In vivo molecular evaluation of guinea pig skin incisions healing after surgical suture and laser tissue welding using Raman spectroscopy

The healing process in guinea pig skin following surgical incisions was evaluated at the molecular level, in vivo, by the use of Raman spectroscopy. After the incisions were closed either by suturing or by laser tissue welding (LTW), differences in the respective Raman spectra were identified. The study determined that the ratio of the Raman peaks of the amide III (1247 cm⁻¹) band to a peak at 1326 cm⁻¹ (the superposition of elastin and keratin bands) can be used to evaluate the progression of wound healing. Conformational changes in the amide I band (1633–1682 cm⁻¹) and spectrum changes in the range of 1450–1520 cm⁻¹ were observed in LTW and sutured skin. The stages of the healing process of the guinea pig skin following LTW and suturing were evaluated by Raman spectroscopy, using histopathology as the gold standard. LTW skin demonstrated better healing than sutured skin, exhibiting minimal hyperkeratosis, minimal collagen deposition, near-normal surface contour, and minimal loss of dermal appendages. A wavelet decomposition–reconstruction baseline correction algorithm was employed to remove the fluorescence wing from the Raman spectra.     

细叶百日草变异植株的组织培养及无性系建立

以变异细叶百日草嫩茎为材料,进行了愈伤组织的诱导、分化、试管苗生根、移栽的研究．结果表明：MS＋BA1．0＋2,4-D1．2为嫩茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基;MS＋Ag（NO3）2 2．0＋BA0．4是愈伤组织和不定芽分化培养的理想培养基;1／3MS＋IAA0．5是生根培养的理想培养基;以炉灰渣为基质移栽的成活率为94％,扦插的成活率为89％;定植成活的试管苗保持了后期生长很旺盛变异性状,出现了根系增加1倍左右的特点．     

DiI荧光标记的软骨细胞与支架材料复合后的观察

目的:通过Dil荧光染料标记观察软骨细胞在聚乳酸/乙醇酸共聚物支架(PLGA)体外和体内培养环境中的生长状态,为研究组织工程化软骨探索一种理想的软骨细胞示踪方法.方法:体外分离培养大鼠剑突软骨细胞,应用DiI标记软骨细胞,通过MTT法测定细胞的增殖活性.DiI荧光标记的软骨细胞种植于PLGA支架上分两组:一组体外培养1周,另一组体外培养1周后,再植入同系大鼠大网膜体内培养1周.分别取出细胞一支架复合物,在荧光显微镜下观察体外和体内条件下软骨细胞的荧光表达情况.结果:应用DiI标记不影响软骨细胞的增殖,MTT测定结果显示标记组和对照组的A值未见显著性差异(P>0.05).标记后的软骨细胞显示环状红色荧光,胞核未着色.体外培养和体内培养的软骨细胞一支架复合物,均可在荧光显微镜下观察到红色荧光表达.结论:DiI荧光染料能够有效标记软骨细胞,标记的细胞一支架复合物可直接在荧光显微镜下进行观察,可作为体外和体内构建组织工程软骨的较好的示踪方法.     

风车草的组织培养与快繁体系的建立

本实验以风车草（Graptopetalum paraguayense）的叶片为材料,研究其快繁成功．结果表明：正面叶片接种于琼脂或者MS培养基上,其无菌苗培养出苗率最高;疏松愈伤组织和胚性愈伤组织诱导的最佳培养基分别为：MS＋6-BA0．5mg／L＋2,4-D0mg／L;MS＋6-BA0．5＋2,4-D2．0;疏松愈伤芽诱导以及生根分别以：MS＋6-BAO．5m∥L＋NAAO．5m∥L;MS＋IBA0．5mg／L＋NAA0．5mg／L最适．各培养基pH5．8,附加0．7％的琼脂,3％蔗糖．炼苗和移栽的适当方案为：蛭石：珍珠岩=3：1灭菌培养基质中保湿培养;蛭石：珍珠岩=5：1未经灭菌的培养基质中炼苗培养．     

