多肽与花粉钙调素的相互作用及对细胞功能的影响

研究了在Ca²⁺存在下,丹磺酰标记的花粉钙调素(D-pCaM)与合成的多肽相互作用的规律.研究结果表明,被研究的绝大多数多肽能与D-pCaM结合而形成复合物,使D-pCaM的荧光光谱发生变化.用荧光法测定了这些复合物的解离常数K_d,其中肽BP-13的Kd值为4.0nmol/L,是与pCaM结合能力最强的一个多肽.除证明了多肽的疏水性,预测二级结构形成倾向和链长对其与pCaM结合能力有影响外,还发现用D-丙氨酸取代肽链中的Gly或L-丙氨酸后,可改变肽对pCaM的亲和性,这为提高多肽与钙调素的亲和力提供了一条改进的途径.我们的研究还可以定性地说明不同来源CaM性质相似又有差异,反映了它们的高度保守性和变异性.同时还展示了所研究的多肽对细胞信息传导过程的影响,为研究CaM对细胞功能调节的作用机制和建立pCaM拮抗肽的活性筛选模型提供了思路.     

HPGMR叶片中Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶的初步研究

以 HPGMR农垦 5 8S为材料 ,研究了光周期处理前、后 Ca2 /Ca M依赖性蛋白激酶 (Ca2 /Ca M- PK)活性及其酶谱特征 .结果表明 :随着幼穗的发育 ,Ca2 /Ca M- PK活性均有提高 ,并且长日照和自然日照条件下的酶活提高程度大大高出短日照处理 .不同时期、不同处理的 Ca2 /Ca M- PK酶谱带数未见明显差异 ,但在总体上 ,不育植株 (L D和 ND)的酶带弱于可育植株 (SD)     

甜菊钙调蛋白基因的克隆及结构分析

钙调蛋白（Calmodulin）是生物细胞内一种重要的调控蛋白，通过其与靶酶的相互作用控制细胞正常的生长发育及细胞对外界环境变化的反应，我们从甜菊顶芽和花芽中提取总RNA，逆转录合成cDNA第一链，以此为模板，参考GenBank上已发表植物的钙调蛋白基因序列合成5′端和3′端引物，利用多聚酶链式反应（PCR）扩增并克隆得到了甜菊钙调蛋白基因的两个异型基因，序列分析表明，它们均由450个核苷酸组成，编码148个氨基酸，在核苷酸序列上与迄今已知的多种植物钙调蛋白均有很高的同源性，同源率在83％以上，编码的氨基酸序列同源性更同，同源率高达95％以上，这两个基因之间存在差异，其核苷酸序列同源率为85％，编码区的氨基酸序列的同源率为99％，仅在第122个氨基酸由ALA代替了VAL。     

光敏胞质雄性不育小麦NAD激酶和NADP磷酸酶对光周期的反应

研究了光敏感胞质雄性不育小麦及其对照可育系，在不同生育期叶片内ＮＡＤ激酶和ＮＡＤＰ磷酸酶的活性对不同光周期的反应．ＬＤ下可育核供体小麦叶片内的ＮＡＤ激酶总活性、ＣａＭ依赖性和ＣａＭ非依赖性ＮＡＤ激酶活性均略高于ＳＤ，但差别不显著；ＮＡＤＰ磷酸酶活性在孕穗、抽穗和籽粒灌浆期均高出ＳＤ一倍以上．光敏胞质雄性不育小麦在ＬＤ和ＳＤ下，叶片中的ＮＡＤ激酶总活性、ＣａＭ依赖性和ＣａＭ非依赖性ＮＡＤ激酶活性以及ＮＡＤＰ磷酸酶活性均有明显差别，而且ＬＤ下ＣａＭ依赖性ＮＡＤ激酶活性逐渐被ＣａＭ非依赖性ＮＡＤ激酶活性所取代．这反应出光敏胞质雄性不育小麦体内的ＮＡＤ激酶和ＮＡＤＰ磷酸酶活性比核供体正常可育系对光周期的反应更敏感，这可能是ＬＤ导致光敏小麦育性转换和花粉败育的原因之一．     

Metal binding discrimination of the calmodulin Q41C/K75C mutant on Ca~(2+) and La~(3+)

Calmodulin (CaM) is a multifunctional Ca2+-binding protein regulating the activity of many enzymes in response to fluctuation of the intracellular Ca2+ level. It has been shown that a CaM Q41C/K75C mutant (CaMSS) with a disulfide bond in the N-terminal domain exhibits greatly reduced affinity to Ca2+. In the present study, the experimental results revealed a unique metal binding pattern in CaMSS towards La3+ and Ca2+ separately: the mutant protein binds Ca2+ at site Ⅰ, Ⅲ and IV; however, it binds La3+ at si...     

Extracellular calmodulin acceleratesrbcS-GUS expression in suspension-cultured transgenic tobacco cell

The role of extracellular calmodulin in regulating expression of rbcS in darkness was examined. A suspension-cultured cell line was generated from the transgenic rbcS-GUS tobacco. It was demonstrated that purified calmodulin added to the media enhanced rbcS-GUS expression. The time course of expression of rbcS-GUS and that of the secretion of calmodulin in the suspended transgenic tobacco cells in darkness were very similar. Both showed initial increase followed by decline with maximum calmodulin secretion preceding maximum GUS expression. The addition of membrane-impermeable calmodulin antagonist W7-agarose inhibited the expression of rbcS-GUS in darkness, but this inhibitory effect was completely reversed by adding exogenous purified calmodulin. These results provide the first evidence that extracellular calmodulin accelerates rbcS gene expression.     

电极电势对Au/CaM膜电化学行为的影响

采用交流阻抗的方法，在包含1mmol/L Fe(CN)^3-/4-6的0．15mol/L的NaCl溶液中，研究了不同电极电势对Au/CaM膜电化学行为的影响，结果表明，CaM的空间构型随电极电势的变化不断变化，且在一定电势范围内，随着电极电势的增大，CaM在Au表面的排列越致密。为利用电化学方法研究CaM在不同电场中的变化规律提供了新的思路。     

花椰菜钙调素和兔抗花椰菜钙调素的初步应用研究

用花椰菜ＣａＭ和兔抗花椰菜ＣａＭ建立了定量测定人血清中抗ＣａＭ自身抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法．兔抗花椰菜ＣａＭ和兔抗牛脑ＣａＭ对花椰菜ＣａＭ有基本相同的亲和力．用花椰菜ＣａＭ和牛脑ＣａＭ作为检测抗原，测定人血清中抗ＣａＭ自身抗体得到同样的结果．临床检测１４２例多种疾病患者血清的结果显示，抗ＣａＭ自身抗体水平升高与类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、肝硬化、过敏性紫癜等疾病有密切关系