凡纳滨对虾亲环素A基因的克隆及表达分析

通过电子克隆所得基因序列设计引物,采用RT-PCR方法首次克隆得到长度为885 bp的凡纳滨对虾亲环素A（Cyclophilins A）CYPA基因cDNA序列,其开放阅读框为35~529 bp,可编码164个氨基酸.推算其分子量约为17.6×103,理论等电点为8.55.与其他物种的CYPA基因比对发现,该基因的氨基酸序列具有较高的保守性.基于氨基酸序列的聚类分析表明,凡纳滨对虾与斑节对虾的亲缘关系最近.荧光定量PCR的结果显示该基因在组织中广谱表达,在抗病组中,胃中的表达量最高,心脏中的表达量最低,差异约为2倍.而在感病组中,该基因在心脏中的表达量最高,肌肉中的表达量最低.利用ProtFun在线预测蛋白质的功能分类,表明CYPA基因可能是一免疫应答抑制因子,参与凡纳滨对虾免疫防御反应.     

用碳—阴树脂柱提取及纯化辅酶A

本文提出的连续式碳—阴树脂柱提纯CoA新方法,既提高了收率,又避免了原锌汞齐法的毒物危害,方法简易可行。用本法制得的结晶含CoA231u/mg,收率l7.0％;上柱洗脱的CoA溶液,如不经结晶直接制成CoA注射液,提取率20.9％,各项指标经广州药检所检验符合国家标准。