意。 相似文献
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