EFFECT OF nifA PRODUCT ON SUPPRESSION OF Nif~- PHENOTYPE OF gin MUTATION AND CONSTITUTIVE SYNTHESIS OF NITROGENASE IN Klebsiella pneumoniae

This paper describes the role of nifA product on the ammonia regulation of nitrogen fixation in K. pneumoniae. A plasmid carrying nifA gene under the promoter of tetracycline resistance gene was constructed. When this nifA carrying plasmid was introduced into a glnAG mutant, the Nif~-phenotype of this gln mutant was suppressed. Furthermore, when the plasmid was introduced into the wild type and glnAG mutant, derepression of nitrogenase synthesis in ammonia occurred in both strains and the products of nif genes can be detected by two-dimensional gel electrophoresis in the extracts of these ammonia-grown bacterial cells.The constitutive synthesis of nitrogenase in NH_4~ was also demonstrated in free living nitrogen-fixing bacteria, Enterobacter cloacae, when the bacteria received the plasmid carrying nifA gent from K. pneumoniae.     

基因nifA产物对肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)gln突变型的Nif~-表型的校正和固氮酶的组成型合成的作用

本文叙述固氮基因nifA对肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)固氮作用的氨调节的影响。首先建构一个带有基因nifA的重组质粒,使基因nifA处于四环素抗性基因启动子控制之下。当这个建构成的带有基因nifA的质粒引入谷氨酰胺合成酶基因glnAG的突变型后,这个突变型的Nif~-表型就得到校正。此外,当这个质粒引入野生型和gln突变型后,两者在氨存在下都发生固氮酶合成的去阻遏作用,并在双向凝胶电泳上可以检测出固氮基因产物的存在。同样地,当自生固氮菌阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)E26接受了这个重组质粒后也能观察到固氮酶的组成型合成。     

苜蓿根瘤菌多拷贝固氮基因启动子对根瘤发育的抑制

以荧光素酶基因作为报道基因研究苜蓿根瘤菌nif/fix基因在根瘤发育过程中的激活,发现多拷贝的nifHDK启动子和fixABCX启动子抑制根瘤的发育和固氮活性,与nifA突变型的表型相同.用β-半乳糖苷酶基因作为报道基因得到同样的结果。但是低拷贝的nifHDK启动子或fixABCX启动子对根瘤发育和固氮活性没有影响。固氮基因启动子的多拷贝抑制效应进一步说明nifA产物除了作为共生固氮基因转录的正调节因子外,对根瘤的发育也有作用。     

苜蓿根瘤菌(Rhizobium meliloti)nifA基因的异源表达及其产物的氧敏感性

当在土壤农杆菌、三叶草根瘤菌和紫云英根瘤菌中分别引入Rm nifA'-lacZ的质粒,可以测得β-gal活力,但其活力不受微氧诱导。当带有Rm nifA'-lacZ的三叶草根瘤菌和紫云英根瘤菌处于共生状态,β-gal的活力也无明显提高。推测苜蓿根瘤菌 nifA的诱导激活是受某些因子如fixLJ的专一作用。以大肠杆菌为材料在有氧和微氧下观察nifH'-lacZ受nifA的激活表达。RmnifA在有氧下不能激活Rm nifH'-lacZ和KpnifH'-lacZ的表达。同时证实RmnifA的mRNA在有氧下含量显著减少。     

铬天青S-溴化十六烷基三甲基铵分光光度法测定矿石中微量铍

我们参考文献进行了在碱性(pH9～10)介质中铍与铬天青S(CAS)及溴化十六烷基三甲基铵(CTMAB)生成红色三元络合物的比色条件试验,结合酒石酸,EDTA等隐蔽剂的使用,消除了大量铝及其它20多种离子的干扰。拟定了可不经分