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CRISPR-Cas12a系统的反式切割活性在其识别特定的DNA激活序列后被激活,这不仅能实现特定DNA靶标的直接定量分析,同时也为构建针对多种生物标志物的体外传感体系带来了新的思路。然而,已有文献中所采用的双链DNA(dsDNA)和单链DNA(ssDNA)激活序列结构多种多样,缺乏全面、系统的设计指导原则。针对该问题,该文系统研究了不同结构的DNA激活序列对LbaCas12a反式切割活性的影响。通过对比研究,得出以下结论:(1)前间区序列邻近基序(PAM)位点有助于LbaCas12a更高效地靶向结合dsDNA激活序列和ssDNA激活序列;(2)PAM近端区域缺少序列片段会降低Cas12a-crRNA定位激活序列的效率;(3)删除PAM远端序列片段有利于增强LbaCas12a的反式切割活性;(4)由于省略了dsDNA解链过程,ssDNA激活序列在激活LbaCas12a的反式切割活性方面普遍比dsDNA激活序列产生的效果更好。根据这些发现,该文提出了一种LbaCas12a所青睐的高效激活序列结构,其激活的LbaCas2a反式酶切活性较采用含PAM位点的标准dsDNA激活序列高出3.7倍。研究结果为构建基于CRISPR-Cas12a的高效体外生物传感系统提供了重要支撑。 相似文献
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聚氧硫杂蒽树脂固化特性及其动力学的研究 总被引:12,自引:0,他引:12
以DSC、TG等技术手段研究了聚氧硫杂蒽树脂 (POSPF)的固化特性及其动力学 .结果表明 ,用六次甲基四胺 间二氯苄作固化剂 ,加热至 10 5~ 2 2 5℃能使POSPF树脂固化 ,在固化过程树脂中的活性羟甲基和固化剂参与反应生成亚甲基桥从而形成网状体型结构 ;动态DSC曲线上出现宽的固化放热峰 ,用T β外推法确定其凝胶温度Ti=10 0 0℃、固化温度Tp=181 5℃、后固化温度Tf=2 2 5 7℃ .固化后树脂具有优良的耐热性 ,失重 5 %时热分解温度高达 4 0 3℃ . 相似文献
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毛细管区带电泳法测定抗病毒口服液中连翘苷和梓醇含量 总被引:1,自引:0,他引:1
1 引 言抗病毒口服液是治疗病毒性疾患的口服制剂 ,具有清热祛湿 ,凉血解毒的功能。由于成分复杂 ,采用HPLC法分析时样品前处理繁琐。本文采用高效毛细管电泳法 (HPCE)对抗病毒口服液中连翘苷和梓醇进行了定量分析。该法分离效率高 ,操作便捷 ,经济实用。2 实验部分2 1 仪器和试剂 VUV 2 0毛细管电泳紫外检测器 (美国HyperQuan公司 ) ;日立 6 5 5 15液相泵和日立 6 5 5 16可变波长紫外检测器。数据由江申工作站记录 (大连江申分离科学公司 )。石英毛细管 (河北永年光纤厂 ) 6 5cm× 75 μmi.d .,有效长… 相似文献
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双邻位甲基取代的聚芳醚酮合成与表征 总被引:3,自引:0,他引:3
两种单体 2 ,2′ ,6 ,6′ 四甲基 4 ,4′ 二苯氧基二苯酮 (o M2 DPOBP)和 2 ,2′ ,6 ,6′ 四甲基 4 ,4′ 二苯氧基三苯二酮 (o M2 DPOTPDK) ,分别与对苯二甲酰氯 (TPC)和间苯二甲酰氯 (IPC)低温亲电溶液缩聚 ,合成了 4种含双邻位甲基侧基聚醚酮醚酮酮 (DM PEKEKK和DM PEKEKMK)及含双邻位甲基侧基聚醚酮酮醚酮酮 (DM PEKKEKK和DM PEKKEKMK)聚合物 .用FT IR、1 H NMR、DSC、TGA、WAXD等方法对聚合物进行了表征 ,研究了聚合物的溶解性能 .结果表明 ,该 4种聚合物具有较高的玻璃化转变温度 ,良好的热稳定性和优良的溶解性能 . 相似文献
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离子色谱法测定液体乳制品中硫氰酸盐 总被引:2,自引:0,他引:2
提出了离子色谱法测定液体乳中硫氰酸盐的方法。鲜奶或酸奶样品经乙腈提取和C18固相萃取柱净化后,再经Ion Pac AG11-HG保护柱及Dionex ICS-3000分离柱分离,由70 mmol.L-1氢氧化钾溶液洗脱,利用电导检测器检测。硫氰酸盐的质量浓度在0.20~10.0 mg.L-1范围内呈线性,方法的检出限(3S/N)为0.08 mg.L-1。方法用于鲜奶和酸奶样品分析,回收率在92.5%~104.5%之间,相对标准偏差(n=6)小于4.5%。 相似文献
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利用凸函数证明不等式时.构造辅助函数是关键.通过典型例题。阐述在证明三种形式的不等式时构造辅助函数的常用方法. 相似文献
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“国培计划(2012)—示范性项目”采取集中培训和远程培训相结合方式对各省(区、市)中小学骨干教师、幼儿园、特殊教育、紧缺薄弱学科教师和培训者进行示范性培训。“国培计划(2012)-示范性集中培训项目”初中化学班是江西师范大学承担的国培项目之一。针对来自福建、广东、广西、贵州、海南、湖南、江西、上海、四川、云南和重庆等11个省、市的近50位初中化学骨干教师的调查,介绍了教师教研素质、学校教研活动和学校教研评价制度,提出要加强初中化学教师的教研行动力,加强初中学校教研组建设,营造良好化学教研活动氛围。 相似文献