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As part of a multi-centre European project, FOOD-PCR, the feasibility of a novel approach for production of dried bacterial DNA that could be used as certified reference materials (CRM) was assessed. Selected strains of Salmonella typhimurium, Listeria monocytogenes, Escherichia coli O157, Campylobacter jejuni and Yersinia enterocolitica were used to produce genomic DNA (gDNA). These preparations gave support to method development for qualitative polymerase chain reaction (PCR) detection methods for food-borne pathogens. Purified gDNA was transformed into stable and dry gDNA by using polypropylene vials as carrier and applying a vacuum-drying technique. The gDNA preparations were shown to be sufficiently stable under ambient transport conditions without cooling and proved to have long-term stability at 5°C of at least 22 months. The dried DNA was easily reconstituted by addition of distilled water then gentle shaking. These studies have shown that production of stable and dry bacterial gDNA material is feasible and could help satisfy the increasing need for certified reference DNA positive control samples in the field of PCR testing for detection and verification of food-borne microbial pathogens.
相似文献Zusammenfassung In der vorliegenden Arbeit werden folgende Meßergebnisse mitgeteilt; MCD, elektronische Absorption, Einfluß eines äußeren schweren Atoms sowie Kristallfelddaten für den Bereich niedriger Energie (2 E g, 2 T 1g, 4 T 2g) und den Bereich hoher Energie (2 T 2g, 4 T 1g) von Cr(dtp)3, Cr(dtc)3 und Cr(exan). Bei niedriger Energie sind die MCD-Intensitäten von 2 E(2 E g) und 2 E(2 T 1g) genau so groß, oder größer als 4 T 2g, und die MCD-Technik bietet Vorteile gegenüber der elektronischen Absorptionsmethode. Die MCD-Werte von 2 E g und 2 T 1g sind für die genannten Moleküle etwa gleich ( 13 kK und 13,6 kK). 4 T 2g dieses Gebietes erscheint trigonal aufgespalten ( 500 cm–1) bei MCD von dtp, aber in einem geringeren Maß als im elektronischen Kristallspektrum von Lebedda und Palmer ( 600 cm–1) MCD löste solche Komponenten bei exan und dtc nicht auf. Der Bereich höherer Energie enthält 2 T 2g und 4 T 1g, und aus der Kombination von Daten der MCD-Methode sowie der elektronischen Absorption schlossen wir auf die Anordnung 2 A 1g(2 T 2g)<2 E(2 T 2g)<4 E(4 T 1g). Der möglicherweise nützliche Effekt eines äußeren schweren Atoms auf die in Lösung beobachteten elektronischen 2 E- und 4E-Banden von Cr(dtp)3 brachte bezüglich dieser Anordnung der E-Zustände nichts Neues. Weiterhin wird gefolgert, daß die Ordnung von 4 T 1g und 2 T 2g nicht aus O h-Kristallfeldberechnungen entschieden werden kann, da experimentelle Unsicherheiten bezüglich der Wahl von Schwerpunkten bestehen. Außerdem liegen 4 T 1g und 2 T 2g nahe zusammen, sodaß aus der Anordnung 2 E<4 E nicht notwendig 2 T 2g<4 T 1g folgt. Es kann jedoch gefolgert werden, daß das Verhältnis C/B4 nicht korrekt ist, während 7<(C/B)<8 konsistent mit den Daten aller drei Moleküle ist, da die B-parameter klein sind (0,4). Die Vokalisierung der OO-Übergänge könnten C/B und Dq etwas erniedrigen.
Presented in part at the 161st American Chemical Society National Meeting, Los Angeles, California, March–April, 1971.
NDEA Pre-Doctoral Fellow. 相似文献