表达结核分枝杆菌休眠相关抗原Rv2031c-Rv2626c融合蛋白

利用大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体pDE22,构建能够表达结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis, MTB）休眠相关抗原Rv2031c-Rv2626c融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌（Mycobacterium smegmatis, M.s）。采用聚合酶链反应（PCR）方法,从MTB H37Rv基因组DNA中扩增MTB休眠相关抗原Rv2031c和Rv2626c基因片段并克隆入pMD18-T载体,序列测定正确后分别亚克隆入大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体pDE22,将重组载体pDE22-Rv2031c-Rv2626c电穿孔导入M.s,42℃热诱导表达目的蛋白,并进行SDS-PAGE和Western-blot分析。利用PCR方法扩增获得MTB休眠相关抗原Rv2031c和Rv2626c基因片段,大小分别为435bp和480bp,基因测序与Genebank公布的基因序列完全一致。SDS-PAGE分析结果表明重组载体pDE22-Rv2031c-Rv2626c电穿导入M.s后能够特异性表达目的蛋白,大小约为35kDa,与理论值相符。Western-blot鉴定结果表明抗Rv2031c和抗Rv2626c的单克隆抗体均能够与目的蛋白发生特异性的反应,大小相一致。成功构建表达MTB休眠相关抗原Rv2031c-Rv2626c融合蛋白的重组M.s,并命名为Rv2031c-Rv2626c-rM.s,为其用于结核新型疫苗的研究奠定了基础。     

珙桐种子层积过程中抑制物活性的变化

为探明珙桐种子不同部位内源抑制物含量及其在层积过程中的变化情况,分别取层积12、16个月的珙桐种子,以甲醇和丙酮为提取剂,制备其种仁(胚和胚乳)、种壳的浸提液,分析各浸提液对白菜籽发芽的影响。结果表明:珙桐种仁和种壳中均含有发芽抑制物质; 随着浸提液质量浓度的升高,抑制物生理活性增强; 种仁浸提液抑制物的生理活性显著高于种壳浸提液; 种仁甲醇浸提液抑制物的生理活性显著高于丙酮浸提液,而两种提取剂中,种壳浸提液的生理活性差异不显著。低温层积12个月再变温层积4个月后,珙桐种子内源抑制物的生理活性显著降低,但此时种仁 0.09 g/mL的甲醇浸提液对白菜籽的发芽指数仍有显著的抑制作用,表明此时种仁中仍含有一定量的抑制物质。     

低温解除牡丹休眠过程中花芽细胞的膜脂过氧化研究

低温诱导解除牡丹休眠过程中,花芽细胞发生膜脂过氧化变化．低温诱导前期,花芽细胞内活性氧、O2·产生速率上升,然后急剧下降,低温处理24d趋于稳定．MDA含量变化趋势与O2^-·基本一致．SOD在低温诱导前期下降,后随低温的积累上升．POD活性在休眠解除过程中一直上升．CAT活性在低温处理16d上升至最大值,然后急剧下降,24d后稳定．一直处于温室较高温度下的对照植株,细胞的膜脂过氧化水平变化不大．试验表明,低温诱导牡丹花芽休眠解除过程中,细胞内活性氧、O2^-·产生速率快速上升,很可能是花芽体眠解除的信号,花芽细胞的膜脂过氧化程度与体眠解除有密切关系．     

桃新品种"丽红"抗寒性研究

以同期成熟品种“早凤王”为对照,对中早熟桃品种“丽红”休眠期及花期的抗寒性进行了系统研究。结果表明：“丽红”一年生冬态枝条表面有一层白色蜡质薄膜,可有效防止冬旱害的发生;越冬枝条有较高的电解质含量和较低的电解质渗出率;休眠枝、芽脯氨酸含量和束缚水含量均较高,水势较低,上述特点使其在休眠期有较强的抗低温能力。花期抗寒试验表明,0℃低温处理后“丽红”雌蕊的SOD、POD活性均高于对照,MDA含量则低于对照,呼吸速率相对平稳。花粉萌发试验表明,0℃低温对“丽红”雌蕊刺激花粉萌发能力的影响较小。该品种具有较强的抗寒性,栽培区域可适当北扩。     

