矮秆种质的赤霉酸反应和株高遗传模型的分析

通过赤霉酸处理及遗传模型分析小麦／冰草衍生系的矮秆种质得知：8个矮秆种质均为赤霉酸不敏感型。其中的3648—3652的株高是多基因控制的数量性状,其遗传模型是两对主基因加多对微效基因控制的混合遗传模型。     

Cloning, Characterization, and Expression Analysis of Calreticulin from Pearl Oyster Pinctada fucata

Calreticulin is a unique calcium-binding protein with multiple functions mostly located in the sarcoplasmic/endoplasmic reticulum. A large amount of calcium is absorbed from the medium and transported to mineralization sites during biomineralization in pearl oyster. This paper describes the cloning of the full-length cDNA of calreticulin from Pinctada fucata, namely PCRT. PCRT encodes a deduced 414-amino acid protein, which includes a predicted 17- amino acid signal peptide and an endoplasmic reticulum retrieval sequence HDEL. The protein shows 63%-76% sequence identity and shares some common characteristics with calreticulins from other species. Semi-quantitative RT-PCR indicates that PCRT is ubiquitously expressed in all tissues tested with the highest expression in the hemolymph and the mantle. In situ hybridization analysis of PCRT in the mantle showed strong signals in the inner fold, the inner side of middle fold, and the inner side of outer fold of the mantle epithelium, All these results suggest PCRT might be involved in Ca^2＋ transport and storage during oyster biomineralization.     

犬细小病毒CPV-SHZ分离株VP2基因的克隆与序列分析

以本实验室分离鉴定犬细小病毒新疆石河子株（CPV-SHZ）的DNA为模板,根据基因库已发表CPV序列设计合成了VP2基因的1对特异引物,进行聚合酶链式反应,扩增出约1.7kb的片段,按常规方法克隆进pMD18-T载体,经EcoR I和Sal I双酶切筛选到阳性质粒。测序得到VP2全基因组序列,并登陆Genbank（EU170352）。进一步对该片段进行序列分析,结果表明：所扩增基因片段长度为1755bp,与CPV参考株毒株V154（Type2a）、LCPV-V204（Type2b）、LCPV-V139（Type 2c（a））、LCPV-V203（Type 2c（a））,其核苷酸的同源性分别为99.32%、98.75%、98.97%、98.69%,确定CPV-SHZ株基因型为2a型,将其同我国和世界其他国家主要分离株进行基因系统发生进化关系分析,结果表明,其与我国北京分离株BJ018/07亲缘关系较近。     

植物无标记转化的诱导表达Cre/loxP重组系统的构建

应用Cre/loxP系统位点专一性重组的特点构建诱导表达的定位重组系统,用以特异性的敲除转基因植物的标记基因.为了获得诱导表达启动子,从大豆基因组DNA中用pfu酶克隆热激蛋白启动子gmhsp17.5c,将其克隆到pUC118-HincⅡ载体并测序.结果表明,508nt的gmhsp17.5c与已报道序列(GenBank,AF544399)比较,核苷酸的同源性为99.8%.利用该诱导启动子分别构建了含gmhs p17.5c-cre基因组件和gmhsp17.5c-gus基因组的诱导型植物表达载体pC23HC和pC23HG.此外1个含有loxP-gus-loxP组件的组成型植物表达载体pC23LG被构建.通过对3个植物表达载体做多重酶切及亚克隆后测序分析表明载体pC23HC全长10947bp,载体pC23HG全长11396bp,载体pC23LG全长11900bp,符合预期设计.一套由pC23HC和pC23LG组成的植物无标记转化的诱导表达Cre/loxP重组系统被构建,为进一步将诱导表达的标记基因删除系统用于植物的无标记转化奠定基础.     

鸭瘟病毒强、弱毒株TK基因的克隆与序列测定

根据GenBank上已发表的鸭瘟病毒TK基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,分别扩增鸭瘟病毒标准强毒株(DPV-F34)和鸭瘟鸡胚化弱毒疫苗株(C-KCE)的TK基因,将它们分别克隆入pBS-T载体,转化TOP10大肠杆菌,对阳性的重组质粒进行序列测定.结果表明:DPV-F34与DPVC-KCE的TK基因长度均为1077bp,编码358个氨基酸,二者的核苷酸与氨基酸组成具有很高的同源性,分别为99.4%和98.9%.     

