杜仲组织离体培养研究

以杜仲(EncommiaulmoidesOliver)当年生枝条的叶片、带芽茎段为外植体,基本培养基为MS,附加不同浓度的BA、KT和NAA.最佳芽诱导培养基为:MS KT1 0mg/L NAA0 1～0 5mg/L;MS BA2 0mg/L NAA0 1～0 5mg/L,最佳芽丛增殖培养基为:MS KT2 0mg/L NAA0 1～0 2mg/L;MS BA1 0～2 0mg/L NAA0 1～0 2mg/L;MS KT2 0mg/L IBA0 1～0 2mg/L;MS BA1 0～2 0mg/L IBA0 1～0 2mg/L,单芽增殖培养基:MS KT1 0mg/L NAA0 1mg/L,生根培养基:13MS KT0 1mg/L NAA0 5mg/L.     

基于转录组高通量测序分析白光对杜仲愈伤组织中绿原酸含量的影响

利用Illumina HiSeq 2500平台对光暗培养的杜仲愈伤组织进行了转录组高通量测序,利用BLAST软件进行差异表达基因的功能注释和富集分析,就白光(光强为12 000 lux,16 h 光照,8 h 黑暗)对杜仲愈伤组织中绿原酸含量的影响进行了研究.结果表明:通过Trinity软件合并组装后共获得62 030个Unigenes,通过BLASTX比对,共获得25 417(40.98%)个有注释信息的Unigenes.通过对KEGG通路进行深入分析表明,白光(光强为12 000 lux,16 h 光照,8 h 黑暗)培养杜仲愈伤组织18 d,与绿原酸合成相关的3种酶基因上调表达,它们分别为苯丙氨酸解氨酶(EC 4.3.1.24,phenylalanine ammonia-lyase,PAL)、肉桂酸-4-羟基化酶(EC 1.14.13.11,trans-cinnamate 4-monooxygenase,C4H)、奎宁酸羟基肉桂酰转移酶(EC 2.3.1.133,Shikimate o-hydroxyl-cinnamoyltransferase,HCT).由此推断,白光能促进杜仲愈伤组织中绿原酸的积累.研究结果为获取高产绿原酸资源和杜仲遗传分析提供有价值的资料.     

模拟酸雨对杜仲光合生理及生长的影响

研究了模拟酸雨对杜仲光合生理及生长的影响,结果表明:在系列模拟酸雨胁迫下,无论春、夏、秋季,杜仲叶叶绿素(Chl)含量和Chl a／b值随酸雨pH值降低而降低,呈显著正相关．pH 4．0～5．6酸雨在春、夏、秋季对杜仲叶Hill反应活力、CO2补偿点、光补偿点、光饱和点和最大净光合速率无显著影响,而在pH 3．5～2．5强酸雨胁迫下Hill反应活力逐渐降低,CO2补偿点和光补偿点明显升高,光饱和点、最大净光合速率则显著下降．另外, 酸雨各处理组最大净光合速率与杜仲总生物量、杜仲叶药用有效成分(绿原酸、桃叶珊瑚甙和总黄酮)含量呈显著正相关,表明酸雨通过影响杜仲光合生理活性,进而影响其生长和药用有效成分含量．     

杜仲形成层活动周期中多糖贮量和淀粉酶同工酶的变化

杜仲(Eucommia ulmoides)枝条中的多糖颗粒经Ⅰ-KI溶液染色不显蓝黑色反应,偏光显微镜检查也不显示各向异性。髓、木质部、木射线和皮层薄壁细胞内多糖贮量的变化和形成层的活动周期有关:从5月下旬至12月中旬,逐步积累:从12月下旬至翌年4月中旬则逐步消失。韧皮部薄壁细胞中的多糖颗粒很少,而且没有季节性变化。淀粉酶同工酶酶谱在不同组织中不同,并随形成层的活动状态而变化,但与多糖颗粒的积累和消失无相关关系。     

杜仲叶中总黄酮的醇提工艺

在杜仲叶中总黄酮的提取实验中, 单因素考察了乙醇浓度、提取温度、提取时间等因素的影响趋势,并以正交实验设计优选最佳提取条件,即以12倍量的50% 乙醇,在80 ℃条件下回流提取60 min,重复提取一次,总黄酮得率达3.08%,占固体提取物的31.9%,得率稳定、重现性较好.     

杜仲叶挥发油的GC—MS分析

本文对生长了一年的杜仲树叶中的挥发油采用色谱质谱联用分析技术分离鉴定。总共分出大小４５种成分，用谱图检索确认出其中的２５种，并用峰面积归一化法，给出了其相对含量确认部分占８７．６％。     

杜仲离体培养与快速繁殖

杜仲无菌苗顶芽在ＭＳ＋细胞分裂素１．５～３．０（ｍｇ／Ｌ，下同）＋ＩＡＡ０．１＋ＩＢＡ０．１＋ＮＡＡ０．１培养基中分化效果最佳，在ＭＳ＋细胞分裂素０．１～１．０培养基中扩增效果最好，在２／３ＭＳ＋生长素０．１～１．０培养基中生根效果最好。     

大孔树脂分离纯化杜仲叶中绿原酸的研究

通过静、动态吸附和洗脱实验,筛选出306型大孔树脂为绿原酸的吸附树脂;当上柱溶液pH值控制在2~3,吸附流速为4 mL/min,吸附完毕后用60%的乙醇洗脱,洗脱率在90%以上;洗脱液经浓缩干燥后得绿原酸粗品,纯度达40%以上。     

绿原酸的分离纯化工艺研究

研究从杜仲提取物中分离纯化绿原酸的工艺,确定其分离纯化参数.采用料液比1∶20水超声提取,上聚酰胺柱分离,4BV15％乙醇洗脱,洗脱浓缩液调pH为1-2静置结晶,可得85％以上的绿原酸粗晶,再甲醇重结晶,可得97％绿原酸白色针状晶体.采用此工艺可以将杜仲提取物中绿原酸由20％分离纯化至97％,工艺适合工业化生产.     

中药杜仲炮制的现代研究进展

目的对杜仲现代炮制的研究进展作一综述。方法通过文献研究,详细分析杜仲炮制火候、辅料及单一成分与药理作用在炮制前后的变化,全面了解杜仲现代炮制研究进展。结果杜仲炮制以盐炙法为主流方法,但炮制方法及条件尚需进一步深入全面的考察。结论建议综合分析杜仲数种活性成分与药理作用在炮制前后的变化,考察影响杜仲炮制效果的主要因素。