混合阳离子固相萃取净化结合UPLC-MS/MS测定蘑菇及生物样本中鹅膏肽类毒素

建立了一种混合阳离子固相萃取净化结合超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定蘑菇、尿液及血浆中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽和羧基二羟鬼笔毒肽的方法。对于蘑菇样本,烘干粉碎后纯水超声提取,经混合阳离子柱(MCX)净化;对于尿液和血浆样本,乙腈提取后,经PRi ME MCX柱净化。净化的样本以甲醇和5 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相,在ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱上进行分离,电喷雾正离子多反应监测(MRM)模式检测,基质匹配外标法定量。结果表明,5种鹅膏肽类毒素在0.5～1000μg/L范围内均呈良好的线性关系,相关系数R²>0.999。方法检出限为0.1～0.5μg/kg(μg/L),定量限为0.5～1.0μg/kg(μg/L);3个加标浓度下的平均回收率为79.1%～103.5%,相对标准偏差(RSD)为0.2%～9.6%。该方法适用于含鹅膏毒肽蘑菇中毒的确证与临床诊断。