青钱柳种子综合处理过程中内源激素的动态变化

青钱柳种子属于深休眠类型,在自然条件下,需要经过隔年甚至2年才能萌发,笔者对综合处理的青钱柳种子萌发过程中各种激素的变化进行分析。结果表明:随着层积时间的增长,其脱落酸(ABA)的含量逐渐减少,而赤霉素(GA)、生长素(IAA)、细胞分裂素(CTK)的含量则逐渐增加。赤霉素与脱落酸、生长素与脱落酸和细胞分裂素与脱落酸含量的比值也呈现出基本增加的趋势。进一步证实了赤霉素(GA)是种子萌发的促进物质。同时,生长素(IAA)、细胞分裂素(CTK)在解除种子休眠过程中也起到一定的促进作用。     

休眠解除过程中紫楠种子生理生化特征的变化

【目的】探究紫楠(Phoebe sheareri)种子层积过程中营养物质、酶活性和内源激素的动态变化,揭示种子解除休眠过程中的内在生理机制,为其休眠解除与促进萌发提供理论依据。【方法】以新鲜饱满的紫楠种子为试验材料,采用低温和变温层积处理,测定层积过程中的生理生化指标。【结果】层积处理能解除紫楠种子休眠,低温和变温层积处理的发芽率分别为85.83%、72.75%。紫楠种子中初始淀粉含量为467.88 mg/g,在层积过程中逐渐下降。可溶性糖、可溶性蛋白和粗脂肪均被不同程度地分解。淀粉酶、酸性磷酸酶(APA)和过氧化物酶(POD)活性均不断增强。在整个层积过程中生长素(IAA)、异戊烯基腺苷(IPA)、赤霉素(GA₃)含量不断增加,脱落酸(ABA)含量逐渐减少,IAA/ABA(质量比,下同)、IPA/ABA、GA₃/ABA不断增大。【结论】紫楠种子是中度休眠的种子,低温层积是加快紫楠种子萌发的较好方式。紫楠种子最主要的贮藏物质为淀粉,营养物质的转化与内源激素的协调作用均对紫楠种子休眠的解除起重要作用。     

山茱萸种子休眠原因与解除研究现状和展望

山茱萸是一种非常有价值的木本药用植物,但是其种子的休眠已经严重影响了山茱萸产业的发展,本文从山茱萸种子的种皮结构、胚的发育、内源抑制物三个方面对山茱萸休眠原因进行了论述;从破环山茱萸种皮结构、层积和激素三个方面对休眠的解除方法进行了论述。在此指明了今后山茱萸种子休眠的研究方向。     

盐胁迫对不同秋眠等级紫花苜蓿光合作用的影响

用0、50、100、150和200 m M Na Cl溶液处理不同秋眠等级紫花苜蓿标准品种Maverick、Archer和CUF101,观察形态特征和盐害级别,测定叶片净光合速率(Pn)、细胞间隙CO2浓度(Ci)和气孔导度(Gs),分析盐胁迫对不同秋眠等级紫花苜蓿光合特性的影响.不同秋眠等级紫花苜蓿植株叶片盐害级别随品种和处理浓度不同而不同,但均随Na Cl浓度的增加和胁迫时间的延长而加大.在较低Na Cl浓度下Maverick、Archer和CUF101光合响应存在着预警阶段-恢复阶段-耗尽阶段,在高Na Cl浓度下,所有的供试品种光合响应直接进入耗尽阶段.     

三叶木通种子休眠与发芽技术研究

通过不同种子处理试验,寻找三叶木通种子最优处理方法.试验结果表明:三叶木通种子有轻度的种皮障碍休眠和较明显的形态后熟作用,用10%的茶叶、草木灰液浸种,能提高种子发芽率;通过14天5~12℃温度保鲜贮藏,能完成形态后熟作用,但在低温后熟过程中,种子再次干燥会导致后熟效应解除,很大程度上降低种子的发芽率;5~12℃温度下,三叶木通种子发芽率80%以上,持续发芽时间26~35天.     

寄生药用植物锁阳种子的休眠原因及破除休眠的途径的研究

种子萌发试验表明，导致锁阳种子休眠的原因：１）锁阳小坚果的果皮坚硬；２）其种子中存在萌发抑制物质．破除休眠的方法是将小坚果在低温下浸泡一定时期，然后剥去其果皮，剥去果皮的种子用一定浓度的适当试剂处理，除去种子中萌发抑制物质，然后放在最佳萌发条件下时，锁阳种子就在没有白刺根部任何物质存在的情况下，可以完全脱离寄主萌发．