大鼠肝再生中细胞周期相关基因表达谱与肝脏细胞增殖活动关系分析

肝再生中细胞增殖必不可少。为在基因转录水平了解大鼠肝再生中细胞周期相关基因的表达动态和作用,文中用查阅网站资料和相关论文等方法获得上述基因,用Rat Genome 2302.0芯片检测它们在大鼠再生肝中表达情况,用比较真、假手术中基因的有意义表达异同确定肝再生相关基因。初步证实上述基因中290个基因与肝再生相关。其中,肝再生的肝细胞激活期（0.5—4h）,G0／G1过渡期（4—6h）,肝细胞的第一个细胞周期G1期（6—12h）,S期（12—24h）,G2期（24—30h）和M期（30—36h）,肝细胞的第二个细胞周期（36—66h）,细胞分化和组织结构功能重建期（72—168h）等8个时期起始表达的基因数为148,32,30,92,16,16,14和2;基因总表达次数为307,155,224,484,235,239,824和467,根据基因表达变化推测,肝再生中有38％的细胞周期相关基因的表达谱发生了变化。     

烟草γ－微管蛋白基因沉默干扰植株的极性生长

为进一步了解γ－微管蛋白（ytubulin）在植物细胞中的功能,利用土壤农杆菌介导的转化技术,将含部分γ－tubulin cDNA的片段以正反串联的方式导入烟草（N．tobacum var．Samsun NN）无菌苗中,观察并分析了tubulin低表达植株的表型．结果表明,γ－tubulin低表达干扰了植株的极性生长,表现为大部分转化株出现了多个生长点或有侧枝发生;叶片形态异常,部分叶片背腹性不明显,有大量的联体叶或筒状叶出现;植株主根不发达而侧根呈强势生长．另外,植株生长素的含量出现异常,其极性运输载体PGP1表达受到抑制．由这些结果推测,γ－tubulin基因沉默对植株极性生长的干扰可能与生长素及其极性运输异常有关．     

伪狂犬病病毒主要毒力基因缺失后的免疫原性研究

本试验研究伪狂犬病病毒（PRV）基因缺失疫苗株D1、D2和D3的免疫原性．对4周龄仔猪按不同剂量分别肌注接种D1、D2、D3后,于7、14d后采血：14d后用10^7pFU强毒株PRVFa滴鼻攻毒所有试验猪,攻毒7d后检查PRV在猪体内器官的分布．基因缺失毒株接种后试验组仔猪体温略有升高,接种部位未发生炎性反应,不向外散毒．PRVFa攻毒后试验组的仔猪体温稍有升高但不超过40℃,对照接毒组连续4d均超过40℃、有1头出现明显神经症状并死亡．强毒攻毒后,各剂量免疫组散毒均为2～3d,而对照组、同居猪散毒均为5d．对照组10个器官组织（大脑、小脑、三叉神经、心、肺、肝、肾、淋巴结、脾和扁桃体）均检测出PRV;D1组除大脑、小脑、肺脏外均检测出PRV;D2、D3组除大脑、小脑外,其它均检出PRV．免疫组的保护率均为100％,对照组为75％．试验结果表明D1、D2和D3能对接种猪提供充分的保护;攻毒后疫苗接种猪都向外排毒,但散毒天数均远低于对照组且未从同居感染猪中分离出病毒;D1、D2和D3是具有高度免疫原性且接种安全的基因缺失疫苗株．     

井冈霉亚基胺A高产突变株的构建

通过接合转移将一个带有阿泊拉抗性基因和双交换臂的穿梭质粒pJTU609导入井冈霉素高产菌株吸水链霉菌井冈变种(Streptomyces hygroscopicus var.jinganggensis)DX546中,将负责井冈霉素A生物合成最后一步糖基转移中的糖基转移酶基因valG置换突变,多聚酶链式反应结果显示valG被阿泊拉霉素抗性基因成功置换,通过高压液相色谱检测证实突变株的发酵产物中井冈霉亚基胺A的产量得到大幅提高.     

杨焕明：转基因本身没有毒

一些消费者怀疑转基因蛋白会造成过敏源引起食品过敏,科学家建议消费者不必过度紧张。在第13届国际生物技术大会上,杨焕明院士说,“实际上天然的食品也是有过敏反应的。”他认为,国家一方面要促进转基因食品的发展,另一方面要用严格的规范来评价转基因食品的安全性。比如油料作物,转基因大豆,严格讲转基因以后,基因的成分到不了油脂里面,食用是安全的。