蛋白质分子待定模板印迹聚合物的合成及应用

提出了一种合成蛋白质分子印迹聚合物的新方法——待定模板印迹。即不使用任何标准蛋白质,在一个实际样品(鸡蛋清)的存在下合成了印迹聚合物。利用原位聚合法得到印迹整体柱及一根对比柱。比较鸡蛋清在两根柱子中的电泳分离,发现印迹聚合物整体柱能够保留高丰度组分。并观察到部分高丰度蛋白质的谱图信号降低或消失,同时出现新的谱峰,表明相同样品中的低丰度组分得到富集。这预示着研究分子印迹的新途径,即基于其内在复杂性(通过一系列样品本身的印迹聚合物)来分析复杂样品。     

待定模板印迹聚合物对高丰度鸡蛋清蛋白质的脱除

将鸡蛋清溶液作为“待定模板”制备分子印迹聚合物,得到的聚合物作为色谱固定相,显示出能脱除高丰度蛋白质的能力。采用不同浓度的鸡蛋清进行印迹,可以得到具有不同蛋白脱除性质的聚合物。经过实验室自制的注射器色谱系统处理,蛋清中的高丰度蛋白质(如鸡卵清蛋白、溶菌酶、转铁蛋白)可从相应样品溶液当中去除。随着这些高丰度蛋白质谱峰消失,其它组分的质谱信号变得更加明显。根据文献结果及实验所得质谱数据,判定这些蛋白质分别是卵清白蛋白关联蛋白、转铁蛋白关联蛋白质、卵粘蛋白及黄素蛋白。实验表明,待定模板印迹方法具有脱除高丰度蛋白质,并同时保留、富集低丰度修饰蛋白质的能力。