植物乳杆菌WLPL04的荧光标记及其表征

植物乳杆菌WLPL04源自健康母乳,能在肠道定植。对植物乳杆菌WLPL04进行荧光标记,为研究其在体内的定植、移位及分布提供重要实验材料。以pMG36e为骨架,含3种不同启动子(P_X,P₂₃和P_ldh)的mCherry红色荧光蛋白基因作为标记基因,构建重组质粒pMG36e-P_X-mCherry、pMG36e-P₂₃-mCherry和pMG36e-P_ldh-mCherry,转化大肠杆菌,通过PCR、质粒DNA酶切、菌落颜色观察和激光共聚焦显微镜观察进行验证。验证构建成功后进一步将3种重组质粒分别导入植物乳杆菌WLPL04。结果显示导入质粒pMG36e-P_X-mCherry、pMG36e-P₂₃-mCherry的植物乳杆菌WLPL04,其菌体在激光共聚焦显微镜下均显示明显红色荧光;而导入pMG36e-P_ldh-mCherry的菌体其红色荧光较弱。此外,通过生长曲线和扫描电镜观察分析不同重组质粒对...