美洲大蠊糖肽的分离纯化及免疫调节活性筛选

本文采用水提醇沉法提取美洲大蠊糖肽粗品(Periplaneta Americana glycopeptide, PAG),通过HP-20大孔树脂脱色处理PAG得脱色美洲大蠊糖肽(PAGW),DEAE-琼脂糖凝胶FF分离纯化PAGW继续得到六个组分。采用MTT法测定各个组分对巨噬细胞RAW264.7增殖能力的影响;苯酚-硫酸法及福林酚法测定PAGW中多糖和多肽的含量;PMP及OPA柱前衍生化法测定PAGW单糖和氨基酸的组成。结果显示：给药浓度范围内,PAG及PAGW随着浓度增加,均可显著升高RAW264.7的增殖活力,PAGW对其增殖率影响较好,经DEAE-琼脂糖凝胶FF洗脱的6个组分整体增殖率低。PAGW的多糖含量为21.24%,蛋白含量为76.35%,多糖由甘露糖、盐酸氨基葡萄糖等8种组成,其多肽由天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、等10种氨基酸组成。结果可为美洲大蠊糖肽免疫调节活性的深入研究提供参考。     

美洲大蠊抗肿瘤活性部位CII-3指纹图谱的建立及多成分含量测定

建立美洲大蠊抗肿瘤活性部位CII-3的HPLC指纹图谱及其核苷类成分的含量测定方法。采用Phenomenex Gemini C₁₈ 110A(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.01%甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱,测定16批供试品。采用“中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)”进行相似度评价,并对结果进行聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)。16批CII-3的HPLC指纹图谱中共有峰为16个,相似度介于0.870～0.982之间,HCA将CII-3分为3类,结合PCA、OPLS-DA分析筛选出3个导致批次间质量差异的标志物。指认出8种核苷类成分并测定了其含量,分别为胞嘧啶(0.50～1.17 mg·g^-1)、腺嘌呤(0.54～2.10 mg·g^-1)、鸟嘌呤(0.08～1.07 mg·g^-1)、黄嘌呤(0.74～4.67 mg·g^-1)、胸腺嘧啶(0.32～2.46 mg·g^-1)...