蛇足石杉的组织培养初探

针对蛇足石杉资源分散,资源更新周期长,难以大规模开采的情况,初步探讨了蛇足石杉的组织培养技术.以蛇足石杉茎尖为外植体,分别在1/2MS+0.05 μmol/L IBA+1.4 μmol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺、MS+0.05 μmol/L IBA+1.4 μmol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺、1/2MS+2 mg/L谷氨酰胺/无激素、MS+2 mg/L谷氨酰胺/无激素等4种培养基中培养.结果显示:较为适宜的初代培养基为2号培养基,即MS+0.05 μmol/L IBA+1.4μ mol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺.在组织培养工作中,污染问题比较严重,本实验中,采用了以下2种方法对外植体进行消毒：（1）70%酒精浸泡1 min→5% NaOCl浸泡1 min→7%H₂O₂浸泡10 min;（2）0.1%升汞液灭菌3’ →无菌水冲洗5次.结果显示第2种方法比较理想.     

野百合的组织培养研究

对采自大量子河森林公园的野百合进行鳞片诱导和快速繁殖组织培养研究.结果表明:鳞片下部可直接诱导生芽、生根,是初代培养的最佳外植体;6-BA浓度为0.5mg/L,NAA浓度分别为0.05mg/L,L和0.1mg/L有较高的芽诱导率;在NAA:6-BA=1:20的培养基中愈伤组织诱导结果较好;诱导鳞片生根的6-BA浓度不宜过高,0.5mg/L较适宜生根;鳞片凹面接触培养基仅有愈伤组织形成,凸面接触培养基可产生鳞芽;用低浓度(0.1mg/L～0.5mg/L)IAA诱导生根效果比NAA好;以1/2锯末+1/2洁净河沙为栽培基质的移栽苗长势最好.     

Application of atomic force microscopy to living samples from cells to fresh tissues

Atomic force microscopy is a novel method for imaging and characterization in biomedicine. However, high-resolution imaging of living samples from cells to tissues still remains a challenge. In this paper, two types of AFM working mode （contact mode and tapping mode） which are utilized for the imaging of living cells and tissues are discussed. A new magnetic tapping mode （MAC mode）, which is more suitable for living samples, and a novel data collecting system named TREC, are also introduced.     

日本落叶松胚性愈伤组织蛋白组分双向电泳分析

对日本落叶松(Larixleptolepis)胚性愈伤组织进行了组成特点和蛋白质组分双向电泳的研究.研究表明,胚性愈伤组织是由不同发育阶段的早期胚组成的细胞团,早期胚主要由长的胚柄细胞及其顶端的胚头细胞组成,而后者又具不同的分裂相.以三氯乙酸/丙酮法提取胚性组织的总蛋白,通过双向凝胶电泳获得了完整的全蛋白质图谱.运用图像分析软件(I mage Master2D)对电泳图谱分析表明:在凝胶上展现出475个蛋白质组分,并进一步确定每个蛋白质相应的分子质量、等电点和相对含量.从本研究所获得的具高分辨率日本落叶松胚性愈伤组织蛋白质图谱,将为今后与愈伤组织的分化能力相关的蛋白质的检测、分离和基因克隆,以及胚性能力相关蛋白标准化的制定等提供参考.     

不同激素及添加物对杭白菊组织培养的影响

以杭白菊茎尖为试材,将其接种在培养基上（以NAA,AC,2,4-D,6-BA及水解乳蛋白为5因素进行正交,设计16组培养基）进行愈伤诱导及出芽,探讨不同添加剂对杭白菊组织培养的影响,同时分析不同因素之间影响的显著性．结果表明,不同种类浓度配比对杭白菊组织培养会产生较大影响,最佳愈伤培养基组成为MS＋3mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋0．8mg／L2,4-D＋0．5％AC＋0．2％水解乳蛋白＋0．8％琼脂＋3％蔗糖;出芽培养基最佳组成为MS＋1mg／L6-BA＋0．5％AC＋0．8％琼脂＋3％蔗糖．