心衰标志物可视化联合检测方法研究

基于夹心免疫原理和表面免疫吸附模型,采用Image Pro Plus软件对硅片表面磁颗粒分布图像进行定量化处理,建立了硅片表面心衰标志物可视化联合检测方法。研究表明,该方法从抗体包被到获得检测结果不超过1 ｈ,操作简单,在单张硅片上可实现心衰标志物NT-proBNP和cTnI的联合检测。NT-proBNP和cTnI的最低检出限分别为21.8 pg/mL和0.034 ng/mL,检测范围分别为21.8~40000 pg/mL和0.034~50 ng/mL。83例不同程度心血管疾病患者的血清样本的检测结果与商品化免疫分析仪检测结果一致,相关系数r>0.98。因此,该快速免疫检测方法可以满足临床检测心衰标志物的需要。     

快速检测心型脂肪酸结合蛋白的荧光免疫微流体测试卡

研制出一种以时间分辨荧光微球作为标记,自驱动快速检测H-FABP的荧光免疫微流体测试卡.利用激光切割法在双面胶上简便、快速地切割出所设计的微通道结构,并采用激光切割法制作出聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)测试卡底板及上盖.使用提拉涂膜的方法在PMMA底板表面修饰马来酸酐官能团,有效地解决了捕获抗体在PMMA表面的固定问题.使用等离子体处理测试卡上盖改善其亲水性,使液体能够在微通道内自行流动.使用此测试卡可以实现对心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的快速检测,线性检测范围为0.5～ 100 ng/mL,检出限为0.1 ng/mL(S/N=3),检测时间少于10 min,批内相对标准偏差(RSD) ＜10％,批间RSD＜15％.本方法具有灵敏度高、检测时间短、结果准确等优点,可以满足临床检测的需求,具有良好的应用前景.     

巨磁阻微流体免疫传感器快速定量检测D-二聚体

将巨磁阻(GMR)传感器集成在微流体通道中,以100 nm磁颗粒为信号探针,研制了可快速检测血栓标志物D-二聚体的免疫传感器.用GMR传感器在线检测免疫反应后被捕捉在芯片上的磁颗粒的信息,测定血浆中D-二聚体的含量.通过对反应条件的优化,建立了GMR微流体传感器检测血浆中D-二聚体的方法.本方法的线性检测范围为5～6500 ng/mL,检出限为5 ng/mL.批内相对标准偏差＜12％;批间相对标准偏差＜14％,具有良好的稳定性和重现性.本方法可在9 min内完成检测,临床血浆样本的测试结果与日本Sysmex公司的CA1500血凝仪测试结果一致,具有灵敏度高、检测时间短、检测结果准确等优点.