固相萃取-高效液相色谱法测定龙血竭含片中的龙血素A和B的含量

建立一种快速测定龙血竭含片中龙血素A、B两种有效成分的高效液相色谱(HPLC)方法。样品经甲醇超声提取,自制固相小柱净化富集,采用kromasil C18色谱柱(200×4.6mm,5μm)进行分离,以乙腈-0.1%乙酸溶液(37∶63,V/V)为流动相进行洗脱,检测波长为280nm。考察了不同流速、柱温和不同规格色谱柱对分离效果的影响,优化了实验条件。优化条件下,龙血竭含片中主要成分龙血素A、B均达到基线分离,龙血素A在0.1030~1.5450μg、龙血素B在0.0426~0.6390μg范围呈良好线性关系,相关系数r2均为1.0000,回收率为97.81%~101.77%,相对标准偏差(RSD)为0.3%~0.5%。该方法快速、准确,可满足实际检测需要。