基于共轭聚电解质荧光恢复测定胰蛋白酶及其抑制剂

在1.0×10-5 mol·L-1共轭聚电解质(CPE)溶液中加入聚精氨酸(Arg6)溶液至其质量浓度达15mg·L-1,反应稳定后,CPE的荧光发生猝灭,猝灭程度达90%。加入不同浓度的胰蛋白酶(TPS)溶液反应,当TPS质量浓度达1mg·L-1时,该体系的荧光强度可恢复至原来的80%。基于上述以CPE作为荧光探针和TPS对CPE-Arg6反应体系的荧光恢复效应,可实现对CPS的实时、免标记检测,其检出限(3S/N)达0.1mg·L-1。在上述反应体系中,将CPS的质量浓度固定在1mg·L-1,然后加入不同浓度的胰蛋白酶抑制剂(TPSI)溶液,随TPSI浓度的增加,CPE的荧光恢复速率明显减慢,根据这一现象,实现了实时检测TPSI。