鱼类鳗弧菌6种毒力基因探针氨基玻片制作条件的初步构建

本文用玻璃作为片基,对其进行氨基修饰,将鳗弧菌6个毒力基因的寡核苷酸探针用微量移液器点样于氨基玻片表面,制备探针氨基玻片。制备好的探针玻片与6个毒力基因的地高辛标记的PCR产物进行杂交。本实验初步构建了探针氨基玻片的制备方法,同时实验结果还表明在PCR产物的标记及检测方法上仍然需要进一步的研究。     

一种共调控基因聚类的新方法

定义了一种基于滑动匹配的相似度, 并在此基础上提出一种能够自适应确定聚类数目的全局K-均值算法, 解决了现有共调控基因聚类方法无法考虑到基因的正反、 延时、 部分时间和差异表达全部4种共调控关系的问题. 将提出的算法应用于微阵列数据中, 并将实验结果与CLUSTER 3.0算法进行了比较, 验证了算法的可行性和有效性.     

解析心钠素基因多态性与运动能力的研究进程

从心钠素分子结构及生物学特性入手,归纳了人类从发现心钠素到心钠素基因的过程,并应用网络检索了国内外核心期刊有关心钠素基因多态性在医学和运动医学领域研究的相关文献.本文从心钠素与运动关系方面进行了综述,希望可以进一步推动心钠素基因多态位点与运动能力,尤其是耐力训练关联性的研究.     

用差减cDNA文库筛选由热激导致的小鼠睾丸中差异表达的基因

采用抑制性差减杂交（Suppression Subtractive Hybridization, SSH）方法,构建正常和热激小鼠睾丸组织的差减 cDNA 文库,以期 筛选出小鼠生精过程中对热敏感的基因。分别从正常和热激小鼠睾丸组织提取总RNA,反转录成cDNA,以正常小鼠睾丸组织cDNA作为待检组织(tester),以热激小鼠睾丸组织cDNA作为驱动组织(driver), 经过2轮杂交和抑制性PCR扩增,产物与T载体连接,经蓝白斑筛选,提取质粒,经EcoRI酶切鉴定插入片段并测序,由此构建了2种组织间差异表达基因的差减cDNA文库。用半定量RT-PCR方法,进一步验证 了该文库中差减出的基因基本上为差异表达的基因。对随机挑选其中的932个克隆测序,对有效测序的565个基因序列与GenBank数据库中发布的序列进行同源性比较,大部分片段都可以检索到同源序列。 结果显示,cPGES/p23等13个基因热激后表达量上调;septin2等120个基因热激后表达量下调。其中cPGES/p23为本研究中首次发现的小鼠生精过程中对热敏感的基因。     

转betA/als基因棉花生存竞争力和基因漂流的调查

对导入乙酰乳酸合成酶突变基因als及来自大肠杆菌的胆碱脱氢酶基因betA的棉花纯合株系T3、T4代植株的田间农艺学性状和基因漂流进行了研究。 结果表明,与野生型对照鲁棉研19相比,转betA/als基因棉花涉及生存竞争力的一些农艺学性状,如种子繁殖能力、贮存后活力以及盐碱地条件下的经济产量等显著提高,转基因棉花的棉花纤维马克隆值下降,其它农艺学性状无明显差别;获得的转基因性状之一除草剂抗性遗传稳定,并在田间表达良好;在转基因棉花释放区面积为6?m×6?m的条件下,als基因通过花粉介导进入野生型棉花的频率随着非转基因棉花种植区与释放区之间的距离增大而迅速降低,采取适当的隔离距离（大于200?m）,可以避免外源基因逃逸事件的发生。但设置隔离区时应考虑昆虫对花粉传播等不确定因素的影响,适当加大隔离距离。     

用荧光探针签别CYP2C9*3基因

用一种基激复合物荧光探针系统来签别碱基错配的CYP2C9*3基因,该系统选择两个分开的与靶点碱基相对应的12碱基荧光标记的寡核苷酸作为探针,分别对24碱基、47碱基、质粒(3165bp)的靶点CYP2C9基因和CYP2C9*3基因进行杂交配对,结果该基激复合物荧光探针系统能有效签别各种长度的CYP2C9基因和CYP2C9*3基因,背景干扰很低,灵敏度高,可尝试用于其他基因型的遗传多态性的签别。     

具有离散和分布时滞的随机基因神经网络的均方全局渐近稳定性

研究了一类具有混合时滞的随机神经网络的均方稳定性问题．不同于其他已有的文章,混合时滞对描述基因神经网络的分子浓度更具有现实意义．基于李雅普诺夫稳定性理论和线性矩阵不等式条件,给出了随机基因神经网络的均方渐近稳定性条件．相关的例子证明了理论结果的有效性．     

池蝶蚌(Hyriopsis Schlegelii)线粒体DNA COII基因的序列分析

用细胞色素氧化酶Ⅱ基因特异性引物,对人工选育后的F3代池蝶蚌的线粒体细胞色素氧化酶Ⅱ基因进行PCR扩增和双向测序,在10个个体中均得到序列一致的细胞色素氧化酶Ⅱ基因序列,长度为681bp;A、T、G、C含量分别为19.4%(132个)、30.4%(207个)、38.9%(265个)和11.3%(77个),A+T含量(58.3%)明显高于G+C(41.7%)含量,与其它淡水珠蚌科种类相同基因片段的碱基含量相似;密码子上4种碱基使用出现偏倚性,密码子第1位上碱基G使用率高达38.8%,碱基T为29.5%;密码子第2位上碱基T的使用率为38.8%,碱基C的使用率低至15.9%;密码子第3位上碱基T的使用率高达48.5%,而碱基C的使用率仅为4%;第3位碱基T的使用率比第二位高,这种递增现象也出现在高等无脊椎动物昆虫的COⅡ上。BLAST结果显示池蝶蚌COⅡ与三角帆蚌具有较高的同源性,相似性为95%,MP法构建的分子系统进化树表明这两种淡水珍珠育珠蚌的亲缘关系最近。     

PCR技术检测海运船舶压载水病原弧菌初探

船舶压载水引起的外来物种入侵,及由此引发的经济、环境和卫生等方面的灾害性后果,已成为当前世界海洋所面临的最大威胁之一.弧菌作为一种广泛存在于海洋环境的病原微生物,其数量已成为船舶压载水是否可以排放的一项指标.本文采用PCR扩增病原弧菌特征基因技术,结合弧菌相关16S rRNA基因文库,初步探讨压载水中病原弧菌快速检测技术.从采集自舟山远洋船舶压载水水样S1中,检测到hlyA和vvh基因,表明样品中含有霍乱弧菌(Vibrio cholerae)和创伤弧菌(V.vulnificus)的毒力基因.文库序列分析结果显示,重组克隆子中部分序列与副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)和费氏弧菌(V.fischeri)相似性较高.研究结果表明,压载水样品S1中含有多种对人和动植物有害的病原弧菌,对海洋生态平衡、公共卫生安全和海洋养殖业具有潜在危害.     

凡纳滨对虾基因组fosmid文库的构建及钙离子通道基因的筛选

本研究构建了凡纳滨对虾的基因组fosmid文库,该文库包含大约1.1×105个克隆,插入片段平均长度大于35 kb.根据和果蝇钙离子通道基因同源的凡纳滨对虾EST序列设计引物,对文库进行了PCR筛选,得到1个阳性克隆,测序结果显示该克隆包含有钙离子通道基因.研究结果为凡纳滨对虾的基因克隆和分子选育等研究奠定了基础.